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hiv检验方法应用研究

发布时间:2024-04-27 08:53:02

‘壹’ 血站是用什么方法检测HIV抗体的

HIV-抗体检测方法
常见检测方法
目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗HIV病毒抗体检测、病毒培养、核酸检测和抗原检测。其中对病毒抗体的检测是最常规使用的方法,这不但是由于这类检测特异性、敏感性较高,方法相对简便、成熟,更重要的原因是HIV抗体在病毒感染后除早期短暂的”窗口期”外的整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。在一些特殊情况下,当抗体检测无法满足HIV感染诊断的需要时,病毒分离及测定、核酸检测、抗原检测可作为辅助手段使用,这包括对非典型血清学反应样品的诊断、HIV感染的窗口期诊断、新生儿早期诊断和对特殊样品的诊断。 一、 酶联免疫吸附试验(ELISA)
目前应用的ELISA法有8种之多。它们的特异性和敏感性超过99%。
二、 颗粒凝集法(PA)
PA为快速、简便的一种筛选方法。如属阳性,应经WB证实。PA不需任何特殊仪器,其结果用肉眼可判别。全过程仅需5分钟。缺点有假阳性,且价格昂贵。
三、快速试剂
(一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法)
雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外,肉眼观察,定性的免疫分析,检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用,本品检测阳性者,需进行进一步筛查确认。
(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂
InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法, 用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。
四、HIV-抗体确认实验
免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。国内常用的确认试验方法是WB。
(一_免疫印迹实验(westernblot,WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法,就HIV的病原学诊断而言,它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法,WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。
确认试验流程:
有HIV-1/2混合型和单一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型试剂进行检测,如果呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如果呈阳性反应,则报告HIV-1抗体阳性;如果不满足阳性标准,则判为HIV抗体检测结果不确定。如果出现HIV-2型的特异性指示条带,需用HIV-2型免疫印迹试剂再做HIV-2的抗体确认试验,呈阴性反应,报告HIV-2抗体阴性;呈阳性反应则报告HIV-2抗体血清学阳性,并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析,
WB的敏感性一般不低于初筛实验,但它的特异性很高,这主要是基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化,能够检测针对不同抗原成分的抗体,因而能够用WB方法鉴别初筛实验的准确性。从WB确认试验结果看出,初筛试验尽管选择质量较好的试剂,如第三代ELISA,仍会有假阳性出现,必须通过确认试验才能得出准确结果。
(二)免疫荧光实验(IFA)
IFA法经济、简便、快速,曾被FDA推荐用于WB不确定样品的诊断。但需要昂贵的荧光显微镜,需要受过良好训练的技术人员、观察和解释结果易受主观因素的影响,结果不宜长期保存,IFA不宜在一般的实验室开展和应用。

‘贰’ 如何确诊HIV感染者试述各种可用的方法,哪些方法临床最常应用

临床最常用的确诊方法是先行ELISA法检测HIV抗体,若连续2次阳性,再作免疫印迹法(WB)或固相放射免疫沉淀试验等以助确诊。我国还需经各省的艾滋病确认实验室复查阳性才最后确诊。其他的检测方法有ELISA法检测p24抗原。RT-PCR法检测HIVRNA或PCR法检测HIV的前病毒DNA等。目前,应用定量PCR法对HIV定量以供抗病毒治疗的考核和预后估计。

‘叁’ 艾滋病检测方法有哪些

1、抗体检测

主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。ELISA用去污剂裂解HⅣ或感染细胞液提取物作抗原,IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测,如果发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性,可做Westernblot(WB,蛋白印迹法)进一步确证。

WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HⅣ蛋白进行分离,再经传移电泳将不同蛋白条

艾滋病检测带转移于硝酸纤维膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶标抗体染色,就能测出针对不同结构蛋白抗体,如抗gp120、gp41、P24抗体,特异性较高。

快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HⅣ抗体检测的定性检测。

2、抗原检测

用ELISA检测P24抗原,在HⅣ感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性。

3、核酸检测

用PCR法检测HⅣ基因,具有快速、高效、敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HⅣ感染早期诊断及艾滋病的研究中。

4、病毒分离

常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。

5、检测试纸检测

艾滋病检测试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂。它可检测血清或血浆标本中的HⅣ-1/2特有性抗体。所有操作时间若是15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质

