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血小板内钙离子检测方法

发布时间:2022-06-29 07:04:49

1. 钙离子的所有鉴定方式

一般靠沉淀法鉴定。你的钙离子是和什么在一起的?以下方法分别针对不同的化合物:
1。 在溶液中加入h2so4,有沉淀说明有ca+(通入co2也可以鉴别钙离子,但是溶液存在cl-,通入co2没有反应,所以通入co2不可行,先加NaOH 有沉淀的是mg离子 再加硫酸 有沉淀的是ba离子 而硫酸钙是微溶所以不反应 最后就是ca了)
2。 加NaOH.可以鉴别出Ba(NO3)2,加硫酸可以区别猜想一,二.硫酸钙是沉淀,硫酸镁不是
3。 镁离子用氨水检验会发生沉淀硫酸钙溶于酸,硫酸钡不溶.所以用这个原理辨别出钙离子和钡离子加入过量硫酸看哪个消失.
还有用氯化钙做焰色反应试验,焰色为砖红色,即可鉴别。

2. 可用哪些方法测定钙离子

如果仅限于高中化学的话,钙离子的测定可以用焰色反应来测定——钙离子的焰色反应呈砖红色.
如果用滴定的话,可以用草酸来滴定——草酸钙不溶.
但是值得注意的是,钙离子与碳酸根反应产生沉淀的现象往往不能直接判定参与反应的就是钙离子,因为镁离子、钡离子也有相同的现象.判断钙离子一般出现在无机推断题上,往往会跟其他的例子混在一起让我们去判别.所以,可以先用碳酸根过量滴定筛选出来,再做其他的判断.

3. 如何使用流式细胞术检测细胞内钙离子

有钙离子敏感的荧光探针,随着钙离子浓度的变化,荧光强度也变化。不过这种方法一般都是用来检测钙离子浓度的变化,而不是检测浓度的。

4. 请教怎么运用流式细胞仪检测细胞内钙离子

细胞可以用一些钙离子浓度敏感的荧光染料染色。然后可以比较不同组或者同一样本在不同时间的荧光变化,从而得到相对钙离子浓度的变化。

5. 医学检验,APTT、T T、PT、分别是用什么检测的

凝血功能套餐不止PT、TT、APTT还有FIB有些大医院还要加一项国际敏感度指数(international sensitivity index,ISI),以确保PT的标准化。测定方法有很多:手工法,半自动,全自动,所需方法还要和当下条件相符才行,有专卖试剂的厂家,像亚中啊,金域啊,多得很,有官方网址,网络上可以查到的~以下所说,仅供参考: 凝血酶原时间(PT)的推荐方法

[原理]
将组织凝血活酶(主要含组织因子和脂质)和钙离子,加到枸橼酸抗凝血浆中,在37℃保温,测定血浆凝固时间,即为PT。PT主要用于筛选检测外源凝血系统的因子Ⅶ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ和相关因子的抑制物的试验。

[标本来集和处理]
1、标本采集:用硅化或塑料注射器抽取空腹静脉血,按9:1比例加入含0.109mol/L的枸橼酸钠抗凝剂的硅化或塑料试管中,轻轻混合均匀。
2、标本处理:以2000~2500g,离心15分钟,分离乏血小板血浆,并在24小时内完成试验。
3、正常对照血浆:选择正常健康男性和女性各lO名以上,年龄在18~45岁。但不能是妊娠、月经期、哺乳期和口服避孕药的妇女,采取的血浆冰冻干燥保存或-80℃保存。

[试剂]
1、抗凝剂:109mmol/L枸橼酸钠液(相当于含二分子结晶水的枸橼酸钠32g/L)。
2、凝血活酶试剂:市售商品,应标有ISI、批号及有效期。冻干者应按说明书加指定的缓冲稀释剂复溶。
3、氯化钙(CaCl2)溶液:为25mmol/L。(目前有些商品试剂已将凝血活酶液与氯化钙液混合好,可不必另配CaCl2液)。
4、质控物:正常及异常对照血浆
5、配制试剂用水必须符合1级纯水的标准。

[仪器]
1、手工法:秒表,保持37℃±1℃的恒温水浴箱或电热块。水深能浸试管3cm以上,表面无划痕的10×mm拭管。经标准的0.1mL移液管。经校正的秒表。
2、仪器法:各种自动或半自动血凝仪,严格按说明书操作。

