致病菌检测时溢出的消毒方法

① 如何检测一个灭菌方法对致病菌的效果

把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化，说明灭菌效果良好；如果某一位置的培养基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等原因所致，应根据上述情况进行改进；如果大部分或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。
经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

② 化妆品致病菌检测怎么做

中科院中科检测是化妆品备案检测机构，化妆品致病菌检测常见的有：耐热大肠杆菌，铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌

耐热大肠杆菌检测方法:

1.取 10mL 1：10 稀释的检液，加到 10mL 双倍乳糖胆盐（含中和剂）培养基中，置 44.5℃

±0.5℃培养箱中培养 24h，如既不产酸也不产气，继续培养至 48h，如仍既不产酸也不产

气，则报告为耐热大肠菌群阴性。

2. 如产酸产气，划线接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36℃±1℃培养18h—24h。同时取该

培养液 1—2 滴接种到蛋白胨水中，置 44.5℃±0.5℃培养 24h±2h。

经培养后，在上述平板上观察有无典型菌落生长。耐热大肠菌群在伊红美蓝琼脂培养

基上的典型菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽。也有的

呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉紫色，中心较深的菌落，亦常为耐热大肠菌群，应

注意挑选。

3. 挑取上述可疑菌落，涂片作革兰氏染色镜检。

4. 在蛋白胨水培养液中，加入靛基质试剂约 0.5mL，观察靛基质反应。阳性者液面呈玫

瑰红色；阴性反应液面呈试剂本色。

铜绿假单胞菌检测方法：

1.增菌培养：取 1:10 样品稀释液 10mL 加到 90mL SCDLP 液体培养基中，置 36℃±1℃培

养 18h—24h。如有铜绿假单胞菌生长，培养液表面多有一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或

蓝绿色。

2. 分离培养：从培养液的薄膜处挑取培养物，划线接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板

上，置 36℃±1℃培养 18h—24h。凡铜绿假单胞菌在此培养基上，其菌落扁平无定型，向周

边扩散或略有蔓延，表面湿润，菌落呈灰白色，菌落周围培养基常扩散有水溶性色素。

在缺乏十六烷三甲基溴化铵琼脂时也可用乙酰胺培养基进行分离，将菌液划线接种于

平板上，置 36℃±1℃培养 24h±2h，铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好，菌落扁平，边缘