艾滋病检测控对照、无需所有附加药剂。适合个人检测,也适合各大医院,疾控中心检测。

‘肆’ 简述hiv的微生物学检测方法有哪些

主要有酶联免疫吸附试验(ELlSA)和免疫荧光试验(lFA)ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测 如果发现阳性标本应重复一次 为防止假阳性 可做Western blot(WB 蛋白印迹法)进一步确证
WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离 再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上 加入病人血清孵育后 用抗人球蛋白酶标抗体染色 就能测出针对不同结构蛋白抗体 如抗gp120、gp41、p24抗体 特异性较高
用ELISA检测p24抗原 在HIV感染早期尚未出现抗体时 血中就有该抗原存在 由于p24量太少 阳性率通常较低 现有用解离免疫复合物法或浓缩p24抗原 来提高敏感性
用PCR法检测HIV基因 具有快速 高效 敏感和特异等优点医学教育网搜集l整理 目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中
常用方法为共培养法 即用正常人外周血液分离单个核细胞 加PHA刺激并培养后 加人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中

‘伍’ HIV的检测步骤有哪些

艾滋病检测种类:血液试纸和唾液试纸两大类。
目前市场上的艾滋病试纸种类主要分为两大类,其中血液试纸主要包括雅培hiv试纸、爱康hiv试纸等。而唾液艾滋病试纸的种类就显得比较单调,其中使用最广泛的就是美国艾卫艾滋病检测试纸,深受很多的高危人群及恐艾症患者的青睐。

专家指出,自从第一例艾滋病毒被确诊以后,全球对于艾滋病毒的研究已经有30多年的历史,而在这些年中也确实取得了十分重大的突破,其中艾滋病试纸研发问世,其所提倡的艾滋病自测就为艾滋病毒的预防奠定了崭新的里程碑。据本站笔者了解得知,艾滋病试纸是一种使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂,可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体,从而准确的判断出患者体内是否含有艾滋病毒,进而了解该患者是否是艾滋病毒感染者。
艾滋病检测试纸优势多,不同艾滋病试纸准确率达99.99%
不同的艾滋病试纸在不同的情况下使用起来具有更高的准确性和方便性。但是这几种常见的HIV检测试纸使用起来主要有以下几个方面的优势:所有操作时间15分钟,所有的检测操作过程简便、出检测结果十分迅速又准确、而且全部都是自带质控对照,检测过程中还不需要使用附加药剂。值得一提的是,自己在家就能够独立完成所有的检测过程,并不再像过去那样一定要到专业的疾控中心检测,这样不但减轻了疑似感染者的心理折磨,而且还出检测结果快速高效,为感染者及时治疗争取了更多有利的时间。
据悉,要想准确知道检测结果,还需要注意的一个问题就是艾滋病检测的最佳时间,而国际上规定以高危发生的日期开始计算,2周后即可检测艾滋病病毒,以6周以后为准。而且如果在检测过程中要想更加准确了解结果,最好是一次性使用多种不同品牌的艾滋病试纸,注意准确率更高,几乎是100%。

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‘柒’ 艾滋病怎么检测

艾滋病是一种严重的性病,一个朋友当中怀孕自己得了这种疾病,到医院进行过检测,那么,艾滋病怎么检测?下面和大家介绍一下。
1. 检测方法一、抗体检测。主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HIV抗体检测的定性检测,这也是一种最常用的方法,同时检测的准确率高达90%。


2. 检测方法二、抗原检测。用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性。


3. 检测方法三、核酸检测。用PCR法检测HIV基因,具有快速、高效、敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。


注意事项
艾滋病是一种严重的疾病,特别是也会有潜伏期,在平时的时候要重视对这种疾病的预防,主要是在进行性生活的时候要做好防护的措施,而且也要注意输血等情况的保护方法。

‘捌’ 常用的艾滋病检测方法有哪些

常用的艾滋病检测有:

  1. 抗体检测:HIV-1/HIV-2抗体检测是HIV 检测的金标准。经筛查试验(初筛和复检)确证试验两步。初筛实验室主要是采用酶联免疫试验、化学发光法或免疫荧光法试验。确认实验室进行复检主要是检测血清gp24及gp120抗体,灵敏度达99%,抗体初筛检测结果还要用免疫蛋白印迹法检测确认即确认试验。

