致病菌檢測時溢出的消毒方法

① 如何檢測一個滅菌方法對致病菌的效果

把滅菌後的培養基按滅菌鍋內的不同位置，每處抽取數管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養一周左右進行檢查。如果培養基沒有什麼變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應提高壓力或延長滅菌時間。經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌後，以後按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。
經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌後,以後按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

② 化妝品致病菌檢測怎麼做

中科院中科檢測是化妝品備案檢測機構，化妝品致病菌檢測常見的有：耐熱大腸桿菌，銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌

耐熱大腸桿菌檢測方法:

1.取 10mL 1：10 稀釋的檢液，加到 10mL 雙倍乳糖膽鹽（含中和劑）培養基中，置 44.5℃

±0.5℃培養箱中培養 24h，如既不產酸也不產氣，繼續培養至 48h，如仍既不產酸也不產

氣，則報告為耐熱大腸菌群陰性。

2. 如產酸產氣，劃線接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置36℃±1℃培養18h—24h。同時取該

培養液 1—2 滴接種到蛋白腖水中，置 44.5℃±0.5℃培養 24h±2h。

經培養後，在上述平板上觀察有無典型菌落生長。耐熱大腸菌群在伊紅美藍瓊脂培養

基上的典型菌落呈深紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤。也有的

呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紫色，中心較深的菌落，亦常為耐熱大腸菌群，應

注意挑選。

3. 挑取上述可疑菌落，塗片作革蘭氏染色鏡檢。

4. 在蛋白腖水培養液中，加入靛基質試劑約 0.5mL，觀察靛基質反應。陽性者液面呈玫

瑰紅色；陰性反應液面呈試劑本色。

銅綠假單胞菌檢測方法：

1.增菌培養：取 1:10 樣品稀釋液 10mL 加到 90mL SCDLP 液體培養基中，置 36℃±1℃培

養 18h—24h。如有銅綠假單胞菌生長，培養液表面多有一層薄菌膜，培養液常呈黃綠色或

藍綠色。

2. 分離培養：從培養液的薄膜處挑取培養物，劃線接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板

上，置 36℃±1℃培養 18h—24h。凡銅綠假單胞菌在此培養基上，其菌落扁平無定型，向周

邊擴散或略有蔓延，表面濕潤，菌落呈灰白色，菌落周圍培養基常擴散有水溶性色素。

在缺乏十六烷三甲基溴化銨瓊脂時也可用乙醯胺培養基進行分離，將菌液劃線接種於

平板上，置 36℃±1℃培養 24h±2h，銅綠假單胞菌在此培養基上生長良好，菌落扁平，邊緣

不整，菌落周圍培養基呈紅色，其他菌不生長。

3. 染色鏡檢：挑取可疑的菌落，塗片，革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性者應進行氧化酶

