口蹄疫疫苗含量的检测方法

⑴ 如何诊断与预防牛口蹄疫

口蹄疫俗称“口疮”、“蹄癀”，是由口蹄疫病毒引起的一种人和偶蹄动物的急性、发热性、高度接触性传染病。主要临床症状表现为口腔黏膜、唇、蹄部和乳房皮肤发生水疱和溃烂。

【病因】

该病由口蹄疫病毒引起。口蹄疫病毒是动物RNA病毒，呈圆形，直径20～25纳米，该病毒具有多型性、变异性等特点，目前全世界有7个主型：A、O、C、南非1、南非2、南非3和亚洲Ⅰ型。各型之间不能互相免疫，即感染了此型病毒的动物，仍可感染其他型病毒。各型的临床表现相同。该病毒对动物致病力特强，1克新鲜的牛舌皮毒，捣碎成糊状，稀释10⁷～10⁸倍后，取1毫升舌面接种牛，还能使牛发病。病毒存在于病牛的水疱、唾液、血液、粪、尿及乳汁中。病毒对外界抵抗力很强，不怕干燥，但对日光、热、酸、碱则均敏感。

【流行病学】

不同地区可表现为不同的季节性，牧区一般从秋末开始，冬季加剧，春季减轻，夏季平息，在农区，这种季节性不明显。病牛是传染源，传播途径是通过直接接触和间接接触，经消化道、损伤的黏膜、皮肤和呼吸道传染。口蹄疫病毒传染性很强，一旦发生，呈流行性，且每隔1～2年或3～5年就流行1次。有一定的周期性。

【症状】

潜伏期平均为2～4天，长者可达1周左右。病牛体温升高至40～41℃，精神不振，食欲减退，流涎。1～2天后，唇内面、齿龈、舌面和颊部黏膜出现1～3厘米见方的白色水疱，大量流涎，水疱破裂形成糜烂，病牛因口腔疼痛采食困难，进食减少或不进食。水疱破裂后，体温下降至正常，糜烂部位逐渐愈合。与水疱出现的同时或稍后，蹄部的趾间、蹄冠的皮肤也出现水疱，并很快破裂，病畜不愿意行走，严重者蹄匣脱落。在牛的鼻部和乳头上也出现水疱，之后破裂，形成粗糙的、有出血的颗粒状糜烂面。感染的怀孕母牛经常出现流产。病程为1周左右，病变部位恢复很快，全身症状也逐渐好转，如果发生在蹄部，病程较长，一般为2～3周，死亡率低，不超过1%～3%。但是如果病毒侵害心肌时，可使病情恶化，导致心脏出现麻痹而突然死亡。

【病理变化】

主要在口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤出现水疱及糜烂面。病毒毒素侵害心肌而死亡的牛心肌变性和出血，而且在心肌上可看到许多大小不等、形态不整齐的灰白色或灰黄色混浊、无光泽的条纹样病灶，称为“虎斑心”。

【实验室检查】

作病毒分离，采用鸡胚和细胞，培养分离病毒。血清学检查主要应用反向间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等检测病毒抗原。

【预防】

口蹄疫由于发病率高、传播快和易造成大流行等特点，因此在防治上应本着“早、快、严、小”的原则，充分发动群众，严格执行各项兽医卫生防疫制度，采用综合性防疫措施。

（1）发生疫情时的措施

①发生疫情时应立即向上级和有关部门报告，并迅速采取病料（水疱和水疱液）送有关单位确诊、定型。

②划定疫区，严格封锁。疫点要求封死，人、畜、畜产品及用具等都不能出入，查明传染来源。

③对疫区内所有易感家畜进行普查，将病畜和可疑病畜立即隔离。同时对被病畜的分泌物、排泄物污染的场所、用具等用2%烧碱或2%甲醛溶液进行认真消毒。

④建成免疫带。为防止疫情继续蔓延扩大，对疫区和疫区外的受威胁区的易感家畜，立即用与当地流行的相同病毒型的、亚型的减毒活苗和灭活苗进行接种。以建立免疫带，这是综合性防疫措施中的一个重要环节。