  2. 抗原检测:抗HIVp24抗原单克隆抗体制备试剂,用酶联免疫法测血清HIVp24抗原。有助于抗体产生窗口期和新生儿早期感染的诊断。

  3. 病毒载量测定:病毒载量的测定可了解疾病进展,提供病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整以及为早期诊断提供参考。可用荧光定量PCR扩增技术。

‘玖’ 谁知道广州市番禺石基人民医院是用什么方法检测hiv

检测方法编辑
检测HIV感染者体液中病毒抗原和抗体的方法,操作方便,易于普及应用,其中抗体检测尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的测定,在HIV感染检测中的地位和重要性也日益受到重视。

抗体检测
抗体检测
血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围,可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。
确证试剂
筛检实验阳性血清的确证最常用的是Western blot(WB),由于该法相对窗口期较长,灵敏度稍差,而且成本高昂,因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高,WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。
FDA批准的另一类筛检确证试剂是-免疫荧光-试验(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相对简单,整个过程在1-1.5小时内即可结束。此法的主要缺点是需要昂贵的荧光检测仪和有经验的专业人员来观察评判结果,而且实验结果无法长期保存。现在FDA推荐在向WB不能确定的供血员发布最终结果时以IFA的阴性或阳性为准,但不作为血液合格的标准。
筛检试验
筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。2012年,世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。
颗粒凝集实验是另一种操作简单方便,成本低廉的检测方法,该方法结果可通过肉眼判定,灵敏度很高,特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用,缺点是必须使用新鲜样品,特异性较差。
80年代后期发展起来的斑点印迹检测(Dot-blot assay)是一种快速ELISA(Rapid ELISA)方法,这种方法操作极为简便,过程短暂,整个过程多数在5-10分钟内甚至3分钟内即可结束,但该法比ELISA和颗粒凝集试剂昂贵得多。
人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液检测试剂盒(胶体金法)就属于侧向免疫层析法(金免疫)类别,基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20分钟即可定性得出检测结果的快速诊断试剂,用于检测口腔粘膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。可用于自愿咨询检测、不愿采血、晕针患者的初筛。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需进行进一步筛查确认。[3]
【HIV阴性】说明从人体内检测不到HIV抗体,阴性符号以(-)表示。不能说没有感染HIV, 要看是什么时候检测的,在窗口期内,感染者的体内还没有产生HIV抗体,或还没有产生足量的HIV抗体,这时HIV检测是阴性结果,如果在窗口期之后检测的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV阳性】说明从人体内检测到了HIV抗体,阳性符号以(+)表示。
【检测结果不定因素】
感染还处于窗口期:从HIV进入体内到检测这段时间还不够长,因此血清还没有形成典型的抗体反应
艾滋病进展到终末期,抗体水平下降
其他非病毒蛋白抗体的交叉反应:自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输血或器官移植等情况下,身体可以产生一些抗体,其反应与HIVP24核心蛋白抗体引起的反应很相似

抗原检测
病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性,但HIV-1抗体确认阴性者的辅助诊断。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂,试剂必须经过SDA批准注册、在有效期内,其阳性结果必须依据试剂说明书经中和试验确认。HIV-1P24抗原检测的敏感性为30-90%,该结果仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1 P24抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除HIV感染,临床中一般不作为常规诊断项目。

核酸检测
HIV核酸检测可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展等。常用的HIV病毒载量检测方法包括逆转录PCR实验(RT-PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)以及实时荧光定量PCR技术。值得注意的是,每一种HIVRNA定量系统都有其最低检测限,即可以测出的最低拷贝数或国际单位,RNA定量检测时未测出不等于样品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除HIV感染;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV感染的辅助指标,不能单独用于HIV感染的诊断。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的实验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平。
HIV核酸定性检测也可用于HIV感染的辅助诊断,在分析HIV基因亚型和变异等基础研究中应用。通常使用PCR或RT-PCR技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。报告定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外,利用核酸检测方法的高度敏感性,使用集合核酸扩增检测技术和方法,对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测,可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。

试纸上有两条线。上面为质控线也叫对照线,下面的叫检测线。

检测时如果只显示上面一条结果为阴性,如果显示两条判读为阳性,
如果只有下面一条或者一条也没有为无效结果,建议复测。aware天猫

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