試驗。

4. 氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片置於滅菌平皿內，用無菌玻璃棒挑取銅綠假

單胞菌可疑菌落塗在濾紙片上，然後在其上滴加一滴新配製的 1%二甲基對苯二胺試液，在

15s—30s 之內，出現粉紅色或紫紅色時，為氧化酶試驗陽性；若培養物不變色，為氧化酶

試驗陰性。

5.綠膿菌素試驗：取可疑菌落 2 個—3 個，分別接種在綠膿菌素測定培養基上，置 36℃

±1℃培養 24h±2h，加入氯仿 3mL—5mL，充分振盪使培養物中的綠膿菌素溶解於氯仿液

內，待氯仿提取液呈藍色時，用吸管將氯仿移到另一試管中並加入 1mol/L 的鹽酸 1mL 左

右，振盪後，靜置片刻。如上層鹽酸液內出現粉紅色到紫紅色時為陽性，表示被檢物中有

綠膿菌素存在。

6 .硝酸鹽還原產氣試驗：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養物，接種在硝酸鹽腖水培養基

中，置 36℃±1℃培養 24h±2h，觀察結果。凡在硝酸鹽腖水培養基內的小倒管中有氣體者，

即為陽性，表明該菌能還原硝酸鹽，並將亞硝酸鹽分解產生氮氣。

7. 明膠液化試驗：取銅綠假單胞菌可疑菌落的純培養物，穿刺接種在明膠培養基內，置

36℃±1℃培養 24h±2h，取出放置於 4℃±2℃冰箱 10min—30min，如仍呈溶解狀或表面溶解

時即為明膠液化試驗陽性；如凝固不溶者為陰性。

8. 42℃生長試驗：挑取可疑的銅綠假單胞菌純培養物，接種在普通瓊脂斜面培養基上，

置於 42℃±1℃培養箱中，培養 24h—48h，銅綠假單胞菌能生長，為陽性，而近似的熒光假

單胞菌則不能生長。

金黃色葡萄球菌檢測方法：

1 增菌：取 1:10 稀釋的樣品 10mL 接種到 90mL SCDLP 液體培養基中，置 36℃±1℃培養

箱，培養 24h±2h。

註：如無此培養基也可用 7.5%氯化鈉肉湯。

2. 分離：自上述增菌培養液中，取 1—2 接種環，劃線接種在 Baird Parker 平板培養基，

如無此培養基也可劃線接種到血瓊脂平板，置 36℃±1℃培養 48h。在血瓊脂平板上菌落呈

金黃色，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。在 Baird Parker 平板培養基上為圓形，

光滑，凸起，濕潤，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透

明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無

混濁帶及透明帶。挑取單個菌落分純在血瓊脂平板上，置 36℃±1℃培養 24h±2h。

3. 染色鏡檢：挑取分純菌落，塗片，進行革蘭氏染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏

陽性菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，直徑約為 0.5mm —1mm。

4. 甘露醇發酵試驗：取上述分純菌落接種到甘露醇發酵培養基中，在培養基液面上加入

高度為 2mm—3mm 的滅菌液體石蠟，置 36℃±1℃培養 24h±2h，金黃色葡萄球菌應能發酵

甘露醇產酸。

5. 血漿凝固酶試驗：吸取1:4新鮮血漿0.5mL，置於滅菌小試管中，加入待檢菌24h±2h肉

湯培養物0.5mL。混勻，置36℃±1℃恆溫箱或恆溫水浴中，每半小時觀察一次，6h之內如呈

現凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養物及肉湯培養基各

0.5mL，分別加入無菌1:4血漿0.5mL，混勻，作為對照。

③ 常用的消毒滅菌方法有哪些

常用的消毒滅菌方法如下：

1、煮沸滅菌：是濕熱滅菌法范圍，就是將洗凈的物品（如毛巾、衣服、床單、用具等）放入水中直接煮沸30min或60min，可將細菌全部殺死，但不能保證殺滅所有的芽孢。

2、紫外線滅菌：一般用於滅菌的紫外線波長是2000～3000Å，滅菌力最強的是波長為2540Å的紫外線。主要用於消毒器具表面的滅菌以及凈化室內空氣。器具表面滅菌一般要經肥皂水洗凈後再經清水洗凈後擦乾後在紫外線下滅菌，包好備用。

3、75%乙醇滅菌：本法是化學滅菌法之一，可用75%酒精溶液用於剪刀、手術刀、針具以及皮膚表面和物品表面等的消毒。物品表面消毒前需要了解酒精是否恢復消毒物品產生損壞。

4、氯維液體噴劑滅菌：氯維液體噴劑滅菌屬於化學滅菌法。可用於器具、皮膚傷口表面、物品表面、空間等等情況的消毒。

消毒效果的檢查方法

1、物品表面檢查

在消毒物品相鄰部位劃出2個10cm2范圍，消毒前後別以無菌棉簽采樣，接種後培養24～48小時觀察結果。

2、排泄物檢查

消毒前後各取0.2ml排泄物的稀釋液接種肉湯管，37℃培養24小時後再取樣轉種相應的培養基，24～48小時後觀察結果。

3、空氣消毒效果檢查

一般用自然沉降法。消毒前後在消毒的空間不同平面和位置。放置4～5個平面，暴露5～30分鍾後蓋好，培育24～48小時觀察結果。

以上內容參考網路-消毒

④ 消毒測試方法

目前檢測多仍採用一些條件致病菌為間接指標。腸道傳染病以大腸桿菌為指標，呼吸道傳染病以溶血性鏈球菌為指標。肝炎病毒近年表面抗原，DNA聚合酶以及電鏡觀察，甲肝病毒分離等為指標。醫|學教育網搜集整理如消毒前後均未檢出大腸桿菌或溶血性鏈球菌，則可以消毒後自然菌總數率低的百分率評價，消毒後自然菌總數下降80%以上為效果良好，降低70%為較好。減少60%以上為一般，減少60%以下為不合格。
具體檢查方法：
1.物品表面檢查
在消毒物品相鄰部位劃出2個10cm2范圍，消毒前後別以無菌棉簽采樣，接種後培養24～48小時觀察結果。
2.排泄物檢查
消毒前後各取0.2ml排泄物的稀釋液接種肉湯管，醫學教|育網搜集整理37℃培養24小時後再取樣轉種相應的培養基，24～48小時後觀察結果。
3.空氣消毒效果檢查
一般用自然沉降法。消毒前後在消毒的空間不同平面和位置。放置4～5個平面，暴露5～30分鍾後蓋好，培育24～48小時觀察結果。

