分光光度计计算方法

① 分光光度计测样品含量，标准曲线得出来了，样品的吸光度和浓度怎么算

1、样品的浓度，必须按照测定方法标准的结果计算式进行计算：
2、一般来说结果计算式： c = m/V =[（ A-Ao）/b]/V
式中： c -- 样品测定结果（mg/L）
（ A-Ao） -- 样品测定吸光度减空白吸光度
b -- 标准曲线 的回归方程（Y = a + b X） 的斜率
V -- 样品 取样体积（ml）

② 谁能告诉我可见分光光度计的计算公式和计算方法

答“；
【】可见分光光度法的计算：求标准曲线的回归方程；将样品的吸光度代入回归方程,可以得到其质量（ug）
【】质量（ug）数除以取样体积,得到样品检测结果

③ 我想用分光光度计测试眼镜片的黄色指数，公式里面需要用到X、Y、Z三刺激值，这三个值怎么计算

光谱仪可以测出RGB的光谱分布
然后将光谱分布加权对应波长的标准光谱三刺激值（常数）就是对应的RGB光谱三刺激值。
最后加总上述RGB对应的XYZ光谱三刺激值就是你要的X Y Z

④ 简述721分光光度计的使用方法

721型分光光度计的使用方法为：

1、检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0%。

2、盖上样品室盖使光电管受光，推动试样架拉手，使参比溶液池（溶液装入4/5高度，置第一格）置于光路上，调节100%透射比调节器，使电表指针指T=100%。

3、重复进行打开样品室盖，调0，盖上样品室盖，调透射比为100%的操作至仪器稳定。

4、盖上样品室盖，推动试样架拉手，使样品溶液池置于光路上，读出吸光度值。读数后应立即打开样品室盖。

5、测量完毕，取出比色皿，洗净后倒置于滤纸上晾干。各旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，拔下电源插头。

6、放大器各档的灵敏度为：“l” ×1倍；“2”×10倍；“3”×20倍，灵敏度依次增大。由于单色光波长不同时，光能量不同，需选不同的灵敏度档。选择原则是在能使参比溶液调到T= 100%处时，尽量使用灵敏度较低的档，以提高仪器的稳定性。

(4)分光光度计计算方法扩展阅读

使用721分光光度计的注意事项:

1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。

3、在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。

4、改变灵敏度档后，应重新调“0”和“100”。

⑤ 请问分光光度法测物质含量的原理及方法是什么

分光光度计原理大致是采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
根据朗伯比尔定律单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度；
I。为入射的单色光强度；
I 为透射的单色光强度；
T 为物质的透射率；
k 为摩尔吸收系数；
L 为被分析物质的光程，即比色皿的边长
c 为物质的浓度
物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。

⑥ 光度如何计算

光度是不是吸光度？
如果是，就按照朗伯比尔定律计算：A=kbc
其中A为吸光度，k为摩尔吸光系数，b为液层厚度，c为溶液的摩尔浓度。通常测定吸光度是为了确定已知物质的未知浓度。
一般吸光度不是通过计算得到的，而是通过对比得到的。即：先用已知浓度c(已知)的标准液确定好该仪器(分光光度计)的最大吸收波长和A(标准)的kb是多少，然后测定未知浓度的A(未知)，通过对比即可得知c(未知)。

⑦ 分光光度计怎么计算纯度

1、测定的物质要称量其质量数G；
2、测定的物质中的某个组分的纯度，通过分光光度法求出其质量m；
3、计算纯度= （m/G) x100%

⑧ 分光光度计的工作原理

分光光度计的基本工作原理是基于物质对光（对光的波长）的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带。

所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。

T = I/Io lg（Io/I）=εcb

式中，T为透过率，Io为入射光强度，I为透射光强度，A为消光值（吸光度），ε为吸收系数，b为溶液的光径长度，c为溶液的浓度。从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化的。

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

注意事项：

1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。

3、在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

⑨ 紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量

根据朗伯比尔定律得出：当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时，由于溶质吸收了光能，光的强度就会减弱。溶液浓度越大，液层越厚，入射光越强，光被吸收的就越多。

如果用公式表示的话，就可以表示为表示为：A=E*C*L（A为吸光度，C为溶液浓度，L为液层厚度）。E是物质在一定波长下的特征

常数，与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质（如：固、液、气）。在进行含量测定的时候，我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长，以防止外界干扰。于是，我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量，过程如下：

A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2

A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)

由于标准液和待测液中的物质相同，故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等，物质含量m=C*V*M（M为相对分子质量，V为体积）故m2=（A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。

(9)分光光度计计算方法扩展阅读：

在分光光度分析中，比尔定律是一个有限的定律，其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等，无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射；入射光为单色平行光。

导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多，但基本上可分为物理和化学两个方面。物理方面主要是入射光的单色性不纯所造成的；化学方面主要是由于溶液本身化学变化造成的。

比尔定律在有化学因素影响时不成立。解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。离解是偏离朗伯-比尔定律的主要化学因素。溶液浓度的改变，离解程度也会发生变化，吸光度与浓度的比例关系便发生变化，导致偏离朗伯-比尔定律。

溶液中有色质点的聚合与缔合，形成新的化合物或互变异构等化学变化以及某些有色物质在光照下的化学分解、自身的氧化还原、干扰离子和显色剂的作用等，都对遵守朗伯-比尔定律产生不良影响。

来自出射狭缝的光，其光谱带宽度大于吸收光谱带时，则投射在试样上的光就有非吸收。这不仅会导致灵敏度的下降，而且使校正曲线弯向横坐标轴，偏离朗伯-比尔定律。非吸收光越强，对测定灵敏度影响就越严重。并且随着被测试样浓度的增加，非吸收光的影响增大。当吸收很小时，非吸收光的影响可忽略不计。