A. 如何測定肌紅蛋白結構
肌紅蛋白是目前人類研究最多的蛋白質之一。曾有報道發現當將馬心肌紅蛋白表面44位氨基酸從天冬氨酸突變為賴氨酸後,突變肌紅蛋白與細胞色素b5之間的電子轉移速率提高了一個數量級,但這一蛋白表面氨基酸對馬心肌紅蛋白結構穩定性及功能的影響未見報道。
為了進一步了解肌紅蛋白Mb表面44位天冬氨酸對肌紅蛋白結構和功能的影響,本論文以野生肌紅蛋白表達質粒pGYM為模板,設計特異突變引物,通過PCR定點突變的方法將肌紅蛋白(Mb)基因上的第44位酸性氨基酸天冬氨酸(D)的密碼子GAT變成鹼性氨基酸賴氨酸(K)的密碼子AAA,獲得肌紅蛋白突變體D44K的基因。將帶有突變體的目的基因克隆在肌紅蛋白表達質粒pGYM上,經熱激轉化大腸桿菌BL21,大腸桿菌發酵使突變蛋白D44K大量表達、收集菌體。酶法裂解細菌,依次用硫酸銨沉澱、離子交換柱層析、凝膠柱層析分離純化突變蛋白,其純度可達96﹪。用圓二色譜和紫外可見光譜分別研究野生型肌紅蛋白及突變體(D44K)的耐熱、耐酸及鹽酸胍誘導的變性過程,實驗結果表明:用鹼性氨基酸Lys取代酸性氨基酸Asp44殘基,增強了肌紅蛋白耐熱、耐酸變性能力,導致蛋白質的熱變性中點溫度Tm由71.9℃提高到75.1℃、酸變性中點(pH)1/2從3.95降到3.88,但在鹽酸胍溶液中,突變體易變性,其變性中點濃度Cm從1.88mM降為1.75mM。以愈創木酚為底物分別測定了不同條件下Mb(WT)和Mb(D44K)的過氧化物酶活性,實驗結果表明:以愈創木酚為底物時,Mb(D44K)的Km為1.9mM而Mb(WT)的Km為3.3mM。Mb(WT)和Mb(D44K)過氧化物酶的最適溫度均為50℃,在相同溫度下,Mb(D44K)的過氧化物酶活性高於Mb(WT),且其過氧化物酶的熱穩定性高於Mb(WT)。同時實驗結果表明:Mb(D44K)過氧化物酶的最適pH為5.0,且在寬的pH范圍內仍保持高過氧化物酶活性,而Mb(WT)過氧化物酶的最適pH5.5,在相同pH下,Mb(D44K)過氧化物酶對酸鹼的穩定性高於Mb(WT),且兩者在鹼性溶液中其酶活性受到抑制。
B. 肌紅蛋白是17.15正常嗎
肌紅蛋白是一種存在於骨骼肌和心肌中的含氧結合蛋白,當心肌和骨骼肌損傷時,血中的肌紅蛋白水平會升高。肌紅蛋白的正常值根據檢測方法的不同而有不同.,酶聯免疫吸附法是50-85ug/L,放射免疫測定法為6-85ug/L。肌紅蛋白可作為早期診斷急性心梗的指標,在心梗發病後,30分鍾-2小時即可升高,5-12小時達到高峰,18-30小時恢復正常。另外急性肌肉損傷,肌病,急性或慢性腎功能衰竭時,肌紅蛋白也可以升高。
C. 肌酸激酶同工酶/心肌肌鈣蛋白I/肌紅蛋白三合一檢測試劑盒的使用方法知道的告訴我
應該有說明書 仔細閱讀後使用
你說的不夠詳細 不能詳細說明使用方法
如果是試紙的話,可能分全血或血清型.取樣本加在加樣孔內,15分鍾讀書,兩條線是陽性,一條線是陰性.
