梅毒抗体检测原理方法

1. 梅毒如何检查

1.暗视野显微镜检查
一期、二期梅毒和早期先天性梅毒应采用暗视野显微镜检查皮损分泌物中的苍白密螺旋体，阳性者应见到有规律螺旋运动的病原体。暗视野检查简便、快捷而准确。一处皮损只有连续3次检查后仍未发现梅毒螺旋体才能判为阴性。暗视野显微镜检查法不适合用于口腔黏膜的损害，因为显微镜下见到的梅毒螺旋体无法与口腔中非致病的螺旋体区别。应注意检查前皮损部位不能外用抗生素，或使用含抗生素的生理盐水作为检查的载液。标本中已死亡的梅毒螺旋体可用直接或间接免疫荧光染色或免疫过氧化物酶染色法鉴别。
2.血清试验
根据所用的抗原不同分为两类。
(1)非梅毒螺旋体抗原血清试验(类脂质血清反应)：用正常牛心肌的心磷脂(cardiolipin)为抗原，与梅毒患者血清中抗心磷脂抗体(即反应素)结合，结合后发现凝集，生成絮状物为阳性反应。用于梅毒诊断、疗效观察和对复发或再感染的监测。方法有：①性病实验室试验(Venereal
Disease
Research
Laboratory
test，又称VDRL试验)：该试验是1946年美国性病研究实验室创建的，故以该实验室命名。试验在玻片上进行，可以定性或半定量，低倍显微镜观察结果。②快速血浆反应素(rapid
plasma
reagin，RPR)试验：为VDRL试验的改良法，可使用血浆。原理是用未经处理的活性炭颗粒(直径3～5μm)吸附VDRL抗原。此颗粒若与待检血清中的反应素结合，便形成黑色凝集块，肉眼即可识别，不需低倍镜观察。试验在专用纸卡的反应圈(内径18
mm)内进行。此试验敏感性高，具一定特异性，而且经济、方便、快速，适合大规模筛选且能定性或半定量。(2)梅毒螺旋体抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其他成分作为抗原检查抗梅毒螺旋体抗体。这种方法敏感性及特异性都高，用于证实试验，尤其适用晚期梅毒，但血和脑脊液行RPR试验均为阴性者。由于这类方法检测的是抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者已经经过充分的治疗，IgG抗体仍保持阳性，所以不能用以观察疗效、复发及再感染。

2. 梅毒Trust试验的原理

用正常牛心肌的心类脂（Cardiolipin 二磷酸酰甘油衍生物）作为抗原，而不是用螺旋体作为抗原，来测定病人血清中的反应素（非特异性抗体---抗心磷脂抗体）。用来初步筛查梅毒螺旋体感染。 反应素在初期梅毒病灶出现后1~2周就可测出，在二期梅毒滴度最高，三期梅毒较低。所用抗原不具有特异性，除梅毒病人外，一些非梅毒疾患也可暂时或长期地存在反应素。例如麻风、结核、传染性单核细胞增多症、红斑狼疮、类风湿性关节炎、雅司、回归热、以及一些发热性疾病。此外，在孕妇、老年人和吸毒者有生物学假阳性反应

3. 梅毒用什么方法检测

一般初筛是检查RPR或TRUST，确证是检查TPPA或TPHA。最好这两种实验都查一下，双阴可以排除梅毒，双阳性可以诊断为梅毒，其他TPPA阴性，TRUST阳性是假阳性；TPPA阳性，TRUST阴性是既往感染过梅毒或TPPA假阳性。

