植物中還原糖的檢測方法有哪些

『壹』 還原糖鑒定

還原性糖的鑒定： 斐林試劑由質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液配製而成,二者混合後,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉澱。

實驗材料准備：植物組織是常用的實驗材料,但必須加以選擇。本實驗最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近於白色的,如蘋果和梨的果實。經試驗比較,顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。

性質：

能夠還原斐林(H.von Fehling)試劑(本尼迪特試劑）或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖，所有的單糖（除二羥丙酮），不論醛糖、酮糖都是還原糖。

大部分雙糖也是還原糖，蔗糖例外。斐林試劑是含Cu2+絡合物的溶液，被還原後得到磚紅色Cu2O的沉澱。托倫斯試劑被還原後能生成單質銀，發生「銀鏡反應」。

分子結構中含有還原性基團（如游離醛基或游離酮基）的糖，叫還原糖。如葡萄糖。果糖含有游離的酮基，所以果糖也屬於還原糖。

以上內容參考：網路-還原性糖

『貳』 可溶性糖含量的測定方法有哪些

測定方法有以下幾種：
1.蒽酮法測定可溶性糖
2.苯酚法測定可溶性糖
3.3 ,5 –二硝基水楊酸比色法測定還原糖
4.斐林試劑比色法測定還原糖

斐林試劑比色法測定還原糖步驟

一、原理
植物組織中的可溶性糖可分為還原糖（主要是葡萄糖和果糖）和非還原糖（主要是蔗糖）兩類。還原糖具有醛基和酮基，在鹼性溶液中煮沸，能把斐林試劑中的 Cu 2+ 還原成 Cu + ，使藍色的斐林試劑脫色，脫色的程度與溶液中含糖量成正比，在 590 nm 波長下比色測定吸光度，查標准曲線，即可計算出所測樣品中還原糖的含量。本方法也可用於測定蔗糖及總糖含量。

二、實驗材料、試劑與儀器設備
（一）實驗材料
新鮮植物樣品或烘乾粉碎過的植物樣品。

（二）試劑
1. 斐林試劑 A 液： 40 g CuSO 4 · 5H 2 O 溶解於蒸餾水定容至 1000 mL 。
2. 斐林試劑 B 液： 200g 酒石酸鉀鈉（ KNaC 4 H 4 O 6 · 5H 2 O ）與 150g NaOH 溶於蒸餾水中，並定容至 1000 mL 。
A 、 B 兩液分別貯存，使用前等體積混合。
3. 0.1 ％葡萄糖標准液：取 80 ℃下烘至恆重的葡萄糖 0.1000 g ，加蒸餾水溶解，定容至 100 mL 。
4. 0.1mol/LNaOH 。
5. 甲基紅指示劑： 0.1 g 甲基紅溶於 250 mL 60 ％乙醇中。 6. 10 ％ Pb(Ac) 2 。 7. 飽和 Na 2 SO 4 。

（三）儀器設備
分光光度計，分析天平，離心機，水浴鍋，具塞刻度試管，刻度吸管，容量瓶，研缽。

三、實驗步驟
1 . 標准曲線的製作 取 7 支試管，按表 24 – 4 分別加入各溶液。 將以上各管混合後加塞，於沸水浴中加熱 15 min 。取出後自來水冷卻， 1500 r/min 離心 15 min 。取上清液，用分光光度計在 590 nm 波長下比色，以蒸餾水作對照，讀取吸光度。用空白管的吸光度與不同濃度糖的各管的吸光度之差為橫坐標，對應的糖含量為縱坐標，繪制標准曲線。
2. 樣品中還原糖的提取 取新鮮的植物樣品洗凈、擦乾、剪碎，稱取 3.00 g ，放入研缽中研磨至糊狀，用水洗入大試管中。體積為 10 ～ 15 mL 時，加 2 ～ 3 滴甲基紅指示劑，如呈紅色，可用 0.1 mol/L 的 NaOH 中和至微黃色。若用風干樣品，可稱取乾粉 3.00 g ，先在燒杯中用少量水濕潤，然後用水洗入 250 mL 容量瓶中，如顯酸性，可用上法中和。 將大試管置於 80 ℃的恆溫水浴中保溫 30 min ，其間搖動數次，以便將還原糖充分提取出來。對含蛋白質較多的樣品，此間可加 10 ％ Pb(Ac) 2 ，除去蛋白質，至不再產生白色絮狀沉澱時，加飽和 Na 2 SO 4 除去多餘的鉛離子。 30 min 後取出冷卻，將提取液全部轉入 100 mL 容量瓶中。定容至刻度，搖勻後過濾待測。
3. 樣品測定 吸取 6 mL 待測液，加 4 mL 斐林試劑，其他操作與標准曲線相同，在 590 nm 波長下讀取吸光度。以不含樣品的空白管的吸光度減去樣品管的吸光度，在標准曲線上查出糖含量。