不整，菌落周围培养基呈红色，其他菌不生长。

3. 染色镜检：挑取可疑的菌落，涂片，革兰氏染色，镜检为革兰氏阴性者应进行氧化酶

试验。

4. 氧化酶试验：取一小块洁净的白色滤纸片置于灭菌平皿内，用无菌玻璃棒挑取铜绿假

单胞菌可疑菌落涂在滤纸片上，然后在其上滴加一滴新配制的 1%二甲基对苯二胺试液，在

15s—30s 之内，出现粉红色或紫红色时，为氧化酶试验阳性；若培养物不变色，为氧化酶

试验阴性。

5.绿脓菌素试验：取可疑菌落 2 个—3 个，分别接种在绿脓菌素测定培养基上，置 36℃

±1℃培养 24h±2h，加入氯仿 3mL—5mL，充分振荡使培养物中的绿脓菌素溶解于氯仿液

内，待氯仿提取液呈蓝色时，用吸管将氯仿移到另一试管中并加入 1mol/L 的盐酸 1mL 左

右，振荡后，静置片刻。如上层盐酸液内出现粉红色到紫红色时为阳性，表示被检物中有

绿脓菌素存在。

6 .硝酸盐还原产气试验：挑取可疑的铜绿假单胞菌纯培养物，接种在硝酸盐胨水培养基

中，置 36℃±1℃培养 24h±2h，观察结果。凡在硝酸盐胨水培养基内的小倒管中有气体者，

即为阳性，表明该菌能还原硝酸盐，并将亚硝酸盐分解产生氮气。

7. 明胶液化试验：取铜绿假单胞菌可疑菌落的纯培养物，穿刺接种在明胶培养基内，置

36℃±1℃培养 24h±2h，取出放置于 4℃±2℃冰箱 10min—30min，如仍呈溶解状或表面溶解

时即为明胶液化试验阳性；如凝固不溶者为阴性。

8. 42℃生长试验：挑取可疑的铜绿假单胞菌纯培养物，接种在普通琼脂斜面培养基上，

置于 42℃±1℃培养箱中，培养 24h—48h，铜绿假单胞菌能生长，为阳性，而近似的荧光假

单胞菌则不能生长。

金黄色葡萄球菌检测方法：

1 增菌：取 1:10 稀释的样品 10mL 接种到 90mL SCDLP 液体培养基中，置 36℃±1℃培养

箱，培养 24h±2h。

注：如无此培养基也可用 7.5%氯化钠肉汤。

2. 分离：自上述增菌培养液中，取 1—2 接种环，划线接种在 Baird Parker 平板培养基，

如无此培养基也可划线接种到血琼脂平板，置 36℃±1℃培养 48h。在血琼脂平板上菌落呈

金黄色，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。在 Baird Parker 平板培养基上为圆形，

光滑，凸起，湿润，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透

明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的软度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落，但无

混浊带及透明带。挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上，置 36℃±1℃培养 24h±2h。

3. 染色镜检：挑取分纯菌落，涂片，进行革兰氏染色，镜检。金黄色葡萄球菌为革兰氏

阳性菌，排列成葡萄状，无芽胞，无荚膜，致病性葡萄球菌，菌体较小，直径约为 0.5mm —1mm。

4. 甘露醇发酵试验：取上述分纯菌落接种到甘露醇发酵培养基中，在培养基液面上加入

高度为 2mm—3mm 的灭菌液体石蜡，置 36℃±1℃培养 24h±2h，金黄色葡萄球菌应能发酵

甘露醇产酸。

5. 血浆凝固酶试验：吸取1:4新鲜血浆0.5mL，置于灭菌小试管中，加入待检菌24h±2h肉

汤培养物0.5mL。混匀，置36℃±1℃恒温箱或恒温水浴中，每半小时观察一次，6h之内如呈

现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物及肉汤培养基各

0.5mL，分别加入无菌1:4血浆0.5mL，混匀，作为对照。

③ 常用的消毒灭菌方法有哪些

常用的消毒灭菌方法如下：

1、煮沸灭菌：是湿热灭菌法范围，就是将洗净的物品（如毛巾、衣服、床单、用具等）放入水中直接煮沸30min或60min，可将细菌全部杀死，但不能保证杀灭所有的芽孢。

2、紫外线灭菌：一般用于灭菌的紫外线波长是2000～3000Å，灭菌力最强的是波长为2540Å的紫外线。主要用于消毒器具表面的灭菌以及净化室内空气。器具表面灭菌一般要经肥皂水洗净后再经清水洗净后擦干后在紫外线下灭菌，包好备用。

3、75%乙醇灭菌：本法是化学灭菌法之一，可用75%酒精溶液用于剪刀、手术刀、针具以及皮肤表面和物品表面等的消毒。物品表面消毒前需要了解酒精是否恢复消毒物品产生损坏。

4、氯维液体喷剂灭菌：氯维液体喷剂灭菌属于化学灭菌法。可用于器具、皮肤伤口表面、物品表面、空间等等情况的消毒。

消毒效果的检查方法

1、物品表面检查

在消毒物品相邻部位划出2个10cm2范围，消毒前后别以无菌棉签采样，接种后培养24～48小时观察结果。

2、排泄物检查

消毒前后各取0.2ml排泄物的稀释液接种肉汤管，37℃培养24小时后再取样转种相应的培养基，24～48小时后观察结果。

3、空气消毒效果检查

一般用自然沉降法。消毒前后在消毒的空间不同平面和位置。放置4～5个平面，暴露5～30分钟后盖好，培育24～48小时观察结果。

以上内容参考网络-消毒

④ 消毒测试方法

目前检测多仍采用一些条件致病菌为间接指标。肠道传染病以大肠杆菌为指标，呼吸道传染病以溶血性链球菌为指标。肝炎病毒近年表面抗原，DNA聚合酶以及电镜观察，甲肝病毒分离等为指标。医|学教育网搜集整理如消毒前后均未检出大肠杆菌或溶血性链球菌，则可以消毒后自然菌总数率低的百分率评价，消毒后自然菌总数下降80%以上为效果良好，降低70%为较好。减少60%以上为一般，减少60%以下为不合格。
具体检查方法：
1.物品表面检查
在消毒物品相邻部位划出2个10cm2范围，消毒前后别以无菌棉签采样，接种后培养24～48小时观察结果。
2.排泄物检查
消毒前后各取0.2ml排泄物的稀释液接种肉汤管，医学教|育网搜集整理37℃培养24小时后再取样转种相应的培养基，24～48小时后观察结果。
3.空气消毒效果检查
一般用自然沉降法。消毒前后在消毒的空间不同平面和位置。放置4～5个平面，暴露5～30分钟后盖好，培育24～48小时观察结果。