[操作步骤]
1、手工法
(1)测定温度36.5~38.5℃,上述各试剂及被测血浆,均应预温至此一温度,但凝血活酶试剂预温不可超过30分钟,血浆预温一般不宜超过10分钟。

(2)所用试管及加样器等接触血浆的器具均为塑料或硅化玻璃管。

(3)吸取枸橼酸抗凝血浆0.1mL,加入一小试管中:加入凝血活酶试剂0.1mL混匀后置37℃水浴中。再加入25mmol/L CaCl2液0.1mL,(也可先将凝血活酶试剂与CaCl2溶液等量混合,加入0.2mL)。立即混匀并开动秒表:试管仍浸于水浴中,至约10秒钟时,自水浴中取出,在纱布上迅速擦去试管外水滴,在明亮处不断倾斜试管,在流动状态下观察有无纤维蛋白形成。一旦见到纤维蛋白(同时将出现液体流动减慢),立即停表,记录时间。每次测定二管,按平均数报告。本试验的最后混合液其pH应为7.2~7.3,大部分商品凝血活酶试剂均用含缓冲液的溶液配制。

(4)每批均同时做正常和异常对照,方法应与测定标本完全相同。

[报告方式]
1、以PT的秒(S)数报告(最接近的0.5秒)
2、以患者血浆(S)/正常对照PT(S)的比率(PRT)报告。
3、在口服华法令类抗凝药物治疗监控时,应报告国际正常化比率(INR)。大部分自动化仪器可根据所测的PTR和凝血活酶试剂的ISI,自动算出INR。手工法可根据下列公式,用一计算器直接计算:

Poller设计了一个简便的列线图,在取得PTR和ISI值后,即可从图上直接查找出INR值,十分便利,国内已有介绍。
ICSH规定,不再用稀释曲线或百分比(活动度)报告。

[参考值]
因仪器/试剂不同,会得出不同结果,故很难统一规定参考值。各实验室应根据自己的仪器、试剂等条件,自行测定一批健康人,建立参考值。此后至少每年或当条件有变化时,根据新的条件,重新建立。参考值PT测定的一切条件均应与患者血浆PT测定相同(包括采血、容器、抗凝剂等)。健康供血者应选至少20个18~55岁的男性和非妊娠、月经期女性,不可服药,在平静休息状态采血、以减少个体差异(有条件时,可测一批老年人和小儿,分开统计)。同时应分开几天采血和测定,以减少天间差异。测定结果经统计学处理,计算标准差:以两个标准差(2SD)或95%可信限作为参考范围。对于三个标准差是正常还是异常,需结合具体情况进行评估。从统计学上讲,其中有些人是正常的。用以上标准,病人(PT异常)则很少会遗漏。

三、活化部分凝血活酶时间(APTT)的标准化
(一)活化部分凝血活酶时间(APTT)的标准化
APTT是检测内源凝血系统诸凝血因子缺陷和相关抑制物的筛选试验,也是当前用于凝血因子、肝素抗凝治疗以及狼疮抗凝物质检测的主要手段。
与PT测定一样,不同的部分凝血活酶、不同的活化剂和不同的激活时间对各种凝血因子缺陷、对肝素和对狼疮抗凝物质的敏感性相差很大。例如,检测APTT的试剂中,所用活化剂(白陶土、硅藻土、鞣花酸)不同,他们对检测肝素、狼疮抗凝物质和因子Ⅷ、Ⅸ的敏感性不同。

迄今,ICSH和ICTH尚未有APTT检测方法标准化或试剂标准化的可行方案问世,仅NCCLS于1992年,提出一个编号为H29-T的暂行方案。

(二)活化的部分凝血活酶时间(APTT)的推荐方法

[原理]
将一种磷脂和激活剂加到血浆中,经过孵育后,加入适当浓度的钙离子。其纤维蛋白凝块形成的时间(以秒计),即为APTT。本法主要用于过筛测定内源途径凝血因子的缺陷,如因子Ⅶ、Ⅺ、Ⅷ、Ⅸ、激肽释放酶原(PK)、高分子量激肽原(HMWK)以及纤维蛋白原等。同时也用于上述因子的抑制物测定、肝素治疗的监测以及狼疮抗凝因子的检查。

