动物炭疽检测方法

‘壹’ 炭疽病的诊断

患者如与牛、马、羊等有频繁接触的农牧民、工作与带芽胞尘埃环境中的皮毛接触，皮革加工厂的工人等，对本病诊断有重要参考价值。皮肤炭疽具一定特征性，一般不难作出诊断。确诊有赖于各种分泌物、排泄物、血、脑脊液等的涂片检查和培养。涂片检查最简便，如找到典型而具荚膜的大杆菌，则诊断即可基本成立。荧光抗体染色、串珠湿片检查、特异噬菌体试验、动物接种等可进一步确立诊断。

‘贰’ 动物检疫检验员常用诊断方法有哪些

动物检疫检验员从事的工作主要包括;(1)使用检验检疫仪器、工具解剖动物或通过感官、对动物及其产品进行鉴别、检查;(2)识别并、死动物和病害动物产品;(3)对病害动物及其产品进行无害化处理。 国家职业资格证书是劳动者求职、任职、开业和用人单位录用员工的主要依据，也是相关专业领域从业资格准入的有效证件。“国家林业局职业技能鉴定指导中心”作为全国涉林行业特有职业资格鉴定权威机构，面向全国开展“动物检疫检验员”国家职业资格鉴定工作。善心教育常年开设动物检疫检验员培训考试班，全国招生，申报事宜，敬请垂询。二、 报考对象:从事或准备从事本职业的人员，符合动物检疫检验员国家职业资格相应级别申报条件时均可报名参加，包括在职人员、在校生。三、 鉴定级别:动物检疫检验员 初级(国家职业资格五级);动物检疫检验员 中级(国家职业资格四级);动物检疫检验员 高级(国家职业资格三级)。四、相关报考材料1、蓝底或者红底照片一寸和两寸各六张(每张照片后面写上名字和报考专业)2、身份证复印件三份正反面需在一张纸3、学历复印件三份(注:在校生可拿学生证复印件代替)4、填写《国家职业技能申报审批表》两份(正反两面打印出来手填)5、提供《职业工作年限证明》原件一份，需盖公章。(注:在校生可拿学生证复印件代替)6、签署《教育培训合同》一式两份本地学员请报名的时候现场上交外地学员可以按以下信息快递 五、 时间:每月循环开班，随到随学，常年接受报名。六、 培训内容:基础知识:动物解剖，病理检验，动物源性食品微生物检验和理化检验，兽医临床诊断知识，规定检疫的动物传染病和寄生虫病诊断技术;相关法规:《中华人民共和国动物防疫法》。培训形式:善心教育动物检疫检验员培训基地全日制培训班，培训、实习、考证一体化服务，免费推荐就业; 善心教育动物检疫检验员业余自学和函授学习班，方便在职人员和外地考生报名。七、 考核、发证:学习期满经考试合格者，由国家人社部职业技能鉴定指导中心颁发中华人民共和国人力资源和社会保障部统一印制的《动物检疫检验员职业资格证书》，此证书由国家人力资源和社会保障部颁发国家林业局参与鉴定。

‘叁’ 炭疽病该怎样诊断

炭疽病诊断

患者的职业、工作和生活情况，如与牛、马、羊等有频繁接触的农牧民、工作于带芽胞尘埃环境中的皮毛、皮革加工厂的工人等，对本病诊断有重要参考价值。皮肤炭疽具一定特征性，一般不难作出诊断。

有关工厂工人发生呼吸道感染时，尤其当症状与体征不相称时应提高警惕，需想到肺炭疽的可能。

确诊有赖于各种分泌物、排泄物、血、脑脊液等的涂片检查和培养。涂片检查最简便，如找到典型而具荚膜的大杆菌，则诊断即可基本成立。荧光抗体染色、串珠湿片检查、特异噬菌体试验、动物接种等可进一步确立诊断。

‘肆’ 动物炭疽病的简介

炭疽（Anthrax）是由炭疽芽胞杆菌引起的一种人畜共患传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。

‘伍’ 肺炭疽的检查

1.实验室检查
（1）周围血象 白细胞计数和中性粒细胞增高，可有类白血病反应。
（2）病原学检查 取患者的病灶性渗出物、痰液、分泌物、血及脑脊液等作涂片或培养，可发现病原菌。可作荚膜染色，特异性荧光抗体染色以进一步鉴定，上述检材可培养或接种于豚鼠等动物的皮下组织分离炭疽杆菌。
（3）血清学 酶联免疫吸附测定传统阿斯可里沉淀试验敏感性和特异性都不高。间接免疫荧光法荧光抗体检测有较高的敏感性、特异性。
2.其他辅助检查
X线表现除显示肺炎外，胸腔积液，典型表现为纵隔增宽。

‘陆’ 炭疽芽胞杆菌有哪些主要的鉴定试验

炭疽芽胞杆菌是引起人畜共患急性传染病一炭疽病的病原菌。本菌发病急,死亡率高,因此实验室检验有重要意义,主要的鉴定试验如下:1噬菌体裂解试验;2串珠试验;3青霉素抑制试验;4串珠和青霉素抑制联合试验;5重碳酸盐毒力试验;6动物试验;7植物凝集素试验。