⑤ 常用的消毒方法

对动物体外环境中的病源微生物及其他有害微生物进行消除我杀灭，使其数量减少到无害的程度，称为消毒；将所有微生物彻底消灭，称为灭菌。消毒方法有物理的、化学的、生物的三类，具体进行时应根据病原体的种类和被消毒物品的性质加以选择。
物理消毒
煮沸消毒 它是一种经济、简便的消毒方法，适用于金属器材、木质器具、玻璃器皿以及布类等的消毒，一般从水沸腾开始计算时间，煮沸15分钟。如在水中加0.5%-1%的碱或肥皂，可使物品上的污物溶解，提高沸点，增强杀菌效果。
蒸汽消毒 蒸汽潜热大，穿透力强，使物品受热快，消毒效果好。
日光消毒 众多病原微生物对日光非常敏感，因而日光消毒是最经济的消毒方法。
焚烧和喷灯火焰消毒 这是最彻底的消毒方法。焚烧适用于金属用具、垫草、病鸽
尸体等的消毒；喷灯火焰适用于经药物消毒后的鸽舍四周墙壁和水泥地的再消毒。
机械消毒 包括打扫、洗刷、通风等，这不是直接消毒，而是把附着在鸽舍、用具和地面上的病原体清除掉，再对被清除的污物进行堆积发酵或药物消毒，与其他消毒方法结合应用，更可提高消毒效果。
化学消毒法
该法是利用化学制剂，按不同消毒要求配制一定比例的溶液，用气雾、喷洒、冲洗、浸泡、擦拭的方式，对有关鸽舍、场地、环境、用具及车辆、孵化器（室）、种蛋等进行消毒，以杀灭病原体的方法.
生物消毒法

这种方法是把污染的垫草、污物、尸体，通过挖坑深埋压实密封的方法，利用粪污中的有机物，在微生物的作用下，堆积发酵分解产热，在一定时期内分别达到杀灭致病细菌和虫卵的目的。
鸽舍消毒前应彻底打扫，如清扫鸽舍，洗刷笼子、饲槽、水槽，将垫草、污物垃圾、剩料和粪便等清理干净，否则，虽经消毒，也会使许多消毒药物的杀菌作用大大降低。而且鸽舍清扫消毒是消除污染的重要环节。清扫卫生一定要彻底、全面，角角落落上上下下都得清扫到。要充分认识到，哪怕墙壁上沾有一点粪，就可能成为今后发生传染病的根源，这并非小题大做。因为上述问题看起来不是什么消毒药物，也不是消毒方法，而实实在在是搞好消毒工作的基础，是绝对不可忽视的一环，否则很有可能形成消毒无用，前功尽弃，疫病还是无法杜绝。
消毒的效果还取决于消毒剂的浓度、温度、作用时间。对消毒药液的用量也不可忽视，一般对地面的每平方米应有0.5-2升；对墙壁和天花板的每平方米应有0.5-1升药液。鸽场的出入口要建一个与门同宽、长1.5米的消毒槽（池）。消毒槽内铺垫草（草包），浸以有效消毒液，并要有人负责定期更换，强制人员或车辆进行出入消毒，而且坚决执行，反对徒于形式或在门口撒些石灰粉了事的错误做法。