⑤ 常用的消毒方法

對動物體外環境中的病源微生物及其他有害微生物進行消除我殺滅，使其數量減少到無害的程度，稱為消毒；將所有微生物徹底消滅，稱為滅菌。消毒方法有物理的、化學的、生物的三類，具體進行時應根據病原體的種類和被消毒物品的性質加以選擇。
物理消毒
煮沸消毒 它是一種經濟、簡便的消毒方法，適用於金屬器材、木質器具、玻璃器皿以及布類等的消毒，一般從水沸騰開始計算時間，煮沸15分鍾。如在水中加0.5%-1%的鹼或肥皂，可使物品上的污物溶解，提高沸點，增強殺菌效果。
蒸汽消毒 蒸汽潛熱大，穿透力強，使物品受熱快，消毒效果好。
日光消毒 眾多病原微生物對日光非常敏感，因而日光消毒是最經濟的消毒方法。
焚燒和噴燈火焰消毒 這是最徹底的消毒方法。焚燒適用於金屬用具、墊草、病鴿
屍體等的消毒；噴燈火焰適用於經葯物消毒後的鴿舍四周牆壁和水泥地的再消毒。
機械消毒 包括打掃、洗刷、通風等，這不是直接消毒，而是把附著在鴿舍、用具和地面上的病原體清除掉，再對被清除的污物進行堆積發酵或葯物消毒，與其他消毒方法結合應用，更可提高消毒效果。
化學消毒法
該法是利用化學制劑，按不同消毒要求配製一定比例的溶液，用氣霧、噴灑、沖洗、浸泡、擦拭的方式，對有關鴿舍、場地、環境、用具及車輛、孵化器（室）、種蛋等進行消毒，以殺滅病原體的方法.
生物消毒法

這種方法是把污染的墊草、污物、屍體，通過挖坑深埋壓實密封的方法，利用糞污中的有機物，在微生物的作用下，堆積發酵分解產熱，在一定時期內分別達到殺滅致病細菌和蟲卵的目的。
鴿舍消毒前應徹底打掃，如清掃鴿舍，洗刷籠子、飼槽、水槽，將墊草、污物垃圾、剩料和糞便等清理干凈，否則，雖經消毒，也會使許多消毒葯物的殺菌作用大大降低。而且鴿舍清掃消毒是消除污染的重要環節。清掃衛生一定要徹底、全面，角角落落上上下下都得清掃到。要充分認識到，哪怕牆壁上沾有一點糞，就可能成為今後發生傳染病的根源，這並非小題大做。因為上述問題看起來不是什麼消毒葯物，也不是消毒方法，而實實在在是搞好消毒工作的基礎，是絕對不可忽視的一環，否則很有可能形成消毒無用，前功盡棄，疫病還是無法杜絕。
消毒的效果還取決於消毒劑的濃度、溫度、作用時間。對消毒葯液的用量也不可忽視，一般對地面的每平方米應有0.5-2升；對牆壁和天花板的每平方米應有0.5-1升葯液。鴿場的出入口要建一個與門同寬、長1.5米的消毒槽（池）。消毒槽內鋪墊草（草包），浸以有效消毒液，並要有人負責定期更換，強制人員或車輛進行出入消毒，而且堅決執行，反對徒於形式或在門口撒些石灰粉了事的錯誤做法。