⑤扑杀病畜，死畜应焚烧或深埋。

⑥疫区解除封锁的时间，经过全面消毒，报有关部门同意后，才可解除封锁。实践证明，凡疫情报告及时、隔离早、封锁严、消毒彻底的畜牧场，都能取得迅速控制和扑灭疫情的效果。

（2）平时的措施

①平时对家畜要严格检疫，每年夏秋季节用口蹄疫疫苗对牛、羊进行预防注射。

②加强饲养管理，搞好环境卫生和消毒工作。

此外，本病发生和流行时，人可因与病畜接触或饮乳偶尔感染。应注意人身防护。

⑵ 口蹄疫的检测

1.蹄疫反转录聚合酶链反应（RT-PCR），用于检测疑似感染动物水疱皮或水疱液中所有血清型口蹄疫病毒，适用于口蹄疫病毒的检测、诊断和流行病学调查。
原理：利用异硫氰酸胍方法提取RNA，在反转录酶的作用下，以RNA为模板，以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链。利用西安天隆科技有限公司生产的DTC型基因扩增仪，在TaqDNA聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火、中温延伸的循环，使特异性DNA片段的基因拷贝数放大一倍。经过35个循环，最终使基因放大数百万倍。将扩增产物进行电泳，经溴化乙锭染色后，在紫外灯照射下，肉眼可见DNA片段的扩增带。该方法可以检测所有亚型的口蹄疫病毒，检测结果为阳性，需进一步采用分型诊断试剂盒进行进一步检测。
2.血清学试验 ，ELISA是目前检测FMDV感染较为常用的诊断方法，其与补结试验、中和试验及间接血凝抑制、免疫扩散沉淀试验相比较、具有灵敏、快速、价廉等优点。

⑶ 口蹄疫实验室检查方法有哪些

这个是在网上帮你找到的。

口蹄疫病毒具有多型性，而其流行特点和临床症状一样，其病毒属于哪一型，需经实验室检查才能确定。另外，猪口蹄疫与猪水疱病的临床症状几乎无差别，也有赖于实验室检查予以鉴别。首先将病猪蹄部用清水洗净，用干净剪子剪取水疱皮，装人青霉素（或链霉素）空瓶，最好采取3-5头病猪的水疱皮，冷藏保管，一并迅速送到有关检验部门检查。

传统的方法是补体结合试验和乳鼠血清保护试验。以后又采用反向间接血凝试验和琼脂扩散试验，近来常用酶联免疫吸附试验。据报道，酶联免疫吸附试验比反向间接血凝试验更灵敏可靠，阻断夹心酶联免疫吸附试验已用于进出口动物血清的检测。

⑷ 常用的诊断口蹄疫的方法有哪些

（1）根据流行特点：本病呈急性经过，流行性传播，主要侵害偶蹄兽，一般为良性转归。
（2）根据临床症状：一般表现在口腔黏膜、蹄部皮肤、乳房、乳头、鼻端、鼻孔形成水疱和溃疡。
（3）实验室诊断：由于口蹄疫的临诊特征与水疱性口炎、水疱病、水疱疹极为相似，为此不能作为确诊的依据，必须采取水疱液或水疱皮进行以下几方面的实验室诊断。
小鼠接种试验：将病料用青、链霉素处理后分别接种成年、2日龄和7～9日龄小鼠，如2日龄和7～9日龄乳鼠都发病死亡，可诊断为口蹄疫，如仅2日龄乳鼠发病死亡则为猪水疱病。
血清保护试验：通常采用乳鼠作血清保护试验。可用已知血清鉴定未知病毒，也可用已知病毒鉴定未知血清。
血清中和试验：可用于鉴定康复猪的抗体和病毒。采用乳鼠中和试验或细胞中和试验均可。此外，也可应用对流免疫电泳、反向间接血凝抵制试验、补体结合试验检测病毒或抗体，从而作出诊断。
抗酸性（pH5.0）试验：依据口蹄疫病毒对pH5.0敏感，而猪水疱病病能抗pH5.0的特性，可以鉴别这两种病毒。