⑥ 食品中致病菌的检测方法

痢疾杆菌其致病作用主要是侵袭力和毒素。病菌黏附于肠粘膜的上皮细胞内，继而生长繁殖并引起炎症，在内毒素的作用下使肠壁组织坏死，肠功能紊乱，以致出现毒血症。有些痢疾杆菌能产生肠毒素，导致肠炎。
致病性大肠杆菌的污染源是带菌动物（牛、羊、猪、鸡等）和病人及隐形带菌者。主要通过摄入污染该菌的动物性食品导致发病，或者严重污染饮水和其他食品污染及食物链的交叉污染也可导致发病。
伤寒和副伤寒病人和健康带菌者是沙门氏菌的传染源。病菌随粪尿排出体外，通过污染的食物、饮水、手、食具或经蝇、蟑螂等媒介污染食物，经口感染。食物或水源污染可导致暴发流行。
霍乱弧菌的传染源是病人或健康带菌者，隐性感染者和症状较轻的患者呈间歇排菌，危害性比重症患者更大。病菌随粪便及呕吐物排出，污染饮用水、食物和环境，并通过水、手、污染的食物、食具、蝇、蟑螂等媒介而经口感染。感染人体后，能吸附于肠粘膜表面，并大量繁殖，其内毒素损害肠粘膜，外毒素引起肠液分泌过度增加，发生腹泻，大量丢失肠液，产生严重脱水、酸中毒及电解质紊乱。
炭疽杆菌其致病原因是炭疽杆菌产生的毒素（致死毒素和水肿毒素），人的皮肤伤口通过直接接触病畜的血液、分泌物、排泄物以及被污染的皮、毛、骨粉等，可引起皮肤炭疽；经口摄入病畜肉类以及被细菌污染的食物和水等，可引起肠型炭疽；吸入带有炭疽芽孢的尘埃，可引起肺炭疽。

⑦ 什么叫消毒常用的消毒方法有哪些

消毒是指通过化学、物理学或生物学原理和方法杀灭环境或物体表面或内部病原体的过程。

在各种类型的鸡场（舍）最常用的消毒方法主要是：

（1）喷洒。用配制成液体或粉末状化学性消毒剂均匀地喷洒在消毒物体表面，通过直接与病原体接触，起到杀灭作用。常用的喷洒消毒剂是新洁尔灭、来苏儿等。应用喷洒法的优点是不受条件、时间等限制，应用较广；其缺点是只有消毒剂直接与病原体接触才能起杀灭作用，所以消毒剂未喷洒到的病原体仍然存活。所以这种方法只适用于器具和鸡舍地面、墙壁的消毒。

（2）浸泡。将需消毒的物品浸泡于液体消毒剂中，经一定时间后捞出。其消毒原理同喷洒法。该法适用于外形复杂但体积不大的物品，比如种蛋、器皿等。

（3）熏蒸。利用有些消毒剂（甲醛等）易挥发的特性，在一定空间内放置一定量的消毒剂，挥发后在空气中达到相应浓度，起到杀灭病原体的作用。熏蒸方法是通过气体扩散，不需特殊设备，简单易行，而且不受器具或鸡舍结构复杂的限制，用处较广，而且没有残留。但是，其缺点是空间必须是封闭的，并需维持一定的时间，否则达不到应有效果。适用于鸡舍、孵化室（箱）的消毒。

（4）加热或煮沸。高温能使微生物蛋白质变性，丧失原有的生物学活性，达到杀灭作用。绝大多数病原菌在65℃经30分钟或煮沸（100℃）即被杀灭。该法简单可靠，无不利作用（对人畜无毒性），适用于对鸡舍的部分设施或器具、工作服等的消毒甚至灭菌。

（5）紫外线或日光。紫外线和日光对病原体也具有杀灭作用。紫外线需要安装紫外灯，如大规模消毒价格昂贵，不易实行。但是日光消毒不需投入，比较可行，比如垫草等经日晒后可达到较好的消毒效果。

⑧ 如何处理实验操作中发生感染性或潜在感染性因子暴露

危险因素
2.1术前危险因素

2.1.1患者因素 局部因素：急性结膜炎、睑缘炎、严重倒睫、眼睑部小感染灶、泪道阻塞、泪囊炎、戴接触镜、另1眼眶内义眼、II期人工晶状体植入，内眼手术容易将结膜囊内菌落带入眼内，引起术后感染；全身因素：糖尿病患者，全身使用免疫抑制剂、糖皮质激素，接受透析、化疗时机体免疫力下降，容易发生感染。

