水中細菌檢測方法

『壹』 怎樣檢測自來水中大腸桿菌數和細菌總菌數

平板計數法：採用常規塗布平板法，37℃24h後計數。培養基為營養瓊指和伊紅美蘭瓊脂。
多管發酵法：採用五管法，培養劑為液體EC培養基。
細菌總數：採用AODC法，
具體操作按徐懷恕方法進行。
活菌直接計數：採用Kogure等方法：向水樣加入0.002%萘啶酮酸（Sigma
公司）和0.025%酵母膏，在37℃下培養6-24h，加入甲醛（最終濃度為2%）固定，再按AODC法鏡檢計數。
再可以看看下面這篇文章
水中細菌總數與大腸桿菌檢測方法的比較研究

『貳』 如何檢測水中的細菌

如果水中細菌密度較小，就該應用無菌技術將待測水樣通過專門過濾細菌的濾紙，這樣細菌就都留在濾紙上了，再將濾紙鋪到倒好平板的培養基中培養，長出菌落後數菌落數，數量除以過濾水的體積，就得出單位水樣里的細菌數

『叄』 細菌總數的檢驗方法是什麼

細菌總數是水質參數之一，指單位體積水中的細菌總量。其檢驗方法是:在玻璃平皿內,接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中，冷卻凝固後在37°C培養24小時，培養基上的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度，也有把培養時間定為48小時的。

『肆』 自來水的微生物檢測方法是什麼樣的

自來水的微生物檢測方法是：
每周進行水樣微生物檢測時，先打開水龍頭放水2~3分鍾——出水口用75%酒精噴灑——防水5分鍾以上——用滅菌容器取樣（滅菌前加入0.1ml的2%的硫代硫酸鈉）。
加入硫酸鈉的目的是：中和水中的余氯，中和後利於細菌的生長繁殖，以便觀察．

『伍』 細菌總數怎麼檢測

細菌總數檢測目前國標規定的方法為平板計數法，其檢驗方法是：

在玻璃平皿內，接種一毫升水樣或稀釋水樣於加熱液化的營養瓊脂培養基中，冷卻凝固後在37°C培養24小時，培養基上的菌落數或乘以水樣的稀釋倍數即為細菌總數。

有的國家把培養溫度定為35°C或其他溫度，也有把培養時間定為48小時的。這種方法精度高，但耗時長，難以滿足實際工作需要。

為了簡化檢測程序、縮短檢測時間，國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究，提出了阻抗檢測法、Simplate TM全平器計數法、微菌落技術、紙片法等檢測方法，取得了一定的成果，但檢測時間仍在4 h以上。

本研究在分析了已有研究成果的基礎上，提出了在濾膜上染色後，直接計數的細菌總數檢測方法，具體步驟為：

用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數→按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異，檢測時間約1 h，是一種快速的細菌總數檢測方法。

(5)水中細菌檢測方法擴展閱讀：

水中通常存在的細菌大致可分為三類：

1、天然水中存在的細菌。普通的是熒光假單孢桿菌、綠膿桿菌，一般認為這類細菌對健康人體是非致病的。

2、土壤細菌。當洪水時期或大雨後地表水中較多。它們在水中生存的時間不長，在水處理過程中容易被去除。腐蝕水管的鐵細菌和硫細菌也屬此類。

3、腸道細菌。它們生存在溫血動物的腸道中，故糞便中大量存在。水體中發現這類細菌，可以認為已受到糞便的污染。致病性腸道細菌有沙門氏桿菌（傷寒和副傷寒菌）、B型炭疽菌、痢疾志賀氏菌和霍亂弧菌等。

『陸』 水中細菌總量的測量方法

• 基本原理

  應用平板菌落計數技術測定水中細菌總數。由於水中細菌種類繁多，它們對營養和其他生長條件的要求差別很大，不可能找到一種培養基在一種條件下，使水中所有的細菌均能生長繁殖，因此，以一定的培養基平板上生長出來的菌落，計算出來的水中細菌總數僅是一種近似值。目前一般是採用普通肉膏蛋白腖瓊脂培養基。

• 操作步驟

  
  

1．水樣的採取

(1)自來水先將自來水龍頭用火焰燒灼3min滅菌，再開放水龍頭使水流5min後，以滅菌三角燒瓶接取水樣，以待分析。
(2)池水、河水或湖水應取距水面l0～15cm的深層水樣，先將滅菌的帶玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然後翻轉過來，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛滿後，將瓶塞蓋好，再從水中取出，最好立即檢查，否則需放入冰箱中保存。

