气相液相检测方法

① 气相色谱仪和液相色谱仪的异同点

气相色谱仪与液相色谱仪的区别主要体现在分离、应用的范围以及仪器的构造上不同。

一、分离原理：

1.气相：气相色谱是一种物理的分离方法。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。

2.液相：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9′107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

二、应用范围：

1.气相：气相色谱法具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。

2.液相：高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400以上）的有机物（些物质几乎占有机物总数的75%～80%）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。

三、仪器构造：

1.气相：由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。

1.1柱箱：色谱柱是气相色谱仪的心脏，样品中的各个组份在色谱柱中经过反复多次分配后得到分离，从而达到分析的目的，柱箱的作用就是安装色谱柱。由于色谱柱的两端分别连接进样器和检测器，因此进样器和检测器的下端（接头）均插入柱箱。柱箱能够安装各种填充柱和毛细管柱，并且操作方便。色谱柱（样品）需要在一定的温度条件下工作，因此采用微机对柱箱进行温度控制。并且由于设计合理，柱箱内的梯度很小。对于一些成份复杂、沸程较宽的样品，柱箱还可进行三阶程序升温控制。且程序设定后自动运行无需人工干预，降温时还能自动后开门排热。

1.2进样器：进样器的作用是将样品送入色谱柱。如果是液体样品，进样器还必须将其汽化，因此采用微机对进样器进行温度控制。根据不同种类的色谱柱及不同的进样方式，共有五种进样器可供选择：1.填充柱进样器2.毛细管不分流进样器附件3.毛细管分流进样器附件4.毛细管分流/不分流进样器5.六通阀气体进样器。

1.3检测器:检测器的作用是将样品的化学信号转化为物理信号（电信号）。检测器也需要在一定的温度条件下才能正常工作，因此采用微机对检测器进行温度控制。根据各种样品的化学物理特性，共有五种检测器可供选择：1.氢火焰离子化检测器(FID)2.热导检测器(TCD)

2.电子捕获检测器(ECD)4.氮磷检测器(NPD)5.火焰光度检测器(FPD)

2.1.数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

2.2.液相：高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。

2.3.进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。

2.4.输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X107Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。

2.5分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）。固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与气相色谱中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。

2.6检测系统高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。

（1）紫外检测器该检测器适用于对紫外光（或可见光）有吸收性能样品的检测。其特点：使用面广（如蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）；灵敏度高（检测下限为10-10g／ml）；线性范围宽；对温度和流速变化不敏感；可检测梯度溶液洗脱的样品。

（2）示差折光检测器凡具有与流动相折光率不同的样品组分，均可使用示差折光检测器检测。，糖类化合物的检测使用此检测系统。这一系统通用性强、操作简单，但灵敏度低（检测下限为10-7g／ml），流动相的变化会引起折光率的变化，因此，它既不适用于痕量分析，也不适用于梯度洗脱样品的检测。

（3）荧光检测器凡具有荧光的物质，在一定条件下，其发射光的荧光强度与物质的浓度成正比。因此，这一检测器只适用于具有荧光的有机化合物（如多环芳烃、氨基酸、胺类、维生素和某些蛋白质等）的测定，其灵敏度很高（检测下限为10-12～10-14g／ml），痕量分析和梯度洗脱作品的检测均可采用。