‘柒’ 叙述炭疽杆菌的微生物学诊断方法

炭疽的微生物学检查
1、标本的采集：分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液等，严禁宰杀解剖死畜。
2、标本的处理：液体标本取沉渣分离培养；固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非芽胞菌；血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养。
3、涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞—初步报告。荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验
4、核酸检测：核酸杂交
5、分离培养：BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。 2%兔血清肉汤增菌→分离培养
6、鉴定试验：
①串珠试验：接种于含青霉素(0.05～0.5U/ml)的肉汤中，37℃培养6h，形成大而均匀成串的圆球状菌体，与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关，类炭疽无此现象。
②青霉素抑制试验：接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板，37℃培养24h。后两者不生长，前者生长。
③串珠和青霉素抑制联合试验
7、其他试验
①噬菌体裂解试验：AP631炭疽噬菌体
②NaHCO3毒力试验：接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板，10%CO2、37℃、24～48h，有毒株形成荚膜 — 黏液型菌落，无毒株不形成荚膜 — 粗糙型菌落
③毒素动物试验：小鼠、家兔或豚鼠皮下接种
④植物凝集素试验：荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应
⑤Ascoli 热沉淀试验：可作追溯性诊断

‘捌’ 牛羊等动物是在么感染炭疽病的

一、炭疽病简介
炭疽（Anthrax）是由炭疽芽胞杆菌引起的一种人畜共患传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。
二、流行病学特点
1.易感动物
本病为人畜共患传染病，各种家畜、野生动物对本病都有不同程度的易感性。草食动物最易感，其次是杂食动物，再次是肉食动物，家禽一般不感染。人也易感。
2.传染源
患病动物和因炭疽而死亡的动物尸体以及污染的土壤、草地、水、饲料都是本病的主要传染源，炭疽杆菌一旦接触空气，就可形成炭疽芽胞，具有极强抵抗力，被污染的土壤、水源、场地可形成持久疫源地，呈地方性、季节性流行，多发生在吸血昆虫多、雨水多、洪水泛滥的季节。
3.传播途径
本病主要经消化道、呼吸道和皮肤感染。
三、临床症状
潜伏期一般为20天。
1.典型症状
本病主要呈急性经过，多以突然死亡、天然孔出血、血呈酱油色不易凝固、尸僵不全、左腹膨胀为特征。
2.各种畜症状
牛：体温升高常达41℃以上，可视黏膜呈暗紫色，心动过速、呼吸困难。呈慢性经过的病牛，在颈、胸前、肩胛、腹下或外阴部常见水肿；皮肤病灶温度增高，坚硬，有压痛，也可发生坏死，有时形成溃疡；颈部水肿常与咽炎和喉头水肿相伴发生，致使呼吸困难加重。急性病例一般经24-36小时后死亡，亚急性病例一般经2-5天后死亡。
羊：多表现为最急性（猝死）病症，摇摆、磨牙、抽搐，挣扎、突然倒毙，有的可见从天然孔流出带气泡的黑红色血液。病程稍长者也只持续数小时后死亡。
马：体温升高，腹下、乳房、肩及咽喉部常见水肿。舌炭疽多见呼吸困难、发绀；肠炭疽腹痛明显。急性病例一般经24-36小时后死亡，有炭疽痈时，病程可达3-8天。
四、病理变化
严禁在非生物安全条件下进行疑似炭疽动物、炭疽动物的尸体剖检。
1.死亡患病动物可视黏膜发绀、出血。
2.血液呈暗紫红色，凝固不良，粘稠似煤焦油状。
3.皮下、肌间、咽喉等部位有浆液性渗出及出血。
4.淋巴结肿大、充血，切面潮红。脾脏高度肿胀，达正常数倍，脾髓呈黑紫色。
五、实验室诊断
1.炭疽沉淀反应阳性。
2.炭疽的病原分离及鉴定阳性。
3.聚合酶链式反应（PCR）检测阳性。
六、诊断结果判定
1.疑似病例
经乡镇动物防疫办（或乡镇畜牧兽医站）确诊，符合流行病学特点和临床症状的。
2.确诊病例
经县动物疫控中心确诊，疑似病例符合实验室诊断之一的。
七、疫情报告
