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菌株制菌悬液的制备方法步骤

发布时间:2022-10-06 03:00:26

A. 细菌菌悬液的制备是不是要用肉汤培养基啊然后再用生理盐水稀释呢

1、不一定,根据所培养的细菌的营养需要选择培养基,可以是固体培养基也可以是液体培养基。肉汤培养基只是其中的一种而已。
2、培养结束后,如果是固体培养,直接收集菌泥,之后加入到生理盐水或磷酸缓冲液,重悬均匀后即成。如果是液体培养可先3000rpm离心去上清,或无菌过滤(滤纸孔径小于0.45微米),将滤纸上的菌泥收集,其他方法同上。

B. 请问如何将固体斜面培养基上的大肠杆菌菌种配制成菌悬液

先配制100Lm生理盐水,加入250m三角瓶中,再在其中加入20粒左右玻璃珠,高压灭菌。然后用接种环将斜面上的菌苔刮下,接入三角瓶中,一般接1-2环即可。或者用少量的无菌生理盐水倒入斜面中,用接种环将菌苔刮下,然后倒入三角瓶中。将三角瓶振摇1分钟左右,即可制成菌悬液。
一般做抑菌试验都采用混菌法,将菌悬液加入灭菌后冷却至50度左右的培养基中混匀,再倒平板。很少采用将菌悬液直接倒在平板上的方法,因为抑菌和杀菌是两个不同的概念。

C. 细菌悬浮液怎么制作

利用病组织配悬浮液的方法:选取被细菌侵染的病组织,用升汞或酒精进行消毒,之后用无菌水清洗3-5次,再将病组织放入无菌水中,用灭菌的剪刀将其剪碎,在水中放置20分钟,待病组织中的细菌充分溢到水中之后,进行过滤,除去病组织,过滤所得液体即为细菌悬浮液

D. 如何制备菌悬液

- -
拿个EP管称重归零,再用枪头挑取菌落到EP管里头,然后称重。
到了10mg就加1ml无菌水混匀。

目测一下浑浊度,以后制备就目测下浑浊度就好了,不用称,没必要那么准确。

E. 如何制备菌悬液

菌悬液的制备:如果用于分离的样品是水样液体则不需此过程,即可直接作为菌悬液。固体样品如土壤、泥等,则需制备菌悬液。具体做法是:称取样品1g,放入盛有99ml无菌水的三角瓶中,震荡5分钟充分摇均,使细菌分散。这样将样品稀释成为10-2菌悬液。

F. 抑菌实验中怎样制作符合要求的菌悬液

操作步骤
l.编号
取无菌平皿9套,分别用记号笔标明10-1---10-9.另取6支盛有4.5mL无菌水的试管,依次标是10-1---10-9.
2.稀释
用lmL无菌吸管吸取lmL已充分混匀的大肠杆菌菌县液(待测样品),精确地放0.5mL至10-1的试管中,此即为10倍稀释.将多余的菌液放回原菌液中.
将10-1试管置试管振荡器上振荡,使菌液充分混匀.另取一支lml吸管插入10 1试管中来回吹吸菌悬液三次,进一步将菌体分散、混匀.吹吸菌液时不要太猛太快,吸时吸管伸人管底,吹时离开液面,以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢.用此吸管吸取10-1菌液lmL,精确地放0.5mL至10-2试管中,此即为100倍稀释.其余依次类推.放菌液时吸管尖不要碰到液面,即每一支吸管只能接触一个稀释度的菌悬液,否则稀释不精确,结果误差较大.
3.取样
用9支1mL无菌吸管分别吸取10-1至10-9的稀释菌悬液各lmL,对号放入编好号的无菌平皿中,每个平皿放0.2mL.不要用lmL吸管每次只靠吸管尖部吸0.2mL稀释菌液放入平皿臼,这样容易加大同一稀释度几个重复平板间的操作误差.
4.倒平板
尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒入融化后冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基约15mL/平皿,置水平位置迅速旋动平皿,使培养基与菌液混合均匀,而又不使培养基荡出平皿或溅到平皿盖上.
由于细菌易吸附到玻璃器皿表面,所以菌液加入到培养皿后,应尽快倒入融化并于已冷却至45℃左右的培养基,立即摇匀,否则细菌将不易分散或长成的菌落连在一起,影响计数.待培养基凝固后,将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养.
5.计数
培养48h后,取出培养平板,算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数,并按下列公式进行计算,每毫升中菌落形成单位(cfu)=同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数×5

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