D. 心肌損傷標志物檢驗的實驗方案
心肌損傷標志物是指心肌損傷時釋放到外周血中並被檢測到的蛋白質類和(或)酶類物質。通過對該類物質的檢測可為急性心肌梗死及其他伴有心肌損傷的疾病的臨床診斷、病情監測及危險分層等有提示作用。理想的心肌損傷標志物除具有高敏感性和高特異性外,還應具有以下特性:①主要或僅存在於心肌組織,在心肌中有較高的含量,可反應小范圍的損傷:②能檢測早期心肌損傷,且窗口期長;③能估計梗死范圍大小,判斷預後;④能評估溶栓效果。
心肌損傷標志物分類及測定
反應心肌缺血損傷的主要生物化學標志物包括心肌酶及心肌蛋白等,前者有血清天門冬氨酸轉氨酶、血清乳酸脫氫酶及其同工酶、血清肌酸激酶及其同工酶;後者有肌鈣蛋白、肌紅蛋白等。
1.血清天門冬氨酸轉氨酶
天門冬氨酸轉氨酶(AST)又稱穀草轉氨酶(GOT),廣泛分布於人體各組織。肝臟、骨骼肌、腎臟、心肌內含量豐富。紅細胞AST約為血清的10倍,輕度溶血會使測定結果升高。
(1)參考值:<40U/L(37℃),通常採用酶偶聯速率法。
(2)臨床意義:AST在急性心肌梗死發生後6~12小時升高,24~48小時達峰值,持續5天或1周,隨後降低。因為AST不具備組織特異性,故單純的AST升高不能診斷心肌損傷。
2.血清乳酸脫氫酶及其同工酶
乳酸脫氫酶(LD)是葡萄糖無氧酵解中調節丙酮酸轉化為乳酸的關鍵酶,廣泛存在於肝臟、心臟、骨骼肌、肺、脾臟、腦、紅細胞、血小板等組織細胞的胞質和線粒體中。LD是分子量135KD的四聚體,由M型和H型亞單位構成5種同工酶:H4(LD1)、MH3(LD2)、M2H2(LD3)、M3H(LD4)、M4(LD5)。
(1)參考值:①乳酸脫氫酶:丙酮酸為底物時,200~380U/L;乳酸為底物時,109~245U/L。②LD1為28.4%±5.3%,LD2為41.0%±5.0%,LD3為19.0%±4.0%,LD46.6%±3.5%,LD5為4.6%±3.0%。乳酸脫氫酶常用速率法檢測其總活性,而其同工酶常用電泳法測定。
(2)臨床意義:發生心肌損傷時,心肌細胞膜破裂,線粒體、胞質內物質外漏到細胞間液及外周血中。乳酸脫氫酶及其同工酶LD1在急性心肌梗死發作後8~12小時開始升高,48~72小時達高峰,7~12天恢復正常。連續測定乳酸脫氫酶,對於就診較遲,肌酸激酶已恢復正常的急性心肌梗死患者有一定的參考價值。
3.血清肌酸激酶
肌酸激酶(CK)是心肌中重要的能量調節酶,在ATP提供的能量下,催化肌酸生成磷酸肌酸和ADP,肌酸激酶主要分布在骨骼肌和心肌,其次為腦組織的細胞質和線粒體。
(1)參考值:酶偶聯法或連續監測法,男性38~174U/L,女性26~140U/L;肌酸顯色法,男性15~163U/L,女性3~135U/L。
(2)臨床意義:①診斷急性心肌梗死:肌酸激酶於急性心肌梗死發病後3~8小時即明顯升高,10~36小時達高峰,3~4日恢復正常。如肌酸激酶小於參考值上限可排除急性心肌梗死,但也應除外心肌小范圍損傷及心內膜下梗死等情況。②病毒性心肌炎時,肌酸激酶明顯升高。③多發性肌炎和各種原因引起的骨骼肌損傷、各種插管術和術後、肌內注射氯丙嗪等,肌酸激酶均可升高。
4.肌酸激酶同工酶
CK是一種二聚體,由M和B兩個亞基組成,有三種同工酶,CK-BB(分布在腦),CK-MB(分布在心肌),CK-MM(分布在骨骼肌)。
(1)參考值:瓊脂糖凝膠電泳法,CK-MM 94%~96%,CK-MB<5%,CK-BB極少。
(2)臨床意義:①診斷急性心肌梗死:CK-MB於急性心肌梗死發病2小時後增高,9~30小時達高峰,2~3日恢復正常。CK-MB對急性心肌梗死診斷的敏感性及特異性均優於肌酸激酶。急性心肌梗死發病後CK-MB持續處於高水平,說明心肌梗死在繼續;若下降後又升高,提示原梗死部位在擴展或又有新的梗死出現。②心絞痛、心包炎、慢性心房顫動、心臟手術、冠狀動脈造影也有CK-MB的升高。③肌營養不良、多發性肌炎、肌萎縮、擠壓綜合征、肌內注射等,CK-MB也可輕微升高。
5.心肌肌鈣蛋白
心肌肌鈣蛋白存在於心肌細胞的細肌絲上,僅3%~6%存在於肌細胞胞質中。鈣蛋白是由3個亞單位,即肌鈣蛋白C、肌鈣蛋白I及肌鈣蛋白T組成的復合物。其中,血清心肌肌鈣蛋白T和心肌肌鈣蛋白I是心肌損傷的特異性標志物,它們出現早,最早可在症狀發作後2小時出現。