动物疫情实行逐级报告制度。任何个人发现动物染疫或疑似染疫时，应当立即向村动物防疫所报告，村动物防疫所向乡镇动物防疫办和乡镇动监所报告，乡镇动物防疫办向乡镇指挥部报告，乡镇动监所和乡镇指挥部向县指挥部报告，县指挥部向上逐级报告。
八、疫情公布
炭疽病属二类动物疫病，对外疫情由农业部授权省畜牧兽医局统一发布，任何单位和个人不得擅自披露或公布疫情，违者追究其相应的经济责任和刑事责任。
九、疫情处置
1.疑似疫情
发现疑似疫情时，养殖户应立即将发病动物隔离，并限制其移动。乡镇动监所要及时派员到现场进行调查核实，包括流行病学调查、临床症状检查等，根据诊断结果采取相应措施。对病死动物尸体，严禁进行开放式解剖检查，对环境实施严格的消毒措施，防止病原污染环境，形成永久性疫源地。并按规定进行采样，进行确诊。
2.散发疫情
确诊为炭疽后，本病呈零星散发时，县动监所应对患病动物作无血扑杀处理，动物尸体需要运送时，应使用防漏容器，须有明显标志，并在县动监所的监督下实施，对同群动物立即进行强制免疫接种，并隔离观察20天。对病死动物及排泄物、可能被污染饲料、污水等按要求进行无害化处理；对可能被污染的物品、交通工具、用具、动物舍进行严格彻底消毒。疫区、受威胁区所有易感动物进行紧急免疫接种。
3.暴发疫情
当暴发疫情时（1个县10天内发现5头以上的患病动物），立即启动县级应急预案，县畜牧兽医局划定疫点、疫区、受威胁区，报请县政府对疫区进行封锁，对疫点、疫区、受威胁区按规定采取封锁、隔离、扑杀、销毁、消毒、无害化处理、紧急免疫接种等强制性处置措施。在疫点内所有动物及其产品处理完毕20天时间后解除封锁。
十、计划免疫
实行炭疽病计划免疫，县乡村三级防疫双轨目标责任制，政府保密度，兽医部门保质量。牛羊养殖户必须履行炭疽病免疫义务，做好免疫接种工作。
免疫具体操作见疫苗使用说明书。使用无荚膜炭疽芽孢苗，每年秋季对牛、绵羊、猪免疫一次，皮下注射，牛12月龄以下0.5毫升，牛12月龄以上1毫升，绵羊、猪均0.5毫升。建立免疫档案。注射无荚膜炭疽芽孢疫苗后，部分家畜可能有1-3天的体温升高反应，注射部位发生核桃大的肿胀，3-10天可消失。
十一、检疫监督
县乡两级动监所依法对动物开展产地检疫、屠宰检疫、引种运输检疫和监督管理。
十二、人员防护
动物防疫检疫、实验室诊断及养殖场、畜产品及皮张加工企业工作人员要十分注意个人防护，参与疫情处理的有关人员，应穿防护服、戴口罩和手套，做好自身防护。
炭疽杆菌及孢子通常在泥土中及羊、牛、马体中发现。人接触病死畜或食用病畜肉而发生感染。临床上主要表现为皮肤型炭疽（俗称疔疮）和恶性水肿，面、颈、肩、手和脚等裸露部位皮肤，初为丘疹或斑疹，第2日丘疹顶部出现水疱，第3-4日水疱中心区出血性坏死、下陷，水疱区扩大，第5-7日水疱破裂、坏死、形成溃疡，结成黑痂，痈下有肉芽组织形成为炭疽痈。周围组织水肿、坚实、疼痛不着、溃疡不化脓。继而发生毒血症，偶尔引致肺、肠和脑膜的急性炎症，并可伴发败血症。
炭疽病如能及早诊断，使用磺胺嘧啶、青霉素等抗生素即可治愈，但如延缓治疗可致人死命，因此病者须及早就医。死畜严禁剥皮、解剖或煮食，应焚毁或加大量生石灰深埋在地面2米以下。若在接触炭疽菌后服食抗生素，预防炭疽病的成功率相当高。对病人应严格隔离，对其分泌物和排泄物按芽胞的消毒方法进行消毒处理。对皮肤局部病灶切忌挤压，也不宜切开引流，以防感染扩散而发生败血症。局部可用1:2000高锰酸钾液洗涤，敷以四环素软膏，用消毒纱布包扎。
[作者简介]高 顺（1964.5-），男，辽宁昌图县人，毕业于解放军军需大学动物医学专业，大学本科学历，高级兽医师职称，主要从事农村实用动物疫病防控技术集成与推广工作。
工作单位：昌图县动物疫病预防控制中心
通信地址：辽宁省昌图县昌盛路144号
邮编：112500
E-mail：[email protected]
qq:770253241

‘玖’ 猪炭疽的诊断

5.1 根据典型临床症状和病理变化可做出初步诊断，确诊需进一步做实验室诊断。
5.2 实验室诊断
在国际贸易中，尚无指定和替代诊断方法。
病原检查：新鲜病料可直接触片镜检或培养增菌后进行细菌学检查，或进行噬菌体敏感性试验、串珠试验；陈旧腐败病料、处理过的材料、环境(土壤)样品可先采用选择性培养基，以解决样品污染问题，或进行Ascoli试验、免疫荧光试验。
血清学检查：可做琼脂扩散试验、补体结合试验、酶联免疫试验。
病料采集：动物如怀疑感染炭疽，不可进行尸体剖检，尤其不能在田间解剖病死动物，此时可采集动物血液送检。
5.3 鉴别诊断
最急性和急性炭疽应与巴氏杆菌病(可检出两端浓染的巴氏杆菌，但Ascoli反应阴性)、恶性水肿相区别。