㈠ 请举一例简述蛋白质激酶催化反应的生物学意义
蛋白激酶（protein kinases）又称蛋白质磷酸化酶(protein phosphakinase)。一类催化蛋白质磷酸化反应的酶。磷酸化(由激酶催化)和去磷酸化(由磷酸酶催化)是控制细胞周期的关键。它们都被用来控制调控途径自身活性和执行调控途径决定的底物活性。细胞周期调控途径由一系列激酶和磷酸酶组成，它们通过将途径的下一个底物磷酸化和去磷酸化而对外来信号和检验点做出反应。途径最终显示的是通过控制M 期激酶(或S 期激酶)的磷酸化状态决定其活性。
M 期激酶的激活引发M 期的开始，它的失活是离开M 期必须的。这表明M 期激酶调控的活动是可转换的：细胞重新组织形成有丝分裂纺锤体要求底物磷酸化，返回到细胞间期状态要求同一底物去磷酸化。
M 期激酶作用的靶位是什么？细胞主要的重新组织发生在有丝分裂中，MPF 诱导有丝分裂的能力说明，M 期激酶直接或间接地引发这些活动。我们在后面讨论结构的重新组织，现在要探讨M 期激酶对多种蛋白质底物的作用是直接的还是间接的。对其作用有两种假设的模型:
它可能是磷酸化靶蛋白质的“主调控因子”，靶蛋白轮流作用调控其它必须的功能，一个典型的级联反应。
它可能是一个“工作室”，直接磷酸化执行调控功能或是周期中细胞重新组织所必须的决定性底物。
被M 期激酶磷酸化的底物唯一共有的性质是都存在一对Ser-Pro 序列，位于碱性残基的侧面(最常见的是Ser-Pro-X-Lys 形式)。潜在的底物依赖于体内M 期激酶准备磷酸化底物的能力，这些底物包括H1 组蛋白(可能是染色体凝集的需要)、核纤层蛋白质(可能是核膜溶解的需要)、核仁素(Nucleolin，阻断核糖体合成)和其它结构性酶活性。这些证据的力度不同，取决于在体内某种循环方式中哪个底物被磷酸化，以及M 期激酶是否是实际激活酶。然而，从多种底物中，M 期激酶似乎直接作用于那些有丝分裂中细胞结构改变涉及的多种蛋白质。
确定一个潜在底物在细胞周期中是Cdc2 的有效靶点的标准是什么呢？在体内相同的位点应被Cdc2 磷酸化，当Cdc2 被激活时，它就被磷酸化。体内Cdc2 被周期性磷酸化。理想情况下，体内Cdc2 激酶活性的突变可能阻止磷酸化，但目前仅在酵母中是这样。要做出这样的结论，磷酸化在细胞周期中是一个明显的活动，蛋白质的一些功能必须被磷酸基团的存在改变。这可以通过标记的磷酸化氨基酸的突变鉴定没有磷酸化是否阻止有丝分裂的功能。
Cdc2 激酶研究较多的底物是H1 组蛋白(组成染色质主要蛋白质的五种组蛋白质之一，见第19 章)。早就知道H1 在细胞周期中被磷酸化，在S 期加上两个磷酸基团，有丝分裂时再加上4 个磷酸基团。细胞主要的H1 激酶活性由M 期激酶提供。
细胞周期中磷酸化H1 的目的是一个值得思索的问题，因为没有直接表明它对染色质结构有影响。可能与M 期染色体凝集相关，可能为复制(可能需要解旋)或复制后的结果(为有丝分裂的开始做准备)做准备，这些假设是合理的，但在S 期这些修饰发生的时间尚缺乏了解。然而，H1 组蛋白的确是Cdc2 发动的激酶的很好底物，因此H1 激酶活性已成为检测体内激酶活性的常用方法。例如，这种检测对酿酒酵母很适用，通过检测H1 激酶活性评估M 期激酶的周期活性，尽管实际上这种酵母通常不含H1 组蛋白。
