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鉴别rna和dna的方法

发布时间:2022-09-28 13:36:53

‘壹’ 如何鉴定DNA和RNA(生物)具体做法

如何鉴定DNA和RNA(生物)具体做法
不知道是观察区分细胞内的DNA和RNA,还是单独进行鉴定.
如果是前者,可用
甲基绿
—吡咯红染液染色,DNA被染成绿色,RNA被染成红色.
如果是后者,可加
二苯胺
沸水浴加热,冷却后如为DNA会呈蓝色.

‘贰’ 如何鉴定DNA和RNA(生物)具体做法

高中粗鉴定:用吡罗红(DNA)和甲基绿(RNA)鉴定.
DNA的鉴定
(1)配制二苯胺试剂:取0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混匀.
(2)鉴定:取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝).用沸水浴(100℃)加热10 min.在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色).
附1:研磨液的配制方法
Tris:10.1 g(相对分子质量为121.4),先加50 mL蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 mol/L的盐酸调至pH=8.0,再加下述药品.
NaCl:8.76 g(相对分子质量58.44)
EDTA:37.2 g(相对分子质量372.24)
SDS:20 g(相对分子质量288.3)
待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定溶至1000 mL.
若在室温低于20℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解.如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用.
附2:研磨液中几种药品的作用
SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离.
EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA.
物质的量浓度为0.15 mol/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA.
Tris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态.(Tris为三羟甲基氨基甲烷)
RNA的鉴定
取RNA沉淀约O.2 g,加2 ml 10%H2SO4→沸水浴中加热2 min→加1.5 ml地衣酚试剂→沸水浴中加热→观察颜色变化。

‘叁’ 检测DNA和RNA检测方法什么区别

您好!检测DNA的方法有:1.光密度测定。2.琼脂糖电泳凝胶检测法。3。二苯胺法。
检测RNA的方法有:1.光密度测定。2.苔黒酚法。
主要的嘧啶和嘌呤具有共轭双键,使碱基,核苷,核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段强烈的吸收峰,因此核酸具有紫外吸收特性,在260nm,处是最大的紫外光吸收值,根据朗波-比尔光吸收定律来计算出核酸含量。

‘肆’ 如何设计实验区别RNA和DNA

首先要清楚DNA和RNA的区别,然后依此来设计实验
RNA与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链,二是它的碱基组成与DNA的不同,RNA没有碱基T(胸腺嘧啶),而有碱基U(尿嘧啶).所以导致他们有以下性质上的不同.
1.两性解离:DNA无,只有酸解离,碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键).RNA有,有PI.
2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团.
3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解.
4.显色反应:
鉴别DNA和RNA+浓HCl RNA ------→ 绿色化合物
DNA ------→ 蓝紫色化合物苔黑酚
二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们.
DNA和RNA的鉴别染色
利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA.吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记.观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体.虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用.
5.溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA.DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀RNA.
6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,碱基展开程度越大,紫外吸收就越厉害.当A=1时,DNA:50ug/ml,RNA和单链DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml.用A260/A280还可来表示核酸的纯度.
7.沉降速度:对于拓扑异构体(核苷酸数目相同的核酸),其沉降速度从达到小依次为:RNA ; 超螺旋DNA > 解链环状DNA ; 松弛环状DNA ; 线形DNA也就是在离心管中最上层是线形DNA,最下面是RNA.
8.电泳:核苷酸、核酸均可以进行电泳,泳动速度主要由分子大小来决定,因此,电泳是测定核酸分子量的好方法.
9.DNA分子量测定最直接的方法:用适当浓度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以将其他形式的DNA变成线形DNA,用电镜测出其长度,按B-DNA模型算出bp数,根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量.

‘伍’ 快速鉴定RNA和DNA的方法是什么

DNA和RNA的鉴别,较常用的方法是利用两类核酸中不同的戊糖各自具备的不同的颜色反应,而得以定性鉴别。其中鉴定DNA的方法称为二苯胺法,鉴定RNA的方法称为地衣酚(苔黑酚,3,5-二羟基甲苯)法。上述颜色反应不但可用于两类核酸的定性鉴定,也是定糖法定量测定核酸的依据。

‘陆’ 分离DNA和RNA主要方法有哪些

盐析法 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小 在DNA溶解度最低时 DNA从溶液中析出 而其他杂质还留在溶液中 达到粗提取的目的
酶水解法 采用RNase(可以买)水解杂质RNA如果混入DNase酶可以采用100度加热15min使其失活 RNase不会失活 反之采用DNase可以提取RNA 混了RNase、时加入蛋白酶K或加碘乙酸钠

‘柒’ 如何分离DNA和RNA

[思路分析]
:①取鸡血细胞液(其红细胞椭圆具核,除骆驼外,猪、羊、狗等哺乳动物红细胞无核),或取新鲜猪肝、菜花、洋葱等材料。虽然在细菌的转化实验中提取的是无核细胞中的DNA,但一般而言,均是从具核的生物材料中提取DNA。当然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞质DNA,即线粒体DNA和叶绿体DNA。值得推介的材料是洋葱,取材容易,操作简便,效果明显。将家用加盐洗洁精与洋葱碎屑混合研磨并过滤后,再加酒精,微摇后即出现白色的毛絮状DNA混合物。②使红细胞溶血破膜以及化学药剂十二烷基磺酸钠 SDS(洗洁精的主要成分)或三氯乙酸溶膜。在低渗溶液中,如加蒸馏水使血细胞过度渗透吸水直至破裂,同时用玻棒加速血细胞及核破裂,经一级过滤后滤出液为DNA核蛋白和RNA核蛋白。对于菜花、洋葱等植物材料,在研磨破坏其细胞壁的同时,可考虑适量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解。③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA。在浓氯化钠溶液(2 mol/L)中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠溶液(0.14mol/L)中DNA的溶解度最低,蛋白质的溶解度很高而出现盐溶现象,经二级过滤后滤出液主要为DNA粗制品。④DNA不溶于酒精,经三级过滤后,再利用乙醇沉淀法使其他物质溶于酒精而进一步纯化DNA。⑤二苯胺或甲基绿鉴定法即DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成蓝色,遇甲基绿被染成蓝绿色,且颜色的深浅与DNA纯化程度有关。在此过程中设计对照实验,以增强实验中二苯胺对DNA专一性显色结果的可信度。

‘捌’ 怎样区分DNA与RNA

LS讲的DNA遇甲基绿变绿,只能确定存在DNA而无法辨别内部是否存在RNA.RNA遇吡罗红变红,所以直观上可以用吡罗红检验.缺点就是微量的RNA无法检测出来.粗量估计的话用这个比较直观也方便.
还有一种方法就是取样做光谱分析,DNA与RNA的吸收光谱不同,因此能测出微量RNA的存在.

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