2.1.2医护人员的因素 因眼内炎发生率极低，部分医护人员不够重视，患者术前准备时间短，不严格操作规程，医护、患者、家属被污染的手或器械，极有可能污染眼部及周围组织，所以必须严格无菌操作制度和措施，做好患者及家属的卫生宣教工作。同时应熟知内眼手术的禁忌症，严格术前把关。

2.2术中危险因素 (1)手术间或器械污染:消毒不严格的手术间、灌注管道、粘弹剂、超声乳化手柄、灌注抽吸手柄、进入眼内的手术器械或人工晶状体等往往引起大范围的爆发性眼内炎。Kenchappa[11]和Zaluski等[12]在白内障术后爆发的绿脓杆菌眼内炎患者的灌注液、超声乳化仪器的管道、粘弹剂、超声乳化手柄内能培养出相同的菌株，表明灌注液污染、操作不规范、一次性用品反复使用及手术器械消毒不严格均有可能引起毒力较强的致病菌感染。所以有人建议所有器械在进入眼内之前都需要用BSS（平衡盐溶液）冲洗以降低手术源性感染机会[12]。(2)术野的消毒:消毒范围从睫毛根部开始，绕睑裂由内向外扩散，上至眉弓以上额部，下至鼻尖、上唇，内侧超过鼻中线，外侧至耳前发际处，重复2～3次。大部分术后感染性眼内炎培养结果显示感染菌株与眼睑、睫毛根部或结膜囊内的菌株相符[13]，充分体现术野消毒的重要性。(3)手术方式:传统白内障囊外摘除术(extracapsular cataract extraction,ECCE)与超声乳化白内障手术相比，ECCE中细菌更易进入前房，这是因为在ECCE过程中前房变浅甚至塌陷的情况时有发生，前房压力骤降，细菌容易进入。而超声乳化手术中，前房稳定，有灌注液不停循环进出，细菌不易进入。通过细菌培养的方式发现ECCE前房污染的比例占28.2%，而超声乳化是7.6%[14]。但是超声乳化手术依赖于灌注抽吸管道完成，管道消毒不严格所导致的感染往往是很严重的。(4)切口方式:切口质量与发生术后感染有至关重要的关系。切口过大会延迟切口愈合增加眼内感染发生的机会，缝合关闭切口使这种可能性降低[15,16]。上方切口较颞侧主切口感染率低。Colleaux等[17]发现透明角膜切口和巩膜隧道切口的眼内炎发病率并无差异。(5)手术时间:手术操作时间愈长，感染几率愈大。若超过60min则被认为是眼内病菌污染的危险因素。很多研究都支持一个观点:术中后囊破损需进行玻璃体切除或已有后囊缺损者，术后眼内炎发生几率增加5～10倍[18,19]。正常情况下白内障术中进入前房的毒力较低或/和数量较少的细菌在正常前房环境中易被清除。而后囊膜破损细菌进入玻璃体腔，由于玻璃体无血管，代谢产物清除缓慢，是细菌及其他微生物的良好培养基，一旦感染，病原体易于在此繁殖[20]。(6)人工晶状体的植入:Assia等[21]发现人工晶状体手术中，晶状体只是接触眼表面，它的表面污染率即达到28%；动物实验证实[22]：植入人工晶状体组眼内炎发生率较单独白内障囊外摘除组发生率显着增高，且人工晶状体组较未植入组眼内炎重，持续时间长。而且不同材料的人工晶状体对病原菌的粘附性不同，一般硅凝胶型较丙烯酸酯型或PMMA型风险大，这与致病菌及人工晶状体生物学特性相关。

2.3术后危险因素 切口愈合不良或切口技术掌握不当时可增加感染机会；切口裂开或渗漏，特别是切口中有玻璃体嵌顿。有资料显示白内障术后眼内炎患者中发现22%切口愈合不良。在拆除球壁切口或伤口缝线时，暴露于外表的线结可将致病菌带入眼内引起眼内炎。

⑨ 常用的消毒方法有哪几种

常用的消毒方法有三种，即物理消毒法、化学消毒法、生物消毒法。

（1）物理消毒法

指用物理因素杀灭病原微生物及其他有害微生物的方法。包括自然净化、机械除菌、高热灭菌和太阳光照射等。

（2）化学消毒法

指用化学药品进行的消毒方法。

（3）生物消毒法

指用微生物发酵所产之热达到消灭病原微生物的方法。