4. RPR 检测原理

RPR---不加热梅毒螺旋体反应素实验
原理：用正常牛心肌的心脂质作为抗原，测定病人血中的梅毒螺旋体的反应素（抗脂质抗体）。
是凝集反应。

5. 什么是梅毒螺旋体特异抗体测试

TPHA法检测梅毒螺旋体抗体

一、概述：
梅毒螺旋体存在于病人的血液或脑脊液内，在特殊厌氧环境里可体外人工培养。当病人感染梅毒螺旋体后3-4周，可在血液中检出针对梅毒螺旋体特异性抗体，并在治疗后相当长时间内仍然可检出。在病人血清中可检出二种抗体，一种是针对非螺旋体抗原的抗体（即针对牛心肌磷脂的抗体，如RPR及国内一些EIA和金标法均是检测此非特异性抗体），这种抗体在疾病活动期可检出，但在治疗后或疾病转入慢性期后会很快下降，而另一种是针对螺旋体抗原的特异性抗体,治疗后仍可在相当长的时间内检出，在疾病的慢性期也保持高滴度反应。OMEGA TPHA 试验是一种检测针对螺旋体抗原的抗体的特异的、灵敏的被动的血凝试验。OMEGA TPHA 试剂盒的质量标准已经中国药品生物制品检定所核定。
二、试验原理：
试验血球为用梅毒螺旋体特异性抗原包被经过醛化和鞣化的鸡红细胞，对照血球为没用上述抗原包被的经过醛化和鞣化的鸡红细胞，如果是阳性标本，当和致敏的鸡红细胞混合后，抗体和抗原的结合会引起致敏血球的凝集，在血凝板底部形成凝集块，如为阴性标本，则血细胞在孔底形成致密的沉淀。
三、试剂盒组成： 试验细胞悬液 8.5ml 阳性对照血清 2 ml 稀释液 2 0ml
对照细胞悬液 8.5ml 阴性对照血清 2 ml 细胞滴管 2 支
以上所有试剂均为工作浓度。试剂盒中的阴阳对照血清已经1：20稀释，可直接实验不必再稀释。阳性对照的效价为1：2560左右。
细胞滴管的滴量为每滴75ul，其中红色滴管用于致敏血细胞，白色滴管用于对照血细胞。
待检标本：应用血清标本，脑脊液标本。血清标本可贮于—20℃保存，但保存不应超过4至6星期。标本不应有溶血或含有脂肪。标本要防止混入唾液，否则会影响结果的正确性。
四、操作方法：
1.在反应板的第一排：每孔加25u（1滴）稀释液
在反应板的第二排：每孔加100ul（4滴）稀释液
在反应板的第三排和第四排：每孔加25ul（1滴）稀释液
2.取标本25ul，加在第一排的孔中。
3.对样品进行以下稀释：用25 ul移液器将加样后的第一排孔中的液体混匀后取出25 ul加入第二排的孔中，混匀后再取25 ul加入第三排的孔中，混匀后，从第三排孔中吸出25 ul丢弃，另从第二排孔中取25 ul加入第四排孔中，混匀后，再从第四排孔中吸25ul丢弃。
4.在第四排孔中加75 ul（1滴）试验细胞悬液，在第三排孔中加75 ul（1滴）对照细胞悬液。轻轻摇晃反应板后加盖静置45—60分钟后判读结果。
五、结果判断：
1.目测：凡出现细胞凝集为阳性反应，不出现凝集者阴性反应。
—/不凝集：细胞沉积在板孔中央呈边缘光滑的纽扣状；
±/可凝：细胞沉积在板孔中央呈边缘光滑的环状；
+/凝集：细胞形成多边形成或不规则环状沉积。
2+—4+/强凝集：细胞形成边缘粗糙不规则形状或薄膜状覆盖到板孔底。
2.加入对照血细胞的反应孔不应出现凝集，如果出现凝集，说明存在抗血细胞抗体，应重复试验。重复试验时，应经1000rpm离心5分种，取上清液用稀释液按1：5稀释，再进行试验，如果加入试验细胞悬液仍出现凝集，可判为阳性结果。
3.仪器测定：可应用奥林帕斯的PK7200或改进后的雷勃MK3酶标仪。
六、储存4—8℃ ，切勿冷冻。注意运输和储存过程中切勿将试剂盒倒置

6. 梅毒抗体的检测方法

--国产艾康
采用胶体金免疫检潮技术和层析原理定性检测血渍l浆)样本中的梅毒螺旋体抗体。检测时样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原结合形成抗原抗体复合物?由于层析作用复台物沿纸条向前移动经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au—TP Ag—TP Ab—TP Ag”夹心物而凝聚显色。游离的胶体金标记梅毒抗原则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。 —进口爱卫
胶体金法（免疫层析法）人类免疫缺陷病毒（HⅣ 1/2）抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术建立的灵敏、特异、操作简便的一步法HⅣ 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HⅣ 1型和HⅣ 2型的特异性抗体，以辅助诊断HⅣ感染，其阳性结果需用免疫印迹法确认。唾液检测试纸全球认可度比较高的是美国克利普特公司的aware爱卫品牌。

7. 梅毒如何检查

您可以直接挂一个皮肤科，内科都可以，只要能开梅毒滴度测定就可以了。梅毒滴度测定1：2 尚属正常范围，但是要注意跟踪监测，一般要一个月后，3个月后，6个月后连续复查3次正常，就算是康复了。

8. 什么是梅毒抗体

梅毒是由苍白螺旋体感染引起的一种性传播性疾病 。梅毒螺旋体感染人体后出现两种抗体：一种是特异性抗体(TPHA)，为lgM。当有补体存在和厌氧条件下，对活螺旋体的动力有抑制作用，并可将螺旋体杀死或溶解，对机体的再感染有保护作用。另一类是非特异性抗体（快速血浆反应素 RPR）。为lgA与lgM的混合物，可与正常生物组织中的类脂抗原发生非特异性结合，对人体无保护作用。
梅毒抗体的实验检测有将梅毒的病原体菌体和将菌体成分作为抗原的实验方法，尤其梅毒螺旋体抗原是在大肠杆菌中发现的,被认为是梅毒主要抗原,检测梅毒抗体的方法主要有EIA法、粒子凝集法、血球凝集法等.此外,还有用于快速检查的金标法.。