[仪器]
本实验所用仪器、设备(包括采血、贮血容器、加样装置和标本的处理等)以及对它们的要求完全与PT相同。PT所用自动化仪器同样适于本实验。

[试剂]
1、部分凝血活酶试剂:由商品供应。一般已与檄活剂按比例配在一起(或分开配制)常用的激活剂由硅藻土(商品名Celite)、白陶土、二氧化硅微粒、鞣化酸(ellagic acid)或其它可用的激活剂,由厂方配套供应。
APTT试剂/仪器结合,应能使因子Ⅷ、Ⅸ或Ⅺ活性低于0.3μ/mL(或<30%)的血浆,出现异常延长的结果。
2、氯化钙溶液(25mmol/L)以及其它试剂与PT所用者相同。

[操作步骤]
1、样品的采取、贮存、输送与PT测定相同。注意,应用清洁的塑料或硅化玻璃采血器采血及贮血。
2、标本(去血小板的血浆)的制备与PT相同。注意、应用去血小板血浆测定。
3、水浴箱或电热板的温度为37℃±1℃,要经常检查是否正确。
4、接触活化时间:加激活剂活化因子Ⅻ的时间要保持一致;各仪器和试剂生产厂家的规定可能不一样,应严格按说明书要求进行。手工操作时,应用秒表或类似的定时装置计时。
5、操作:预温(不超过30分钟)APTT试剂一份与预温(不超过10分钟)的侍测血浆一份混合,立即开动秒表计时;至规定的接触活化时间终点时,加人预温37℃的CaCl2液一份,混匀,同时开动秒表。至出现血浆凝固时,停表,记录血浆凝固时间(以秒计)。手工测定时应同时测定两管,按平均数报告。一些精密度已有很大改进的自动或半自动凝血仪,如果有适当的质控标准也可只测定一次。应同时测定正常和异常对照血浆。 不好意思TT着实没找到,不过联系到权威厂家,应该就不用自己去找了~

6. 用分析化学怎么检测钙离子的含量

首先把试样制备成溶液。
一种是配合滴定法,用EDTA标液滴定溶液中钙离子,用钙红作指示剂,pH=12,测定钙离子。
一种是间接氧化还原滴定法,首先用草酸铵沉淀钙离子,陈化后过滤,用硫酸溶解草酸钙,再用高锰酸钾标液滴定溶液中草酸根,根据消耗的高锰酸钾的物质的量求算钙离子的含量。
如果分析化学的范畴扩展到仪器分析,方法就更多了。
比如电位法,利用钙电极测量含钙量。
比如分光光度法,利用显色试剂与钙离子显色,然后利用光吸收定律,根据吸光度与浓度成正比来求钙离子浓度。

7. 测定细胞内钙离子浓度都有哪些方法

不是,正常细胞内钙离子浓度比细胞外低很多在正常情况下,细胞外的钙离子的浓度稳定在1.2mmol每L左右,比细胞内钙离子浓度高10000倍左右。细胞内的钙离子浓度在静息状态下大约保持在100nmol每L。但是当细胞兴奋时,细胞内的钙离子浓度可迅速升高到1umol每L甚至更高。钙离子的调节非常复杂,但主要包括两方面,质膜钙转运和胞内钙池的调节。这两方面的协同作用精确保证了细胞内钙离子的稳定水平。

8. 可用哪些方法测定钙离子是写出化学方程式并注明条件至少两种

高锰酸钾法:Ca2++C2O4-=CaC2O4
然后用酸性高锰酸钾氧化草酸钙。
EDTA络合滴定,用铬黑T为指示剂:
Ca2++Y=CaY

9. 如何检测细胞中的钙离子浓度

焰色反应在金属棒上蘸取适量溶液在酒精灯上灼烧,若有砖红色火焰,则溶液中有钙离子别的想不上来太好的,如果用碳酸跟离子、碳酸盐好多都不溶,不太好弄,就这个简单点

10. 钙离子的测定方法有哪些

实验室的话,一般常用碳酸钠滴定,因为碳酸钠成碱性,和钙离子反应后沉淀就变成中性了,这时可以用酸碱指示剂进行测定了。

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