检测硝基还原酶都有哪些方法

⑴ 植物NiR（亚硝酸还原酶）酶活性测定，急急急！！！不胜感激！

可采用“微量扩散比色法测定植物体内硝酸还原酶与亚硝酸还原酶的活性”方法来测定，原理为：植物体内硝酸还原酶(NR) 和亚硝酸还原酶(NiR)活性的测定一般是根据底物的减少来衡量的。本方法则是根据酶促反应的最终产物(氨)的释放来衡量的,能较真实地反映酶活性的大小。测定时,可通过外源基质的选择来衡量硝酸还原酶或亚硝酸还原酶的活性。

⑵ 氧化还原酶酶活测定方法

氧化还原酶能催化两分子间发生氧化还原作用的酶的总称。其中氧化酶（oxidase;oxydase）能催化物质被氧气所氧化的作用，脱氢酶（dehydrogenase）能催化从物质分子脱去氢的作用。氧化还原酶对于电子供体和受体的一方或两方都有特异性,并根据其特异性而进行分类。
这是一大类的统称,没有统一的测活方法.你首先要确定你的酶的电子供体受体是什么.

⑶ 有谁知道测植物硝酸还原酶活性时用到的NADH是什么啊

还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸也叫还原型辅酶Ⅰ

⑷ 硝酸还原酶活性测定中，活体法和离体法有什么优点

硝酸还原酶活性的测定方法主要有离体法和活体法,又分别称为离体法和活体法。离体法操作手续繁杂、要求条件较高;体内法简便、快速,采用渐多。活体法存在NRA 测定值偏低、重复性不够理想的缺点,因而需要针对不同的测定材料,对活体法做进一步的探讨,确定最佳的测定条件。
NR的测定可分为活体法和离体法。
活体法步骤简单，适合快速、多组测定。
离体法操作复杂，但重复性较好。

NR测定原理：
硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸（或对–氨基苯磺酰胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。

⑸ 酶活力的常用测定方法

常用的测定方法有取样法和连续法。

1、取样法

在酶反应开始后不同的时间，从反应系统中取出一定量的反应液，并用适当方法停止其反应，再根据产物和底物在化学性质上的差别进行分析，求得单位时间内酶促反应的变化量。

2、连续法

基于底物和产物在物理化学性质上的不同，在反应过程中对反应系统添加酶的变性剂以终止反应，常用的连续测定法是光吸收测定法，即根据产物和底物在某一波长或波段上有明显的特征吸收差别而建立起来的连续观测方法，几乎所有的氧化还原酶都可用此法测定。

此外如荧光法、旋光法、电化学法也是常用的连续测定方法。对不易直接测定的反应，可使用酶偶联分析法，即用过量、专一的“偶联工具酶”，使被测反应继续进行到某一可直接测定的阶段。近年来，酶活性的测定工作正向两个方向发展，超微量酶活的灵敏测定，实现测定过程的自动化控制。

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酶活力的大小可以用在一定条件下，它所催化的某一化学反应的转化速率来表示，即酶催化的转化速率越快，酶的活力就越高；反之，速率越慢，酶的活力就越低。所以，测定酶的活力就是测定酶促转化速率。酶转化速率可以用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。

酶活力的测定既可以通过定量测定酶反应的产物或底物数量随反应时间的变化，也可以通过定量测定酶反应底物中某一性质的变化，如黏度变化来测定。通常是在酶的最适PH 值和离子强度以及指定的温度下测定酶活力。

⑹ 测定硝酸还原酶的材料为什么要提前一天施用一定量的硝态氮肥，并且取样应在晴天进行

硝态氮肥即硝酸盐，硝酸还原酶是诱导酶，硝酸盐诱导硝酸还原酶的合成，为实验提供足量的酶。晴天植物进行光合作用，积累足够的NADH和碳水化合物（能量）提供反应。

硝酸还原酶位于细胞质内或细胞膜外，在硝酸盐还原途径中是限速因子，通过 NADH和 NADPH 其中之一或两者（双功能）提供两个电子催化反应，使硝酸盐转换成亚硝酸盐。

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研究植物硝酸还原酶和亚硝酸还原酶活性的意义

植物通过硝酸盐同化途径以硝酸盐和氨的形式吸收氮元素。硝酸盐的同化是一个受到严格控制的过程，其中两个先后参加反应的酶——硝酸还原酶（NR)）和亚硝酸还原酶（NiR）对初级氮的同化起主要调控。

在高等植物中，NR和NiR基因的转录及转录后加工受到各种内在和外在因素的影响，翻译后调控是消除亚硝酸盐积累的重要机制。随着分子生物学技术的发展，可以更容易地通过突变体和转基因方式来研究NR和NiR基因的调控。

⑺ 还原酶活性测定方法

实验方法
预先将丙酮酸钠溶液及NADH溶液放在25℃水浴中预热。
取2支石英比色杯，在2支比色杯中加入0.1mol/L pH7.5磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液3ml，置于紫外分光光度计中，在340nm处将光吸收调节至零；另一支比色杯用于测定LDH活力依次加入丙酮酸钠溶液2.9ml、NADH溶液0.1ml，加盖摇匀后，测定340nm光吸收比值。
取出比色杯，加入稀释后的酶溶液10μl，立即即时，摇匀后，每隔0.5分钟测A340，连续测定3分钟。
以A对时间作图，取反应最初线性部分，计算没分钟A340减少值。
注意事项
实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即用，则应储存在-20℃冰箱。
酶液的稀释度及加入量应控制每分钟A340下降值在0.1~0.2之间，以减少实验误差。
NADH溶液应在临用前配制。

⑻ 硝酸还原酶的辅基有哪些

生物界以NADH或NADPH为辅酶硝酸还原酶有三个类别，其中高等植物子叶中则以()硝酸还原酸酶为主，在绿藻、酵母中存在着()硝酸还原酶或()硝酸还原酶。

⑼ 硝酸还原酶活性测定中，活体法和离体法有什么优缺点

硝酸还原酶活性的测定方法主要有离体法和活体法,又分别称为离体法和活体法。离体法操作手续繁杂、要求条件较高;体内法简便、快速,采用渐多。活体法存在NRA 测定值偏低、重复性不够理想的缺点,因而需要针对不同的测定材料,对活体法做进一步的探讨,确定最佳的测定条件。

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⑽ 测定硝酸还原酶材料为什么要提前一天施用一定量的硝态氮肥并且取样应在晴天进行

硝酸还原酶是诱导酶，光照是其诱导条件之一，所以应在光合作用进行了一段时间以后（3h）采样，田间采样应在早晨9点钟以后。