㈡ 在细胞周期的运转调控中，细胞周期蛋白（cyclin）和细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶（CDK）是如何发挥作用的
在细胞周期的后期逐渐合成、至周期的中间阶段突然消失的周期性存在蛋白，成为细胞周期蛋白。细胞周期蛋白可分为3类：S期周期蛋白，M期周期蛋白，G1期周期蛋白。S期周期蛋白为cyclin A，在S期开始表达，到中期时开始消失；M期周期蛋白为cyclin B，在S期开始表达，在G2/M期到达峰值，中期到后期转换时消失。G1期周期蛋白在脊椎动物中位cyclin C、D、E，在酵母中为Cln1、Cln2、Cln3，他们在G1期开始表达，进入S期后消失。
能与细胞周期蛋白结合并将周期蛋白作为其调节亚单位、进而表现出蛋白激酶活性的蛋白统称为细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶，简称为CDK激酶。
细胞由G1期向S期转化主要受G1期CDK激酶控制。哺乳动物细胞中，与G1期细胞周期蛋白结合的CDK激酶主要包括CDK2、CDK4和CDK6。cyclin D主要与CDK4和CDK6结合并调节后者活性；cyclin A常被划分为M期周期蛋白，但它也可与CDK2结合使后者表现激酶活性，说明cyclin A可能参与调控G1/S期转化过程。cyclin E在G1/S期与CDK2结合，呈现CDK2的激酶活性促进细胞进入S期。
G2/M期主要受CDK1激酶调控，CDK1激酶即MPF,或P34cdc2蛋白和细胞周期蛋白cyclin B组成。CDK1蛋白本身不具有蛋白激酶的活性。当cyclin A/B含量积累到一定值时，两者相互结合成复合体，结合cyclin的CDK1被Wee1将Thr14和Tyr15磷酸化，并被CDK激活激酶将Thr161磷酸化。在M期，Wee1的活性下降，cdc25使CDK1的Thr14和Tyr15去磷酸化，其激酶活性才能表现出来。在G2/M期，cyclin A、cyclin B与CDK1结合，CDK1使底物蛋白磷酸化，如将组蛋白H1磷酸化导致染色体凝缩，核纤层蛋白磷酸化使核膜解体。
在M期，当MPF活性达到最高时，激活后期促进因子APC，将泛素连接在cycli A和cyclin B上，通过多泛素化作用，使它们被蛋白酶体降解，完成一个细胞周期。
㈢ PKA（蛋白激酶A）的活性如何测定
目的研究蛋白激酶C(protein KinaseC,PKC)和蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)在甲状腺癌发生过程中的作用.方法利用酶的放射分析方法测定手术切除经病理证实的18例甲状腺癌患者和17例甲状腺癌患者手术切除的肿瘤组织中PKC和PKA活性水平.结果甲状腺癌组织中胞膜和胞浆PKC活性分别为7.280±2.380和7.397±4.065,PKA活性水平为1.716±0.923.甲状腺癌组织中胞膜和胞浆PKC活性分别为0.515±0.676和0.347±0.332,PKA活性水平为0.646±0.324.胞浆部分PKC与PKA活性比值:甲状腺癌组织为4.3;甲状腺癌组织为0.53.结论PKC与PKA均参入甲状腺癌细胞的增殖过程.
