1. 怎样测定黄体酮胶囊中的黄体酮含量
益玛欣 黄体酮胶囊￥3 4.20 测定黄体酮含量主要用高效液相色谱法，高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 方法原理：供试品和内标均制成甲醇溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测黄体酮(C21H30O2)和内标己烯雌酚的吸收值，计算出其含量。 试剂：甲醇 仪器设备： 1. 仪器 (1) 高效液相色谱仪 (2) 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按黄体酮峰计算应不低于1000，黄体酮峰与内标物质峰的分离度应符合要求。 (3) 紫外吸收检测器 2. 色谱条件 (1) 流动相：甲醇+水= 65 35 (2) 检测波长：254nm (3) 柱温：室温 试样制备 1. 称取供试品：取本品25mg，精密称定，置25mL量瓶中。 2. 对照品溶液的制备：精密称取黄体酮对照品适量，加甲醇溶解并稀释成溶液。 3. 内标溶液的制备：取己烯雌酚25mg，置25mL量瓶中，加稀甲醇溶解并稀释至刻度，即得。 4. 供试品溶液的制备：上述供试品加稀甲醇溶解稀释至刻度，即得供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 操作步骤： 分别精密吸取上述供试品溶液与内标溶液5mL，置25mL量瓶中，用稀甲醇稀释至刻度，混合均匀，取5μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定黄体酮和内标己烯雌酚的吸收值，按内标法以峰面积计算，即得。