2．細菌總數測定

(1)自來水
①用滅菌吸管吸取lml水樣，注入滅菌培養皿中。共做兩個平皿。
②分別傾注約15mL己溶化並冷卻到45℃左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基，並立即在桌上作平面旋搖，使水樣與培養基充分混勻。
③另取一空的滅菌培養皿，傾注肉膏蛋白腖瓊脂培養基15mL作空自對照。
④培養基凝固後，倒置於37℃溫箱中，培養24h，進行菌落計數。
⑤兩個平板的平均菌落數即為lml水樣的細菌總數。
(2)池水、河水或湖水等
①稀釋水樣取3個滅菌空試管，分別加入9ml滅菌水。取lml水樣注入第一管9ml滅菌水內、搖勻，再自第一管取1ml至下一管滅菌水內，如此稀釋到第三管，稀釋度分別為10-1、10-2與10-3。稀釋倍數看水樣污濁程度而定，以培養後平板的菌落數在30～300個之間的稀釋度最為合適，若三個稀釋度的菌數均多到無法計數或少到無法計數，則需繼續稀釋或減小稀釋倍數。
一般中等污穢水樣，取10-1、10-2、10-3三個連續稀釋度，污穢嚴重的取10-2、10-3、10-4三個連續稀釋度。
②自最後三個稀釋度的試管中各取lmL稀釋水加入空的滅菌培養皿中，每一稀釋度做兩個培養皿。
③各傾注15ml已溶化並冷卻至45℃左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基，立即放在桌上搖勻。
④凝固後倒置於37℃培養箱中培養24h。

3．菌落計數方法

(1)先計算相同稀釋度的平均菌落數。若其中一個平板有較大片狀菌苔生長時，則不應採用，而應以無片狀菌苔生長的平板作為該稀釋度的平均菌落數。若片狀菌苔的大小不到平板的一半，而其餘的一半菌落分布又很均勻時，則可將此一半的菌落數乘2以代表全平板的菌落數，然後再計算該稀釋度的平均菌落數。
(2)首先選擇平均菌落數在30~300之間的，當只有一個稀釋度的平均菌落數符合此范圍時，則以該平均菌落數乘其稀釋倍數即為該水樣的細菌總數。
(3)若有兩個稀釋度的平均菌落數均在30～300之間，則按兩者菌落總數之比值來決定。若其比值小於2，應採取兩者的平均數；若大於2，則取其中較小的菌落總數。
(4)若所有稀釋度的平均菌落數均大於300，則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數。
(5)若所有稀釋度的平均菌落數均小於30，則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數。
(6)若所有稀釋度的平均菌落數均不在30～300之間，則以最近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數。

『柒』 測定水中微生物（包括細菌真菌等）數量的方法

器材及培養

材料和試劑
蒸餾水,自來水,取自兒童公園的湖水,牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基.
儀器或其他用具
滅菌三角燒瓶,滅菌帶玻璃塞瓶,滅菌培養皿,滅菌吸管,滅菌量筒.
研究方法
採用平板菌落記數技術測定水中細菌總數.

水樣的採取
自來水
先將自來水水龍頭用火焰灼燒3min滅菌,再開放水龍頭5min後,以滅菌三角燒瓶接取水樣,以待分析.
公園的湖水
應取距水面10~15cm的深層水樣,先將滅菌的帶玻璃塞瓶,瓶口向下浸入水中,然後翻過來,除去玻璃
塞,水即流入瓶中,盛滿後,將瓶塞蓋好,再從水中取出,最好立即檢查,否則需放入冰箱中保存.
細菌總數的測定

• 自來水
  Step1用滅菌吸管吸取1mL水樣,注入滅菌培養皿中.共做兩個平皿.
  Step2分別傾注約15mL已溶化並冷卻到45e左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基.並立即在桌上做平面
  旋搖,使水樣與培養基充分混勻.
  Step3另取一個空的滅菌培養皿,傾注肉膏蛋白腖瓊脂培養基15mL,作對照.
  Step4培養基凝固後,倒置與37e溫箱中,培養24h,進行菌落記數.

• 公園的湖水
  Step1稀釋水樣,取三個滅菌空試管,分別加入9mL滅菌水.取1mL水樣注入第一管9mL滅菌水
  內,搖勻,再自第一管取1mL到下一管滅菌水內,如此稀釋到第三管,稀釋度分別為10-1,10-2,10-3.
  Step2自最後三個稀釋度的試管中各取1mL稀釋水加入空的滅菌培養皿,每一稀釋度共做兩個培養皿.
  Step3各傾注15mL已溶化並冷卻到45e左右的肉膏蛋白腖瓊脂培養基並立即在桌上搖勻.
  Step4凝固後倒置於37e恆溫恆濕培養箱中培養24h.

菌落記數方法
1)計算相同稀釋度的平均菌落數.若有大片菌苔生長時,棄用;以無片菌苔生長的培養皿記數.若片狀菌
苔大小不到培養皿的一半,其餘一半分布均勻,將此一半計數@2.
2)選擇平均菌落數在30~300之間的平板.只有一個符合此范圍時,以該平均菌落數@稀釋倍數.有兩
個在30~300之間時,按兩者菌落總數比值決定,比值小於2,取平均;比值大於2,取較小的菌落數.
3)若所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數@稀釋倍數.
4)若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則按稀釋度的平均數@倍數.
5)若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,則以最近30或300的平均菌落數@稀釋倍數.

微生物的含量能否反應水的營養化程度？

能

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