2.7数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

② 气相色谱与液相谱分析方法有何不同

相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测
主要差别：
（1）操作条件差别
（2）进样方式差别
（3）检测器差别
（4）流动相差别
（5）分析对象差别
详细：
（1）操作条件差别 GC：加温操作 HPLC：通常室温操作，高压泵操作
（2）进样方式差别 GC：样品需加热气化或裂解 HPLC：样品制成溶液即可
（3）检测器差别 GC：通用型检测器 TCD，MSD
选择性检测器 FID，ECD，FPD，NPD
HPLC：通用型检测器 RID，ELSD， MSD
选择性检测器 UVD，PDAD，FD，ECD
4）流动相差别
GC：流动相为惰性气体，组分与流动相无亲合力
HPLC：流动相为液体，流动相与组分间具亲合力， 这为提高柱选择性、改善分离增加了因素 ， 且流动相种类较多，选择余地广； 流动相极性和pH值选择对分离起重要作用， 选不同比例两种以上液体作为流动相可以 增大选择性。
（5）分析对象差别
GC：
分析低分子量、低沸点有机化合物和永久性气体；
配合程序升温分析高沸点有机化合物；
配合裂解技术分析高聚物；
不能检测挥发性差、热稳定性差和离子型样品；
占有机物的20% 。
HPLC：
既可分析低分子量、低沸点有机化合物；
也可分析中、高分子量和高沸点有机化合物；
对于热不稳定、难挥发、有生物活性及离子型化合物 均可检测；
占有机物的80% 。

③ 液相气相色谱的操作步骤

气相色谱操作规程及注意事项：
1.气相色谱仪简单操作流程
1.1 反时针方向开启载气钢瓶阀门，减压阀上高压压力表指示出高压钢瓶内贮气压力。
1.2.顺时针方向旋转减压调节螺杆，使低压压力表指示到要求的压力数。
1.3开启主机电源总开关，主机的触摸式荧光屏显示仪器正在自检，柱室内鼓风马达运转。
1.4打开与气相色谱仪连接的电脑，并运行气相色谱仪工作软件，待软件与仪器连接成功后，即可进行实验。
1.5在气相色谱仪工作软件里分别设定载气流量、检测器温度、进样口的温度，柱箱的初始温度及升温程序等。设定完后，各区温度开始朝设定值上升，当温度达到设定值时，READY灯亮。
1.6查看仪器基线是否平稳，待基线平直后，即可进样测试。
1.7实验完毕后，先关闭检测器电源，再停止加热，待色谱柱、进样口的温度降至80℃以下时，依次关闭色谱仪电源开关，计算机电源，最后关闭载气减压阀及总阀。
1.8登记仪器使用情况，做好实验室的整理和清洁工作，并检查好安全后，方可离开
2 测试条件的设定：
色谱条件的设定要根据不同化合物的不同性质选择柱子，一般情况极性化合物选择极性柱。非极性化合物选择非极性柱。色谱柱柱温的确定主要由样品的复杂程度决定。对于混合物一般采用程序升温法。柱温的设定要同时兼顾高低沸点或溶点化合物.可根据不同的化合物任意改动，其目的要达到在最短的时间里，使每个化合物的组份完全分离。
3 注意事项：
3.1操作过程中，一定要先通载气再加热，以防损坏检测器。
3.2在使用微量进样器取样时要注意不可将进样器的针芯完全拔出，以防坏进样器。
3.3检测器温度不能低于进样口温度，否则会污染检测器 进样口温度应高于柱温的最高值，同时化合物在此温度下不分解
3.4含酸、碱、盐、水、金属离子的化合物不能分析,要经过处理方可进行。
3.5进样器所取样品要避免带有气泡以保证进样重现性。
3.6取样前用溶剂反复洗针，再用要分析的样品至少洗2-5次
液相色谱操作规程及注意事项：
一、打开电脑
二、打开主机、预热
三、进入仪器工作站，联机并设定仪器使用方法及仪器参数
四、启动泵的动力系统预处理（排气等）
五、检查是否漏夜、柱压是否正常
六、设置仪器方法，包括仪器的使用条件等
七、激活操作方法，等待仪器平衡、基线平直
八、仪器出现“Ready”后可进行样品分析
九、操作测试结束后，清理所有实验材料，做好清洁卫生
十、记录仪器使用日志，并与管理员办理交接手续
注意事项
一、高效液相色谱的流动相应采用色谱纯溶剂，以满足仪器要求、避免损坏色谱柱；
二、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱，避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内；
三、流动相需经过滤、除气后方可使用；
四、待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤，以避免堵塞、损坏色谱柱；
五、分析完成后，须注意及时清洗色谱柱和检测器的比色池。
以具体仪器的举例：