㈣ 如何探究细胞中某个蛋白激酶的活性
MPF即卵细胞促进成熟因子（maturation-promotingfactor），或细胞分裂促进因子。在成熟的卵母细胞、分裂期粘菌、酵母等中可提取到这种促细胞分裂因子。由两个亚基组成，一种是细胞周期蛋白，一个是依赖周期蛋白起作用的蛋白激酶，其中周期蛋白为调节亚基。能够促使染色体凝集，使细胞由G2期进入M期的因子。在结构上，它是一种复合物，由周期蛋白依赖性蛋白激酶（Cdk）和G2期周期蛋白组成，其中，周期蛋白对蛋白激酶起激活作用，周期蛋白依赖性蛋白激酶是催化亚基,它能够将磷酸基团从ATP转移到特定底物的丝氨酸和苏氨酸残基上。酵母细胞周期中只有一种Cdk,而哺乳动物的细胞周期中有多种Cdk,所以哺乳动物的MPF是由Cdk1和周期蛋白B组成的复合物。有丝分裂期细胞与间期细胞融合后，会使间期细胞产生形态各异的染色体凝集，称作早熟染色体凝集。这一现象表明，分裂期细胞中可能存在某种诱导染色体发生凝集的因子。在成熟卵母细胞分裂期黏菌酵母等中提取到了这种促细胞分裂因子，称为成熟促进因子（Maturation-promotingfactor）。MPF是由催化亚单位和调节亚单位组成。催化亚单位是由cdc2基因编码的一类蛋白质，只有与调节亚单位结合后，才具蛋白激酶活性，促使细胞进入分裂期。调节亚单位是一类随细胞周期变化而周期性出现或消失的蛋白质，称为细胞周期蛋白，它具有细胞周期特异性及细胞类型特异性。MPF(M期促进因子或细胞促分裂因子或卵细胞促成熟因子)是一种使多种底物蛋白磷酸化的蛋白激酶，即CDK1激酶，由p34cdc2蛋白和周期蛋白B结合而成。CDK1激酶活性首先依赖于周期蛋白B含量的积累，随周期蛋白B浓度变化而变化：周期蛋白B一般在G1期的晚期开始合成，通过S期，其含量不断增加，随着周期蛋白B含量达到一定程度，CDK1激酶活性开始出现；到达G2期时周期蛋白B含量达到最大值，G2晚期阶段CDK1激酶活性达到最大值并一直维持到M期的中期阶段。CDK1激酶活性还受到激酶与磷酸酶的调节，活化的CDK1激酶可使的CDK1激酶活化。活化的CDK1激酶促使分裂期细胞在分裂前期执行下列生化事件：染色质开始浓缩形成有丝分裂染色体；细胞骨架解聚，有丝分裂纺锤体开始组装；高尔基复合体、内质网等细胞器解体，形成小的膜泡。
㈤ DGKC法是什么
DGKC法是医学中检验科常用的检测方法之一，它由德国临床化学学会（DGKC是德国临床化学学会的缩写）推荐，被广泛应用于医学当中。比如，可以用DGKC推荐方法测定血清中的胆碱酯酶及其基因型检测。
㈥ 请问测定AMP激活的蛋白激酶（AMPK）活性都有什么方法急！
可以通过分光光度计，或pH来测定!
磷酸腺苷
AMP—Adenosine monophosphate，翻译为腺嘌呤核糖核苷酸，也称为腺苷一磷酸或一磷酸腺苷。由一分子腺嘌呤、一分子核糖组成的腺苷，以及一分子磷酸组成。是在机体内由ATP与ADP释放能量之后形成的。可以继续结合磷酸基团形成二磷酸腺苷(ADP)和三磷酸腺苷(ATP)
[编辑本段]氨苄西林
AMP—氨苄西林(Ampicillin的缩写),是一种抗生素.为广谱半合成青霉素，毒性极低。抗菌谱与青霉素相似，对青霉素敏感的细菌效力较低，对草绿色链球菌的抗菌作用与青霉素相仿或略强。对白喉杆菌、破伤风杆菌和放线菌其效能基本和青霉素相同。对肠球菌及李司忒菌的作用则优于苄青霉素。对耐药葡萄球菌及其它能产生青霉素酶的细菌均无抗菌作用。对革兰阴性菌有效，但易产生耐药性。
主要用于敏感菌所致的泌尿系统、呼吸系统、胆道、肠道感染以及脑膜炎、心内膜炎等。
[编辑本段]其他
HTML代码中＆符号的缩写便是AMP
APM=Actions Per Minute 就是每分钟操作的次数。它统计的操作包括了鼠标每次的左击，右击以及每次的键盘敲击。多见于星际争霸和魔兽争霸3（WAR3）这两款游戏中 APM的高低往往象征着玩家操作的精细程度，一定程度上反映了玩家的水平