(1)參考值:採用酶聯免疫吸附法,心肌肌鈣蛋白T正常范圍是0.02~0.13μg/L,>0.2μg/L為臨界值,>0.5μg/L可診斷急性心肌梗死;心肌肌鈣蛋白I正常范圍是L,>1.5μg/L為臨界值。
(2)臨床意義:①診斷急性心肌梗死:心肌肌鈣蛋白是診斷急性心肌梗死的首選標志物。心肌肌鈣蛋白T於急性心肌梗死發病後3~6小時開始升高,10~24小時達高峰,10~15日恢復正常;心肌肌鈣蛋白I於急性心肌梗死發病後3~6小時開始升高,14~20小時達高峰,5~7日恢復正常。②心肌肌鈣蛋白T和心肌肌鈣蛋白I可敏感地反映出小灶性、可逆性心肌損傷的存在。③可用於溶栓後再灌注的判斷。
6.肌紅蛋白
肌紅蛋白存在於心肌和骨骼肌中,健康人血中含量極低。由於肌紅蛋白相對分子量小,且存在於胞質內,故在肌肉損傷時出現較早。
(1)參考值:採用酶聯免疫吸附法,50~85μg/L;放射免疫分析法,6~85μg/L。
(2)臨床意義:①診斷急性心肌梗死:肌紅蛋白於急性心肌梗死發病後0.5~2小時即可升高,5~12小時達高峰,18~30個小時恢復正常。②其他:肌肉損傷、休克及腎衰竭時肌紅蛋白也增高。
E. 血清肌紅蛋白多少錢,血清肌紅蛋白正常值
肌紅蛋白(Mb)是一種氧結合血紅素蛋白,主要分布於心肌和骨骼肌組織。在急性心肌損傷時,Mb最先被釋放入血液中,在症狀出現約2-3小時後,血中Mb可超出正常上限,9-12小時達到峰值,24-36小時後恢復正常。肌紅蛋白靈敏度高但特異性低,臨床上需結合其他心肌標志物聯合檢測,結合肌鈣蛋白I、肌酸激酶同工酶等檢測指標,更好地避免了肌紅蛋白單項檢測造成的漏診和誤診。
血清肌紅蛋白正常值:
(1)ELISA法:3.5~22.8ng/ml;(2)RIA法:健康成人血清29±16.3μg/L。
F. 肌紅蛋白和血紅蛋白的結構和功能異同點
肌紅蛋白:是由一條肽鏈和一個血紅素輔基組成的結合蛋白,是肌肉內儲存氧的蛋白質,它的氧飽和曲線為雙曲線型。肌肉中運載氧的蛋白質,由153個氨基酸殘基組成,分子量約為16700,含有血紅素,和血紅蛋白同源,與氧的結合能力介於血紅蛋白和細胞色素氧化酶之間,可幫助肌細胞將氧轉運到線粒體。
血紅蛋白:是高等生物體內負責運載氧的一種蛋白質,是使血液呈紅色的蛋白。血紅蛋白由574個氨基酸構成,分子量約為67000,由四條鏈組成,兩條α鏈和兩條β鏈,每一條鏈有一個包含一個鐵原子的環狀血紅素。氧氣結合在鐵原子上,被血液運輸。
他們最大的區別就是肌紅蛋白位於肌細胞中,而血紅蛋白則存在於血液中的紅細胞中。
G. 醫檢myo是什麼意思
肌紅蛋白檢查。
肌紅蛋白是一種小分子蛋白質,其分子結果與血紅蛋白相似,具有在肌細胞內轉運和貯存氧的功能。人體心肌、骨骼肌內含有大量肌紅蛋白,正常人的血液中很少,主要由腎臟代謝並排泄。當心肌或橫紋肌有損傷時,肌紅蛋白便釋放入血中,血清中的肌紅蛋白即可明顯升高。
(7)肌紅蛋白檢測方法擴展閱讀
肌鈣蛋白i檢測Mb在AMI中的判斷應用
1、由於Mb的分子量小,可以很快從破損的細胞中釋放出來,在AMI發病後1~3小時血中濃度迅速上升,6~7小時達峰值,12小時內幾乎所有AMI患者Mb都有升高,升高幅度大於各心肌酶,因此可以作為AMI的早期診斷標志物。
2、由於Mb半壽期短(15min),胸痛發作後6~12小時不升高,有助於排除AMI的診斷,是篩查AMI很好的指標。
3、由於在AMI後血中Mb很快從,發病18~30小時內可完全恢復到正常水平。故Mb測定有助於在AMI病程中觀察有無再梗塞或者梗塞再擴展。Mb頻繁出現增高,提示原有心肌梗死仍在。
4、Mb是溶栓療中判斷有無再灌的較敏感而准確的指標。
H. 血紅蛋白和肌紅蛋白有什麼區別
肌紅蛋白(Myoglobin,Myo)是一種大量存在於橫紋肌( 骨骼肌以及心肌)細胞中的血紅素蛋白。
肌紅蛋白與氧可逆式結合並加快氧向線粒體的運輸。它在有氧細胞代謝中起重要作用。
心肌細胞受損時( 比如,急性心肌梗死),像肌紅蛋白這樣的蛋白質將會由於細胞膜的破裂而被釋放到血管系統。於是,在血液中能檢測到肌紅蛋白以及其他心臟標志物。
測定血清肌紅蛋白肌紅蛋白可作為急性心肌梗死(AMI) 診斷的早期最靈敏的指標。