岛津LC-10AD型高效液相色谱仪操作规程

1．目的

规范岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。

2．范围

适用于岛津LC-10AD型高效液相色谱仪的使用。

3．职责

质检员对本规程的实施负责。

4．规程

4.1 系统组成

本系统由1个LC-10ADvp溶剂输送泵、FCV-10AL低压梯度混合器、在线脱气机、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。

4.2 准备

4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。

4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。

4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.3 开机

接通电源，依次打开FCV-10AL低压梯度混合器、脱气机、LC-10ADVP输液泵、AT-130柱温箱，SPD-10Avp紫外检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。

4.4 参数设定

4.4.1 波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需波长值，按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。

4.4.2 流速设定：在输送泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1ml/min），按[Enter]键确认。按[CE]键退出。

4.4.3 流动相比例设定：在输送泵显示初始屏幕时，按[conc]键，用数字键输入流动相B的浓度百分数，用数字键输入流动相C的浓度百分数，用数字键输入流动相D的浓度百分数，按[Enter]键确认。按[CE]键退出。

4.5 更换流动相并排气泡

4.5.1将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；

4.5.2 逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀；

4.5.3 按输送泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以5.0ml/min的流速冲洗，3min后停止；

4.5.4 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。

4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。

4.5.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值

4.6 平衡系统

4.6.1 按《N2000色谱数据工作站操作规程》打开“在线色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下“数据收集”页的[查看基线] 按钮。

4.6.2洗脱方式

4.6.2.1 按泵的[pump]键， pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。

4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。

4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.5.6操作。

4.6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。

4.7 进样

4.7.1 进样前按检测器[zero]键调零，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点，再按一下 [查看基线] 按钮使其弹起。

4.7.2 用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。

简单故障排除
障常发生于泵和紫外检测器。

一、泵的故障及排除方法

1、泵压力变化较大或没有流动相流出，又无压力指示

（1）原因是泵内有大量气体。可打开排放阀，使泵在较大流量下运转，将气泡排尽；也可以用一个50ml
针筒在泵出口处帮助抽出气体。

（2）原因是高压密封环变形，产生漏液。必须更换密封环；平时注意不要超出规定的最高压力。

2、泵流量或压力不稳

（1）原因是砂滤棒内有气泡或被盐的微晶粒或溢生的微生物部分堵塞。可卸下砂滤棒浸入10%硝酸内超
声除去微生物或盐溶解，或浸入流动相内超声除气泡。再用蒸馏水立即清洗。

（2）原因是系统内有气泡。可加大流量排出气泡。

（3）原因是单向阀有异物。可卸下单向阀，放入烧杯中，加10%稀硝酸，用超声波清洗20分钟后，再用
干净蒸馏水清洗。

3、泵压力过高

原因是管路被堵塞，需要卸下管道清除和清洗；压力过低的原因是管路滴漏，可扳紧各接口和更换损坏
的管道。

4、键开关按下，泵不运行，只有嗡嗡电流声

此故障原因是电机缺相，电机线圈被烧坏一组或活塞被生锈卡住，应视情况给予排除。

二、SPD-10A紫外检测器的故障及排除方法

1、系统内有气泡

（1）如果气泡连续不断地通过流动池，将使噪声增大。必须对流动相进行充分除气。

检查系统各条导管是否漏气。如果导管损坏，必须更换并固紧各接口，加大系统流量驱除气泡。有条件
的药厂可配备一部脱气机。

（2）如果气泡流在检测器的流动池内，也可使噪音增大。

用手指压紧流动池出口，使池内增压，再快速放出流动相。反复操作数次，但注意不要使压力增加太大
，以免流动池破裂或色谱柱冲坏。

2、流动相被污染

当流动池被污染时，可能产生噪音或基线漂移。可用水或甲醇等溶剂冲洗检测池（要注意溶剂的互溶性
）。如果污染严重，就需要依次使用1mol/L硝酸、水和新鲜溶剂冲洗，或取出池体清洗，更换窗口。