AMP Amplifier 放大器
amplifier ['æmplifaiə] n. 放大器,扩音机
AMP-EN Amplifier Enable 放大器启动端
AMP-N Amplifier Negative 音频放大器信号负
AMP-P Amplifier Positive 音频放大器信号正
AMPC Amplifier Control 放大器控制
㈦ 简述检测蛋白质磷酸化的检测方法及其原理
方法及原理：
1.激酶活性分析
生物学样品中的激酶活性通常是在体外测定的，在ATP的存在下将免疫沉淀的激酶与外源底物共同孵育。之后通过一些报告系统来评估特定激酶对底物的磷酸化，包括显色、放射性或荧光检测。
直接测定蛋白磷酸化的一种经典方法是将整个细胞与放射性标记的32P-磷酸盐共同孵育，获得细胞提取物，通过SDS-PAGE分离，并曝光在胶片上。这种繁琐的方法需要多次几小时的孵育，且使用放射性同位素。其他传统方法包括2D凝胶电泳，这种技术假定磷酸化会改变蛋白的迁移率和等电点。
2.WesternBlot
利用SDS-PAGE分离生物样品，随后转移到膜上（通常是PVDF或尼龙膜），之后利用磷酸化特异的抗体来鉴定目的蛋白。
由于测得的磷酸化蛋白水平可能随处理或凝胶上样误差而变化，研究人员常常利用一个抗体来检测同源蛋白的总水平（而不考虑磷酸化状态），以确定磷酸化组分相对于总组分的比例，并充当上样内对照。化学发光和显色法都很常用，而分子量marker常用来提供蛋白分子量的信息。
3.酶联免疫吸附分析（ELISA）
ELISA的定量能力优于Westernblot，且在调节激酶活性和功能的研究中表现出巨大的作用。这种微孔板形式的分析一般利用目的蛋白特异的捕获抗体，与磷酸化状态无关。随后让目的蛋白结合在抗体包被的分析板中，目的蛋白可以是纯的，也可以是复杂的异质样品（如细胞裂解液）中的一个组分。加入待分析的磷酸化位点特异的检测抗体。这些分析通常设计为显色或荧光检测。
4.基于细胞的ELISA
来自目的蛋白的信号可通过第二种蛋白来标准化，校正各孔之间的差异，实现磷酸化蛋白水平的准确评估，并比较多个样品，与传统免疫印迹中使用磷酸化特异和总蛋白抗体相似。这些分析绕过了制备细胞裂解液的需要，因此更适合高通量分析。
5.质谱
首先，磷酸化肽段的信号通常较弱，因为它们带负电荷，而电喷雾质谱在正电模式下作用，因此电离效果不好。其次，在大量非磷酸化蛋白的高背景之下，很难观察到低丰度目的蛋白的信号。
6.多个分析物图谱分析
㈧ cdc基因名词解释
cdc基因（cell division cycle gene，细胞分裂周期基因）是一类产物表达具细胞周期依赖性或直接参与细胞周期调控的基因，主要包括cyclin基因、Cdk基因、CKI基因等。此外，与DNA复制相关的DNA聚合酶、DNA连接酶基因也属于cdc基因。
补充
基因由来
酵母中这些与细胞分裂和细胞周期调控有关的基因，被称为cdc(cell division cycle)基因。人们根据cdc基因被发现的先后顺序对这些基因进行了命名，如cdc2、cdc25、cdc28等。
cdc(cell division cycle)基因的最初发现源于以P.Nurse和L.Hartwell为代表的一批酵母生物学家以酵母为实验材料发现在限定温度下不同突变株的某个基因发生突变，其细胞停留在细胞周期中的某个特定时期。
表达蛋白
cdc基因表达的蛋白被称为cdc蛋白，如cdc2基因表达的产物cdc2 蛋白（一种相对分子质量34000的蛋白，即p34）。由于它能与周期蛋白cyclinB结合形成MPF（后期促进复合物,促进M期的启动，又称成熟促进因子或有丝分裂促进因子）表现出蛋白激酶的活性，所以又被称为CDK1（周期蛋白依赖性蛋白激酶）。