⑥ 食品中致病菌的檢測方法

痢疾桿菌其致病作用主要是侵襲力和毒素。病菌黏附於腸粘膜的上皮細胞內，繼而生長繁殖並引起炎症，在內毒素的作用下使腸壁組織壞死，腸功能紊亂，以致出現毒血症。有些痢疾桿菌能產生腸毒素，導致腸炎。
致病性大腸桿菌的污染源是帶菌動物（牛、羊、豬、雞等）和病人及隱形帶菌者。主要通過攝入污染該菌的動物性食品導致發病，或者嚴重污染飲水和其他食品污染及食物鏈的交叉污染也可導致發病。
傷寒和副傷寒病人和健康帶菌者是沙門氏菌的傳染源。病菌隨糞尿排出體外，通過污染的食物、飲水、手、食具或經蠅、蟑螂等媒介污染食物，經口感染。食物或水源污染可導致暴發流行。
霍亂弧菌的傳染源是病人或健康帶菌者，隱性感染者和症狀較輕的患者呈間歇排菌，危害性比重症患者更大。病菌隨糞便及嘔吐物排出，污染飲用水、食物和環境，並通過水、手、污染的食物、食具、蠅、蟑螂等媒介而經口感染。感染人體後，能吸附於腸粘膜表面，並大量繁殖，其內毒素損害腸粘膜，外毒素引起腸液分泌過度增加，發生腹瀉，大量丟失腸液，產生嚴重脫水、酸中毒及電解質紊亂。
炭疽桿菌其致病原因是炭疽桿菌產生的毒素（致死毒素和水腫毒素），人的皮膚傷口通過直接接觸病畜的血液、分泌物、排泄物以及被污染的皮、毛、骨粉等，可引起皮膚炭疽；經口攝入病畜肉類以及被細菌污染的食物和水等，可引起腸型炭疽；吸入帶有炭疽芽孢的塵埃，可引起肺炭疽。

⑦ 什麼叫消毒常用的消毒方法有哪些

消毒是指通過化學、物理學或生物學原理和方法殺滅環境或物體表面或內部病原體的過程。

在各種類型的雞場（舍）最常用的消毒方法主要是：

（1）噴灑。用配製成液體或粉末狀化學性消毒劑均勻地噴灑在消毒物體表面，通過直接與病原體接觸，起到殺滅作用。常用的噴灑消毒劑是新潔爾滅、來蘇兒等。應用噴灑法的優點是不受條件、時間等限制，應用較廣；其缺點是只有消毒劑直接與病原體接觸才能起殺滅作用，所以消毒劑未噴灑到的病原體仍然存活。所以這種方法只適用於器具和雞舍地面、牆壁的消毒。

（2）浸泡。將需消毒的物品浸泡於液體消毒劑中，經一定時間後撈出。其消毒原理同噴灑法。該法適用於外形復雜但體積不大的物品，比如種蛋、器皿等。

（3）熏蒸。利用有些消毒劑（甲醛等）易揮發的特性，在一定空間內放置一定量的消毒劑，揮發後在空氣中達到相應濃度，起到殺滅病原體的作用。熏蒸方法是通過氣體擴散，不需特殊設備，簡單易行，而且不受器具或雞舍結構復雜的限制，用處較廣，而且沒有殘留。但是，其缺點是空間必須是封閉的，並需維持一定的時間，否則達不到應有效果。適用於雞舍、孵化室（箱）的消毒。

（4）加熱或煮沸。高溫能使微生物蛋白質變性，喪失原有的生物學活性，達到殺滅作用。絕大多數病原菌在65℃經30分鍾或煮沸（100℃）即被殺滅。該法簡單可靠，無不利作用（對人畜無毒性），適用於對雞舍的部分設施或器具、工作服等的消毒甚至滅菌。

（5）紫外線或日光。紫外線和日光對病原體也具有殺滅作用。紫外線需要安裝紫外燈，如大規模消毒價格昂貴，不易實行。但是日光消毒不需投入，比較可行，比如墊草等經日曬後可達到較好的消毒效果。

⑧ 如何處理實驗操作中發生感染性或潛在感染性因子暴露

危險因素
2.1術前危險因素

2.1.1患者因素 局部因素：急性結膜炎、瞼緣炎、嚴重倒睫、眼瞼部小感染灶、淚道阻塞、淚囊炎、戴接觸鏡、另1眼眶內義眼、II期人工晶狀體植入，內眼手術容易將結膜囊內菌落帶入眼內，引起術後感染；全身因素：糖尿病患者，全身使用免疫抑制劑、糖皮質激素，接受透析、化療時機體免疫力下降，容易發生感染。