3、光源灯出现故障

当氘灯使用到极限或者不能正常工作时，可能产生严重噪音，基线漂移，出现平头峰或齿形等异常峰，
甚至基线不能回零。这时必须更换氘灯（一般氘灯寿命1000～2000小时）。

4、倒峰

（1）倒峰的出现，可能是检测器的极性接反。更正后即可将其转复为正峰。

（2）如果流动相中含有紫外吸收的杂质时，无吸收的组分就会产生倒峰。对此，改为高纯度的溶剂为流
动相。

（3）在死时间附近的尖锐峰，往往是由进样时的压力变化或者由于样品溶剂与流动相不同所引起的

④ 测色谱时如何选用气相还是液相色谱法

液相：高效液相色谱法，对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于 400 以上）的有机物（ 些物质几乎占有机物总数的 75% ～ 80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。

气相：沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。

据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。

⑤ 气相法液相法固相法优缺点

气相法液相法固相法优点：分离效率高，分析速度快，样品用量少和检测灵敏度高。选择性好，可分离、分析恒沸混合物，沸点相近的物质，某些同位素，顺式与反式异构体邻、间、对位异构体，旋光异构体等。

气相法液相法固相法缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。

检测器

气相色谱法中可以使用的检测器有很多种，最常用的有火焰电离检测器（FID）与热导检测器（TCD）。这两种检测器都对很多种分析成分有灵敏的响应，同时可以测定一个很大的范围内的浓度。TCD从本质上来说是通用性的，可以用于检测除了载气之外的任何物质（只要它们的热导性能在检测器检测的温度下与载气不同），而FID则主要对烃类响应灵敏。

以上内容参考：网络-气相色谱法

⑥ 气相和液相色谱定量分析的方法有哪些

内标法，外标法，标准加入法，面积归一化法，面积校正归一化法

⑦ 气相色谱法和液相色谱法的相同点和不同点

相同点：
它们都是色谱法,也就是利用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果.简单一点说,它们的原理都是一样的.
不同点：
它们检测的物质不同.
气相色谱法,顾名思义主要是检测气体.当然还有很多沸点比较低的液体.然而液相色谱法则是检查溶液状态的样品,比如液体或者配制成溶液的固体.尤其是液相色谱需要检查有紫外吸收的物质.
流动相不同：
其实所谓的液相色谱和气相色谱主要的名称来源就是他们的流动相.液相色谱的流动相是液体,而气相色谱的流动相是载气.

⑧ 什么是气相 液相

色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。
色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分为气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。
气相色谱仪:样品由载气带入，通过对欲检测混合物中组分有不同保留性能的色谱柱，使各组分分离，依次导入检测器，以得到各组分的检测信号.
根据液相色谱原理，对物质进行分离。
原理和分类
液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同，液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。

⑨ 什么是气相 液相

气相属于分配层析或吸附层析，仅适用于分析分离挥发性和低挥发性物质。固定相是在惰性支持物（如磨细的耐火砖）上覆盖一层高沸点液体，如硅油、高沸点石蜡和油脂、环氧类聚合物。

液相：均匀的溶液也是一个相，称为液相。液相是物质呈现液体的状态，且在这个系统里只有液体，没有固相（即固体），也没有气体（即气相：通常任何气体均能无限混合，所以系统内无论含有多少种气体都是一个相，称为气相）。

(9)气相液相检测方法扩展阅读：

气相与液相的区别：

气相柱子多，流动相种类少；液相流动相种类多，柱子少。

气相主要分析低沸点化合物，液相分析高沸点化合物。

一般来说，气相检测破坏样品，液相检测很少破坏样品。

样品在气相中不纯在二次分配，样品在液相中分别在流动相，固定相中存在二次分配。

参考资料来源：

网络-气相

网络-液相