『叄』 還原糖含量的測定有哪些方法,說出他們的優缺點

摘要 常用的還原糖測定方法有：直接滴定法、高錳酸鉀滴定法、比色法。直接滴定法測定的是一大類具有還原性的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖等，適用於所有食品中還原糖的快速測定。

『肆』 植物中還原糖的測定方法

總糖:

主要指具有還原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在測定條件下能水解為還原性的單糖的蔗糖(水解後為1分子葡萄糖和1分子果糖)，麥芽糖(水解後為2分子葡萄糖)以及可能部分水解的澱粉(水解後為2分子葡萄糖)。 還原糖:

在糖類中，分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都是還原糖。還原性糖包括所有單糖(除二羥丙酮)、乳糖、麥芽糖等。非還原性糖有蔗糖、澱粉、纖維素等，但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。 分光光度計:

分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分


析。常用的波長范圍為:(1)200,

400nm的紫外光區(2)400,760nm的

可見光區,(3)2.5,25μm(按波數計

為4000cm<-1>,400cm<-1>)的紅

外光區。所用儀器為紫外分光光度

計、可見光分光光度計(或比色計)、

紅外分光光度計或原子吸收分光光

度計。為保證測量的精密度和准確

度，所有儀器應按照國家計量檢定規

程或本附錄規定，定期進行校正檢

定。

分光光度計採用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光源透過測試的樣品後，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比。

糖含量的檢測方法:

『伍』 測還原糖的方法

直接滴定法
1.原理
樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，直接滴定已標定過的費林氏液，費林氏液被還原析出氧化亞銅後，過量的還原糖立即將次甲基藍還原，使藍色褪色。根據樣品消耗體積，計算還原糖量。
2.適用范圍
GB5009.7-85，本方法適用於所有食品中還原糖的檢測。檢出限0.1mg。
3.主要儀器
滴定管
4.試劑
除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。
（1） 費林甲液：稱取15 g硫酸銅（CuSO4·5H2O），及0.05 g次甲基藍，溶於水中並稀釋至1 L。
（2） 費林乙液：稱取50 g酒石酸鉀鈉與75 g氫氧化鈉，溶於水中，再加入4 g亞鐵氰化鉀，完全溶解後，用水稀釋至500 ml，貯存於橡膠塞玻璃瓶內。
（3） 乙酸鋅溶液：稱取21.9 g乙酸鋅，加3 ml冰乙酸，加水溶解並稀釋至100 ml。
（4）亞鐵氰化鉀溶液。稱取10.6g亞鐵氰化鉀，用水溶解並稀釋至100ml。
（5） 鹽酸。
（6） 葡萄糖標准溶液：精密稱取1.000 g經過80 ℃乾燥至恆量的葡萄糖（純度在99%以上），加水溶解後加入5 ml鹽酸，並以水稀釋至1 L。此溶液相當於1 mg/ml葡萄糖。（註：加鹽酸的目的是防腐，標准溶液也可用飽和苯甲酸溶液配製）
5.操作方法
5.1樣品處理：
5.1.1乳類、乳製品及含蛋白質的食品：稱取約0.5～2 g固體樣品（吸取2～10 ml液體樣品），置於100 ml容量瓶中，加50 ml水，搖勻。邊搖邊慢慢加入5 ml乙酸鋅溶液及5 ml亞鐵氫化鉀溶液，加水至刻度，混勻。靜置30 min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。（注意：乙酸鋅可去除蛋白質、鞣質、樹脂等，使它們形成沉澱，經過濾除去。如果鈣離子過多時，易與葡萄糖、果糖生成絡合物，使滴定速度緩慢；從而結果偏低，可向樣品中加入草酸粉，與鈣結合，形成沉澱並過濾。）
5.1.2酒精性飲料：吸取50 ml樣品，置於蒸發皿中，用1 mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積1/4後，移入100 ml容量瓶中。加25 ml水，混勻。以下按4.1.1自"加5 ml乙酸鋅溶液"起依法操作。
5.1.3含多量澱粉的食品：稱取2～5 g樣品，置於100 ml容量瓶中，加50 ml水，在45℃水浴中加熱1 h，並時時振搖（注意：此步驟是使還原糖溶於水中，切忌溫度過高，因為澱粉在高溫條件下可糊化、水解，影響檢測結果。）。冷後加水至刻度，混勻，靜置。吸取50 ml上清液於另一100 ml容量瓶中，以下按4.1.1自"5 ml乙酸鋅溶液"起依法操作。
5.1.4汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取50 ml樣品置於蒸發皿中，在水浴上除去二氧化碳後，移入100 ml容量瓶中，並用水洗滌蒸發皿，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻後，備用。
（注意：樣品中稀釋的還原糖最終濃度應接近於葡萄糖標准液的濃度。）
5. 2標定費林氏液溶液：吸取5.0 ml費林氏甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中（注意：甲液與乙液混合可生成氧化亞銅沉澱，應將甲液加入乙液，使開始生成的氧化亞銅沉澱重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9 ml葡萄糖標准溶液，控制在2 min內加熱至沸，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續滴加葡萄糖標准溶液，直至溶液蘭色剛好褪去並出現淡黃色為終點，記錄消耗的葡萄糖標准溶液總體積，平行操作三份，取其平均值，計算每10 ml（甲、乙液各5 ml）鹼性酒石酸銅溶液相當於葡萄糖的質量（mg）。（注意：還原的次甲基藍易被空氣中的氧氧化，恢復成原來的藍色，所以滴定過程中必須保持溶液成沸騰狀態，並且避免滴定時間過長。）
5.3樣品溶液預測：吸取5.0 ml費林氏甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min內加熱至沸，趁沸以先快後慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，並保持溶液沸騰狀態，待溶液顏色變淺時，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蘭色褪去，出現亮黃色為終點。如果樣品液顏色較深，滴定終點則為蘭色褪去出現明亮顏色（如亮紅），記錄消耗樣液的總體積。（注意：如果滴定液的顏色變淺後復又變深，說明滴定過量，需重新滴定。）
5.4樣品溶液測定：吸取5.0 ml鹼性酒石酸銅甲液及5.0 ml乙液，置於150 ml錐形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2 min內加熱至沸，快速從滴定管中滴加比預測體積少1 ml的樣品溶液，然後趁沸繼續以每兩秒1滴的速度滴定直至終點。記錄消耗樣液的總體積，同法平行操作兩至三份，得出平均消耗體積。
6.計算
X3 =（C×v1 × V）∕（m× v2 ×1000）×100
式中： X--樣品中還原糖的含量(以葡萄糖計)，%；
C--葡萄糖標准溶液的濃度，mg/ml；
v1-- 滴定10 ml費林氏溶液（甲、乙液各5 ml）消耗葡萄糖標准溶液的體積，ml；
v2--測定時平均消耗樣品溶液的體積，ml；
V--樣品定容體積，ml；
m--樣品質量，g；
7.注意事項
（1） 本方法測定的是一類具有還原性質的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖等，只是結果用葡萄糖或其他轉化糖的方式表示，所以不能誤解為還原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知樣品中只含有某一種糖，如乳製品中的乳糖，則可以認為還原糖=某糖。
（2）分別用葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖標准品配製標准溶液分別滴定等量已標定的費林氏液，所消耗標准溶液的體積有所不同。證明即便同是還原糖，在物化性質上仍有所差別，所以還原糖的結果只是反映樣品整體情況，並不完全等於各還原糖含量之和。如果已知樣品只含有某種還原糖，則應以該還原糖做標准品，結果為該還原糖的含量。如果樣品中還原糖的成分未知，或為多種還原糖的混合物，則以某種還原糖做標准品，結果以該還原糖計，但不代表該糖的真實含量。

