1. 牛布氏桿菌病的診斷及防治方法
牛布氏桿菌病是人畜共患的慢性傳染病。主要侵害生殖系統，以母牛發生流產和不孕，公牛發生睾丸炎和不育為特徵，故又稱傳染性流產。本病病原體是牛布氏桿菌。
該病臨床症狀主要表現為妊娠母牛流產。流產後多數伴發胎衣不下或子宮內膜炎。
公牛發生睾丸炎和副睾炎，失去配種能力。
對牛布氏桿菌病的診斷可採取3種實驗室檢查方法。
（1）細菌學檢查。取母牛陰道分泌物、胎衣、胎兒胃內容物塗片，將塗片在酒精燈上加溫固定後，滴加2%沙黃水溶液，在火焰上方微微加熱0.5～1分鍾至出現蒸氣，水洗後用1%孔雀綠復染1～2分鍾，水洗吸干、鏡檢。若看到紅色的球桿菌便可確診。其他雜菌成綠色。
（2）全乳環狀反應。取剛擠出的全乳1毫升放於反應管內，加入抗原（染成藍色或紅色）0.1毫升，充分振盪混合，靜置於37℃溫箱中，1小時後取出立即判定。用藍色抗原時，若在乳脂層出現比乳柱深的藍色環狀帶即判為陽性。
（3）平板凝集反應。此法比較簡單實用。
採取被檢牛血液，待凝固後，分離血清作被檢材料。先用蠟筆在玻璃板上劃成2厘米×2厘米的方格，每一方格中放置一份被檢血清0.02毫升，用0.2毫升吸管吸取充分攪勻的抗原，分別在每一血清樣品旁加入0.03毫升抗原，每格各用一根火柴棒或牙簽攪拌血清和抗原，使其均勻混合，若室內溫度偏低，可將玻板在酒精燈上方微微加溫，於4分鍾內出現凝集現象者為陽性。
本病公牛無治療價值。母牛流產後繼發予宮內膜炎或胎衣不下時可用0.02%呋喃西林，0.1%高錳酸鉀液或生理鹽水沖洗子宮，排除沖洗液後向子宮內灌入抗生素葯物。胎衣不下時可採取手術剝離或肌內注射垂體後葉素50～100單位，以加速胎衣排除。本病防疫主要是加強檢疫，不到疫區引種。必須買牛時一定隔離30天以上，並作二次檢疫，確認健康才能入群。
對同群牛堅持每年定期預防注射布氏桿菌菌苗，被污染的場所及用具有3%～5%來蘇兒消毒。
2. 如何確診豬布氏桿菌病
豬群中發生大批流產，公豬睾丸炎，有的豬發生跛行、關節炎等，應懷疑布氏桿菌病，確診必須進行實驗室診斷。
（1）細菌學檢查
採集流產母豬子宮及陰道分泌物、血液、乳汁、流產胎兒胃內容物，肝、膽、淋巴結等病料。製成塗片，柯氏染色後鏡檢紅色的細菌為布氏桿菌。
（2）血清學試驗
可採用平板凝集試驗和試管凝集試驗及補體結合試驗。
3. 豬布氏桿菌病的疾病診斷
本病的流行情況、臨床症狀和病理變化均無明顯特徵，同時隱性感染動物較多。因此，應以實驗室檢查為依據，結合流行情況和症狀進行綜合診斷。 實驗室檢查 布魯氏菌病的實驗室檢查方法很多，而最簡單實用的方法是布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗。採取被檢豬血液，待凝固後，分離血清作為被檢材料。准備0.2毫升吸管和潔凈的玻璃板以及虎紅平板凝集試驗抗原。先用蠟筆在玻板上劃成4平方厘米的方格，在每一方格的血清樣品旁加0.03毫升的被檢血清，搖動抗原瓶使抗原均勻懸浮，用0.2毫升吸管吸取抗原，在每一方格的血清樣品旁加入0.03毫升抗原，用牙簽攪拌血清和抗原，使其均勻混合，於4分鍾內判定結果，出現凝集現象者判為陽性反應，否則判為陰性，一般用於豬群的布魯氏菌病檢疫。也可用其他凝集試驗和變態反檢查。
4. 如何做羊布病檢測
羊布氏桿菌病是羊的一種慢性傳染病。主要侵害生殖系統。羊感染後，以母羊發生流產和公羊發生睾丸炎為特徵。布氏桿菌病也是一種人畜共患的慢性傳染病。其特點是生殖器官和胎盤發炎，引起流產、不育和各種組織的局部病症。
人類感染檢查：
1、血像：白細胞計數正常或偏低，淋巴細胞相對增多。
2、細菌學檢查：血、骨髓、尿均可作培養，早期血、骨髓培養陽性可達70%～80%。
3、血清學檢查：
（1）血清凝集試驗。病程2周以上可陽性，效價在1∶100以上，兩次測定效價成倍上升，有助診斷。
（2）補體結合試驗。效價在1∶10以上為陽性。