2.1.2醫護人員的因素 因眼內炎發生率極低，部分醫護人員不夠重視，患者術前准備時間短，不嚴格操作規程，醫護、患者、家屬被污染的手或器械，極有可能污染眼部及周圍組織，所以必須嚴格無菌操作制度和措施，做好患者及家屬的衛生宣教工作。同時應熟知內眼手術的禁忌症，嚴格術前把關。

2.2術中危險因素 (1)手術間或器械污染:消毒不嚴格的手術間、灌注管道、粘彈劑、超聲乳化手柄、灌注抽吸手柄、進入眼內的手術器械或人工晶狀體等往往引起大范圍的爆發性眼內炎。Kenchappa[11]和Zaluski等[12]在白內障術後爆發的綠膿桿菌眼內炎患者的灌注液、超聲乳化儀器的管道、粘彈劑、超聲乳化手柄內能培養出相同的菌株，表明灌注液污染、操作不規范、一次性用品反復使用及手術器械消毒不嚴格均有可能引起毒力較強的致病菌感染。所以有人建議所有器械在進入眼內之前都需要用BSS（平衡鹽溶液）沖洗以降低手術源性感染機會[12]。(2)術野的消毒:消毒范圍從睫毛根部開始，繞瞼裂由內向外擴散，上至眉弓以上額部，下至鼻尖、上唇，內側超過鼻中線，外側至耳前發際處，重復2～3次。大部分術後感染性眼內炎培養結果顯示感染菌株與眼瞼、睫毛根部或結膜囊內的菌株相符[13]，充分體現術野消毒的重要性。(3)手術方式:傳統白內障囊外摘除術(extracapsular cataract extraction,ECCE)與超聲乳化白內障手術相比，ECCE中細菌更易進入前房，這是因為在ECCE過程中前房變淺甚至塌陷的情況時有發生，前房壓力驟降，細菌容易進入。而超聲乳化手術中，前房穩定，有灌注液不停循環進出，細菌不易進入。通過細菌培養的方式發現ECCE前房污染的比例佔28.2%，而超聲乳化是7.6%[14]。但是超聲乳化手術依賴於灌注抽吸管道完成，管道消毒不嚴格所導致的感染往往是很嚴重的。(4)切口方式:切口質量與發生術後感染有至關重要的關系。切口過大會延遲切口癒合增加眼內感染發生的機會，縫合關閉切口使這種可能性降低[15,16]。上方切口較顳側主切口感染率低。Colleaux等[17]發現透明角膜切口和鞏膜隧道切口的眼內炎發病率並無差異。(5)手術時間:手術操作時間愈長，感染幾率愈大。若超過60min則被認為是眼內病菌污染的危險因素。很多研究都支持一個觀點:術中後囊破損需進行玻璃體切除或已有後囊缺損者，術後眼內炎發生幾率增加5～10倍[18,19]。正常情況下白內障術中進入前房的毒力較低或/和數量較少的細菌在正常前房環境中易被清除。而後囊膜破損細菌進入玻璃體腔，由於玻璃體無血管，代謝產物清除緩慢，是細菌及其他微生物的良好培養基，一旦感染，病原體易於在此繁殖[20]。(6)人工晶狀體的植入:Assia等[21]發現人工晶狀體手術中，晶狀體只是接觸眼表面，它的表面污染率即達到28%；動物實驗證實[22]：植入人工晶狀體組眼內炎發生率較單獨白內障囊外摘除組發生率顯著增高，且人工晶狀體組較未植入組眼內炎重，持續時間長。而且不同材料的人工晶狀體對病原菌的粘附性不同，一般硅凝膠型較丙烯酸酯型或PMMA型風險大，這與致病菌及人工晶狀體生物學特性相關。

2.3術後危險因素 切口癒合不良或切口技術掌握不當時可增加感染機會；切口裂開或滲漏，特別是切口中有玻璃體嵌頓。有資料顯示白內障術後眼內炎患者中發現22%切口癒合不良。在拆除球壁切口或傷口縫線時，暴露於外表的線結可將致病菌帶入眼內引起眼內炎。

⑨ 常用的消毒方法有哪幾種

常用的消毒方法有三種，即物理消毒法、化學消毒法、生物消毒法。

（1）物理消毒法

指用物理因素殺滅病原微生物及其他有害微生物的方法。包括自然凈化、機械除菌、高熱滅菌和太陽光照射等。

（2）化學消毒法

指用化學葯品進行的消毒方法。

（3）生物消毒法

指用微生物發酵所產之熱達到消滅病原微生物的方法。