『陸』 還原糖測定方法

糖果—還原糖的測定—直接滴定法
2 原理
樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，直接滴定標定過的鹼性酒石酸銅液，以次甲基藍作指示劑，根據樣品液消耗體積，計算還原糖量。
3 試劑
3.1 鹼性酒石酸銅甲液
稱取15g硫酸銅（CuSO4•5H2O）及0.05g次甲基藍，溶於水中並稀釋至1000mL。
3.2 鹼性酒石酸銅乙液
稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉，溶於水中，再加入4g亞鐵氰化鉀，完全溶解後，用水稀釋至1000mL，貯存於橡膠塞玻璃瓶內。
3.3 乙酸鋅溶液
稱取21.9g乙酸鋅，加3mL冰乙酸，加水溶解並稀釋至100mL。
3.4 亞鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）
稱取10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解並稀釋至100mL。
3.5 葡萄糖標准溶液（1mg/mL）
精密稱取1.000g經過98～100℃乾燥至恆量的純葡萄糖，加水溶解後加入5mL鹽酸，並以水稀釋至1000mL。此溶液每毫升相當於1mg葡萄糖。
3.6 鹽酸
4 儀器
4.1 實驗室常規儀器和設備
4.2 古氏坩堝或G4垂融坩堝
5 操作步驟
5.1 樣品處理
將樣品搗碎混勻待用，樣品應避免暴露在空氣和陽光下，並盡可能迅速地進行分析。
稱取約2.5～5g樣品，置於250mL容量瓶中，加50 mL水，搖勻後慢慢加入乙酸鋅溶液5mL及亞鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混勻。靜置30min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。
5.2 標定鹼性酒石酸銅溶液
吸取5.0mL鹼性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置於150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9mL葡萄糖標准溶液，控制在2min內加熱至沸，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續滴加葡萄糖標准溶液，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄消耗葡萄糖標准溶液的總體積，同時平行操作三份，取其平均值，計算每10mL（甲、乙液各5mL）鹼性酒石酸銅溶液相當於葡萄糖的質量（mg）。
5.3 樣品溶液預測
吸取5.0mL鹼性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置於150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min內加熱至沸，趁沸以先快後慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，並保持溶液沸騰狀態，待溶液顏色變淺時，以每兩秒1滴的速度滴定，直至溶液藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積。
5.4 樣品溶液測定 1
吸取5.0mL鹼性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置於150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加比預測體積少1mL的樣品溶液，使在2min內加熱至沸，趁沸繼續以每兩秒1滴的速度滴定，直至藍色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗體積。
6 結果計算
按下式計算糖果中還原糖的含量： 100100025021×××=VmmX
式中：X—樣品中還原糖的含量（以葡萄糖計），%；
m1—10mL鹼性酒石酸銅溶液（甲、乙液各5mL）相當於還原糖（以葡萄糖計）的質量，mg；
m2—樣品質量，g；
V—測定時平均消耗樣品溶液體積，mL。
7 精密度
同一樣品兩次平行測定值相對差不得超過15%。

『柒』 還原糖測定有幾個步驟

步驟：
第二步：向1號試管注入其中的一種待測液2ml,向2號試管注入另一種待測液2ml
第三步：分別向1、2號試管中各注入1ml斐林試劑（甲、乙兩液等量混合均勻後再注入）
第四步：將兩支試管放入盛有50-65.C溫水的大燒杯中加熱約2min
結果分析：
結果：在1、2號試管中出現磚紅色沉澱的那種溶液就是葡萄糖溶液,未出現磚紅色沉澱的則是蔗糖溶液

『捌』 還原糖的測定方法有哪幾種

總糖:主要指具有還原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在測定條件下能水解為還原性的單糖的蔗糖(水解後為1分子葡萄糖和1分子果糖)，麥芽糖(水解後為2分子葡萄糖)以及可能部分水解的澱粉(水解後為2分子葡萄糖)。 還原糖:在糖類中，分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都是還原糖。還原性糖包括所有單糖(除二羥丙酮)、乳糖、麥芽糖等。非還原性糖有蔗糖、澱粉、纖維素等，但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。 分光光度計:分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析。常用的波長范圍為:(1)200,400nm的紫外光區(2)400,760nm的可見光區,(3)2.5,25μm(按波數計為4000cm<-1>,400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和准確度，所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定，定期進行校正檢定。分光光度計採用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光源透過測試的樣品後，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比。糖含量的檢測方法