（3）抗人球蛋白試驗。效價>1∶80為陽性。
（4）皮內試驗。將布氏桿菌素0.1ml注入前臂皮內，24～48小時局部腫塊超過2.5×2.5cm以上為陽性。
（5）熒光抗體測定也可應用。
5. 實驗室檢測家畜布氏桿菌病的方法主要有哪些
1．血象白細胞半數正常或輕度減少，淋巴細胞相對或絕對增多，分類可達60%以上。血沉在各期均增速。久病者有輕或中度貧血。 2．細菌學檢查患者血液、骨髓、乳汁、子宮分泌物均可做細菌培養。因牛種菌初分離困難。要求嚴格的環境，故各種標本最好採集兩份，一份用含肝浸液的肉湯做培基，在CO2孵箱中培養；另一份放一般環境中孵育，培養時間不得短於2周。急性期陽性率高，慢性期低。骨髓標本較血液標本陽性率高。有人建議慢性布魯氏菌病患者的血液接種到雞胚卵黃中可獲較高陽性率。 3．免疫學檢查 （1）血清凝集試驗（Wright試驗）試管法較靈敏。患者多在第二周出現陽性反應，1：100以上有診斷價值。病程中效價遞增4倍及以上意義更大。正常人可有低滴度的凝集素；某些傳染病的假陽性率可達30%以上，如兔熱病該凝集效價升高；注射霍亂疫苗的人90%可呈假陽性；接種布魯氏菌活菌苗者，凝集效價也增高。診斷時要注意分析。另外由於抗體IgA、IgG、IgM量的比例不同，如IgA含量高則可出現患者血清低稀釋度為陰性，高稀釋度反為陽性的所謂前帶現象。因此做該實驗時應增大患者血清稀釋范圍。 （2）補體結合試驗補體結合抗體主要為IgG，出現較遲，持續較久，一般1：16以上即為陽性。對慢性患者有較高特異性。 （3）抗人球蛋白試驗（Coombs』tist）用於測定血清中的不完全抗體。不全抗體可阻斷完全抗體與抗原的凝集反應，使凝集試驗呈假陰性。Coombs試驗是使不完全抗體與不可見抗原結合的復合物通過抗人球蛋白血清結合成塊，直接可見。故凝集試驗陰性者可作此檢查。
6. 布氏桿菌的微生物學檢驗
本菌傳染性大，要注意防止實驗室污染。
（一）分離培養
急性期採集血液，慢性期採取骨髓，接種於雙相肝浸液培養基（一半斜面，一半液體）置37℃10%CO2環境中培養，每隔2天檢查一次，如無細菌生長則搖盪培養基，使液體浸過斜面上，有細菌生長，可依鑒定項目確定是否為布氏桿菌。經一月培養無細菌生長，可報告陰性。
（二）血清學檢查
通常作凝集試驗，判定凝集效價1：50可疑，1：100以上為陽性。效價增高4倍以上時，更有診斷價值。
7. 布魯氏菌病的檢查
1.周圍血象
白細胞計數正常或稍偏低，淋巴細胞相對或絕對增多。血沉在急性期增速，慢性期亦偏高。貧血不清，僅見於嚴重患者或有延徒性病灶者。
2.細菌培養
需時較長，4周後仍無生長方可放棄。骨髓培養的陽性率高於血液，慢性期尤然。急性期羊型患者的血培養陽性率可達60%～80%。
3.免疫學試驗
（1）血清凝集試驗 試管法乃直接檢測脂多糖抗原的抗體，效價≥1:160為陽性，但注射需亂菌苗後也可呈陽性，故應檢查雙份血清，若效價有4倍或以上增長，乃提示近期布氏桿菌感染。
（2）酶聯免疫吸附試驗（ELISA） 該法的陽性率高於凝集試驗，且檢測IgM及IgG的敏感性相似。因慢性患者的抗體屬IgG型，故本法可同時用於急、慢性病人的診斷。近來有採用親和素酶聯試驗，較ELISA更敏感。
（3）2-巰基乙醇（2-ME）試驗 本法可檢測IgG，用於鑒別自然感染與菌菌免疫。自然感染達1個月後，體內凝集即以IgG型為主（初為IgM型），該IgG對2-ME有耐受性；而菌菌免疫後3個月內的凝集素均以IgM為主，可為2-ME所破壞。
（4）補結試驗 補結抗體亦屬IgG，病程第3周的效介可超過1:16。本試驗的陽性率高於凝集試驗，特異性亦高，但出現時間晚於凝集試驗。
（5）人球蛋白試驗 病人尚可產生一種不完全抗體，後者雖可與抗原結合，但肉眼不可見。當將抗人球蛋白免疫血清加入抗原-不完全抗體復合物中，即出現直接可見的反應。不完全抗體出現早而消失晚，故可用於急、慢性期病人的診斷。鑒於本法操作復雜，只適用凝集試驗陰性的可疑病人，效價>1:80為陽性。
