检测丙二醛最常见的方法

⑴ TBA是什么意思

硫代巴比妥酸(TBA)法：TBA法的原理是脂质过氧化的降解产物之一一丙二醛(MDA)，可以与硫代巴比妥酸成色。是肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸，包括胆酸、鹅脱氧胆酸及相应结合型胆汁酸。

TBA法是一非常简便的方法，一般实验室均可进行。此法与荧光法、化学发光法等有较好的相关性，但不足之处是灵敏度较差，某些因素应加以控制，如线粒体污染，样品中的铁离子等。

(1)检测丙二醛最常见的方法扩展阅读：

硫代巴比妥酸(TBA)法在520nm处进行比色测定，可检测丙二醛相对含量的变化，以了解生物膜质过氧化的情况。 TBA法是一非常简便的方法，一般实验室均可进行。

此法与荧光法、化学发光法等有较好的相关性，但不足之处是灵敏度较差，某些因素应加以控制，如线粒体污染，样品中的铁离子等。

⑵ 丙二醛的提取及含量测定的方法

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丙二醛(MDA)含量的测定
① 测定步骤
称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。
② 计算
(3-6)
式中：C—MDA的浓度， ；
A450，A532 和A600—分别代表450、532和600nm波长下的吸光度值。

⑶ 丙二醛用TBA检测为什么要测600nm的值

600nm一般用于排除非特异性吸收，如样本自身的浊度或者颜色所导致吸光值上升，最终要减去

丙二醛在酸性和高温条件，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二酮)，在532nm处有最大光吸收，在600nm处有最小光吸收，该复合物的吸光系数为155[mmol/( L.cm )] ，可按公式：A532－A600=155000×C×L算出MDA浓度C(μmol/L)，进一步算出单位重量鲜组织中 MDA 含量(μmol/g)。式中，A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。L为比色杯厚度(cm )。

需要指出的是，植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰，经试验，可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。

C(μmol/L)=6.45(A532－A600)-0.56A450

式中： A450、A532和A600分别表示450nm、532nm 和600nm处的吸光度值。算出植物样品提取液中MDA的浓度后，可进一步算出其在植物组织中的含量。

⑷ 丙二醛的测量方法

一：原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的三甲川（3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮），其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显着增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug/g，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0.5umol/L。
二：试剂
1：质量分数为10%三氯乙酸（TCA）；
2：质量分数0.6%硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠（1mol·L-1）溶解，再用10%的三氯乙酸定容；
三：方法
1：MDA的提取 称取剪碎的试材1g，加入2mll0%TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r/min离心10min，上清液为样品提取液。
2：显色反应和测定 吸取离心的上清液2ml（对照加2ml蒸馏水），加入2ml0.6%TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。
四：结果
C1=11.71D450
C2={6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1
C1——可溶性糖的浓度（mmol/L）
C2——MDA的浓度（·umol/L）
D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。
N：提取液总体积（ml）
W：植物组织鲜重