9. 梅毒检测卡的技术原理

梅毒抗体检测试剂为例以胶体金为指示标记采用双抗原夹心法原理制备而成，在检测卡的加样孔加一滴待测血清和两滴缓冲液，如果血清中含有一定量的Syp-Ab时，则与金标中的Syp-Ag免疫结合成复合物。层析到T线时，复合物再与包埋于T线的梅毒重组抗原免疫结合，从而桥联胶体金在T线显色。剩余的金标继续层析至C线时，金标与此处包埋的多抗免疫结合桥联胶体金而显色。若血清中不含有Syp-Ab或低于一定量时，T线处的疟疾重组抗原不与金标发生免疫反应，C线处的多抗与金标仍免疫结合，会出现单一显色。

10. 梅毒检测方法有哪些

梅毒检测方法有哪些 ？很多人在性生活方面没有节制，或者不注意卫生，很容易的被梅毒盯上。而梅毒感染之后不会立刻发病，而是有一定的潜伏期。那么，梅毒检测方法有哪些？

梅毒检测方法有哪些

梅毒是由苍白螺旋体所引起的一种慢性传染病，有先天性和获得性两种，主要是由于不洁性交引起的。梅毒的表现极为复杂，几乎可侵犯各种器官组织，早期主要侵犯皮肤和黏膜，晚期主要侵犯心血管和中枢神经系统。梅毒可通过胎盘传给下一代，导致胎儿先天梅毒。

诊断梅毒，除病史和临床表现外，还需要通过病原体检查和梅毒血清检查来确诊。梅毒血清学检查的方法有两种，分别是非梅毒螺旋体试验，和梅毒螺旋体试验。

所有孕妇均应在首次产前检查时进行梅毒血清学筛查。首先用上述两种血清学方法中的一种进行筛查，若结果呈阳性，需立即用另一种方法进行验证。结合病史和临床表现，可以确诊梅毒。

梅毒血清学检查的方法有两种：

①非梅毒螺旋体试验：包括性病研究实验室试验(VDRL)和快速血浆反应素试验(RPR)等，可行定性和定量检测。此法用于筛查和疗效判断，但缺乏特异性，确诊需进一步作螺旋体试验。

②梅毒螺旋体试验：包括荧光螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS)和梅毒螺旋体被动颗粒凝集试验(TP-PA)等，测定血清IgG抗体。由于该抗体终身阳性，故不能用于观察疗效、鉴别复发或再感染。

孕妇在进行梅毒血清学检查时，首先用上述两种血清学方法中的一种进行筛查，若结果呈阳性，需立即用另一种方法进行验证。若两者均呈阳性，结合病史及临床表现，可以确诊梅毒。

梅毒血清试验注意事项

梅毒血清试验是用于梅毒疾病的诊断试验。妊娠梅毒不但能给孕妇健康带来影响，更能影响胎儿发育，导致流产、早产、死胎等严重后果。即使妊娠能维持到分娩，所生婴儿患先天性梅毒的几率也很高。有些胎儿虽然发育正常，但在通过产道时，仍有可能与生殖器病损接触而感染。

未经治疗的早期妊娠梅毒妇女，大部分胎儿会成为先天性梅毒儿。大部分潜伏期梅毒妇女的胎儿在幼儿期会成为先天性梅毒儿。

实施产前梅毒筛查可及时发现孕产妇人群中的梅毒感染者，对于选择和采取各种有效的干预性预防措施，阻断或降低梅毒母婴传播的发生，提高优生优育的水平，具有十分重要的意义。

产前梅毒筛查和对妊娠梅毒进行规范的治疗及随访，可以防止90%以上的先天梅毒的出现，与此同时还进行性伴通知，使性伴得以治疗，最终可以减少传染源，切断传播途径，杜绝先天梅毒的发生。特别的需要注意梅毒血清试验的事项：

1、备孕女性应在孕前做一次梅毒血清试验，若没有进行产前检查或检查时间已经超过三个月，则怀孕后需及早做梅毒血清检查。

2、做梅毒血清试验会抽取孕妇肘关节静脉血检查，不需要空腹。一般上午抽血下午出结果，下午抽血第二天上午出结果。

3、梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但不是唯一依据。诊断梅毒，除依据化验结果外，更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史，以及详细的体查。综合分析后慎重作出判断，才能避免梅毒化验结果假阳性造成的误诊。

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