（6）皮內試驗 布魯菌素皮試乃為一種延遲超敏反應，24～48小時觀察結果。僅有局部紅暈而無腫塊者為陰性，局部紅腫和硬快的直徑達2～6cm者為陽性。皮試在病程6個月內的陽性率很低，慢性期患者幾近100%呈陽性或強陽性反應。
（7）其他免疫試驗 有反向被動血凝試驗、放射免疫、間接免疫熒光試驗等，因操作復雜，不適於普遍採用。
4.其他檢查
腦脊液檢查適用於腦膜炎患者，腦脊液細胞增多（淋巴細胞為主），蛋白質增高，其餘均正常。心電力產可示P-R新時期處長、心肌損害、低電壓等。骨、關節的X線檢查可見軟組織鈣化、骨質修復反應強而破壞性小，椎間盤和椎間隙變窄等。肝功能及腦電圖的改變的均屬非物異性。
8. 布氏桿菌病是怎樣一種病如何檢測
布氏桿菌病是由布氏桿菌引起的一種人畜共患的慢性傳染病。傳染途徑是病牛或帶菌牛，特別是在流產或分娩時，大量布氏桿菌隨胎兒、胎水和胎衣排出，偶爾在乳、糞、尿以及陰道流出的惡露內發現。然後通過消化道、損傷或完整的皮膚、黏膜、結膜和交配而互相感染。病牛的臨床特點是發生流產、胎衣滯留、子宮炎、不孕症、乳房炎、關節炎等，孕牛在7～8月時流產。公牛發生睾丸炎和附睾炎。人可通過與病牛的頻繁接觸及食入未嚴格殺菌的病牛乳、肉而感染。人患病的主要症狀是呈波浪熱、關節炎和睾丸腫脹，頭和全身疼痛，有的發生骨質變形、流產等。
布氏桿菌的檢驗主要是採用兩種血清學診斷方法：
（1）虎紅平板凝集反應。采被檢血清0.03毫升，加抗原0.03毫升與之混合，4分鍾內觀察反應並判定結果。凝集者判為陽性，不凝者判為陰性。對陽性反應的牛再進行試管凝集反應。
（2）試管凝集反應。操作方法：每份血清用5支小試管，第一管加入2.3毫升0.5%碳酸生理鹽水；第二管不加；第三、第四、第五管各加入0.5毫升。用1毫升吸管吸取被檢血清0.2毫升加入第一管內並混勻之，以該吸管吸取混合液分別加入第二管和第三管，每管0.5毫升。以該吸管將第三管混合液混勻，吸取0.5毫升加入第四管，混勻後，再從第四管吸取0.5毫升加入第五管混勻，棄去0.5毫升。如此稀釋後，從第二管起，血清稀釋度分別為1∶12.5，1∶25，1∶50，1∶100。然後先以0.5%碳酸生理鹽水將抗原原液作20倍稀釋，並加入上述各管（第一管不加，作為血清對照組），每管加0.5毫升，振搖均勻。加入血清後，第二至第五管各管混合液的容積均為1毫升，血清稀釋度從第二管起依次為1∶25，1∶50，1∶100，1∶200。每次試驗還應做陰性血清對照：陰性血清需取自未患過布氏桿菌病的牛，且先須以布氏桿菌抗原檢定，證明確為陰性反應者。陽性血清對照：陽性血清通常取自人工免疫的牛，但亦可從送檢血清中選取，其凝集價最好不低於1∶800。抗原對照：加1∶20抗原稀釋液0.5毫升於試管中，再加入0.5毫升碳酸生理鹽水。以上試管於充分振盪後置於37～38℃恆溫箱中22～24小時，然後檢查並記錄結果。
判定標准：「++++」表示上層液體100%清亮，管底有極顯著的傘狀沉澱物。振盪時，沉澱物碎裂成花瓣狀、塊狀和粒狀（100%菌體被凝集）。「+++」表示凝集現象與四個加號相同，但上層液體75%清亮（75%菌體被凝集）。「++」表示上層液體50%清亮，管底有傘狀沉澱物，振盪時碎裂成花瓣狀、塊狀和柱狀（50%菌體被凝集）。「+」表示上層液體25%清亮，管底有不很顯著的傘狀沉澱，或只有傘狀沉澱的痕跡。振盪時，在液體中有可見小塊和粒狀物（25%）菌體被凝集。「-」表示無凝集現象。液體不透明，無傘狀沉澱，有時細菌可能沉於管底，但振盪時又呈均勻混濁狀態。牛以1∶100稀釋度出現兩個加號以上的凝集現象時，被檢血清判定為陽性反應。以1∶50稀釋度出現兩個加號以上的凝集現象時，被檢血清判定為可疑反應。可疑反應的牛，經過3～4周，須重新采血檢驗。如重檢仍為可疑，應判定為陽性反應。
