‘壹’ 如何用试剂鉴别线粒体 、DNA
线粒体用健那绿,染成蓝色,因健那绿是一种活染色剂,可以保持线粒体的正常状态。
DNA用甲基绿。
‘贰’ 如何应用基因检测来检测线粒体疾病
这个可以咨询佳学基因。一般是提取线粒体DNA,然后对线粒体DNA进行测序。
我认为选择E,不知道你这个是多选还是单选,除了B、E有点争议外,其余的应该都是错的,原因如下:
A肯定是排除的,在线粒体DNA复制中的两种模式中,复制都不是仅起始于H链的转录启动子
而C,在线粒体DNA复制中的链结合模式中是双链同时双向进行复制
D,同A,肯定是有可能不同的
E,虽然线粒体DNA复制有自己的链置换模式和链结合模式,但它和核DNA一样都是以半保留方式进行复制的(注意,这里说的是方式)
所以选E是必定的,如果是多选的话就加上B
‘肆’ 动物线粒体DNA的提取重点步骤,还有检验线粒体存在的方法
研磨,差速离心,提取。用显微镜100X物镜检查
‘伍’ 二代测序技术能检测线粒体DNA嚒
二代测序技术不仅可对常规核DNA遗传位点进行检测,对于线粒体DNA及RNA的检测也具有一定优势。线粒体DNA具有较高的拷贝数和突变率,适用于对毛干、指甲缝严重角化的组织以及陈旧骨骸等无法提取到核DNA的降解样本进行法医DNA分析。
‘陆’ 线粒体DNA检测法有什么优点
线粒体DNA检测法的优点是能够进行一些时间比较长、腐败后的物证检验,指甲、毛发等物证也能检测是这一方法的最大优势。
‘柒’ 线粒体dna不用试剂盒怎么提取
提取线粒体dna方法:(仅供参考)
(1)Triton法:取10的7次方细胞沉淀,悬浮于5ml的Triton溶解液中.温和振荡片刻后,室温下放置10min.反应完毕的溶液以8000r/min离心1min,上清即为mtDNA.
(2)碱变性法:取107细胞沉淀,依次加入溶液A(4℃)150Λl,冰浴中将沉淀吹打分散后加入300Λl溶液B(常温),将Eppendrof管缓慢颠倒10次,冰浴裂解变性6~8min,再加入225Λl溶液C(0~4℃),轻柔混匀,冰浴复性20~25min.反应完毕的溶液以10000rmin离心6min,4℃,取上清.1.3.3改进高盐沉淀法[3]取107细胞沉淀,加入溶液5500Λl,混匀,2000r/min,10min,弃上清.沉淀加溶液5500Λl,混匀,3500r/min,10min,弃上清.沉淀加溶液950Λl,混匀后加入20mg/ml蛋白酶K50Λl和10%SDS120Λl,快速混匀.40℃过夜或50℃4h.加入300Λl饱和醋酸钠,混匀,轻摇15S.15000r/min,4℃,15min,取上清Eppendrof管中.取上清后步骤相同.上清中加入等体积酚∶氯仿∶异醇(25∶24∶1),温和振荡8min,10000r/min,10min4℃,取上层水相重复该过程抽提一次,轻取上层水相.加入2倍体积冰乙醇或等体积异丙醇,冰浴30min,15000r/min,10min,弃上清.用70%冰乙醇漂洗沉淀,15000rmin,2min,彻底去上清.沉淀于空气中自然部分干燥25min,加入适量RTE液溶解.贮于4℃
‘捌’ 线粒体DNA测序的原理,方法,和意义——急!谢谢
可以用DNA水解酶把它水解成几段,就设它为ABC
DEFG
HI
JKLMN——(1)
然后再水解,DNA可能以不同的方式断开,也许就是AB
CDE
FGHIJ
KLM
N——(2)
然后再来,可能得到其他的,最后把他们组合起来
比如说,由1知,BC是连着的,又由2,CDE相连,就可知ABCDE是相连的。
以此类推,就能知道是ABCDEFGHIJKLMN了