核酸的检测方法

‘壹’ 核酸检验方法

核酸检测具体流程如下：
1. 核酸提取
使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存，RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。
2. 逆转录合成cDNA
逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。建议使用商品化RT-PCR一步法试剂进行第一轮扩增反应。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。使用商品化RT-PCR一步法试剂进行第一轮扩增反应。
3. PCR扩增反应（使用二次扩增的套式PCR扩增方法）
PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶（如Taq酶等）、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板（DNA或cDNA）。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。
4. 扩增产物定性分析
扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量标准比较，判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。自动化核酸扩增仪使用酶联比色分析或荧光探针杂交等原理测定。
5.结果判定和完成报告单
（1）实验成立的条件：每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。
（2）HIV核酸检测阳性：发现核酸阳性反应，应该重复采集样品进行复测，复测结果呈核酸阳性反应则判定为核酸阳性，复测结果为核酸阴性反应则判为不确定结果，需进一步随访检测。
（3）HIV核酸检测阴性：只可报告本次实验结果阴性。
（4）应在完成检测后5个工作日内发出检测报告。

‘贰’ 核酸检测方法有哪些

核酸的检测，每个病例必须采集急性期呼吸道标本，包括上呼吸道标本或下呼吸道标本，重症病例优先采集下呼吸道标本，如支气管或肺泡灌洗液等。出现眼部症状的病例，需采集眼结膜拭子标本，出现腹泻症状的病例需留取便标本，可根据临床表现与采集时间间隔进行采集。标本的类别有上呼吸道标本，包括咽拭子，鼻拭子，鼻咽抽取物等。下呼吸道标本，包括深咳痰液，呼吸道抽取物，支气管肺泡灌洗，肺泡灌洗液，肺组织活检标本。血液标本需要采取发病后7天内的急性期抗凝血，血清标本应尽量采集急性期、恢复期双份血清，第1份血清应尽早在发病后7天内采集，第2份血清应在发病后3~4周采集。

‘叁’ 核酸的检测

核酸的检测其实可以检测出部分病毒，比如艾滋病和新型冠状病毒之类的，不过核酸的检测在检测前是有注意事项的，比如能不能吃东西，能不能抽烟喝酒等等，这都可能影响检测结果，接下来我们来具体了解一下核酸的检测知识吧。

核酸的检测试剂及颜色变化

核酸的检测有试剂的检测，那么核酸的检测试剂及颜色变化是什么样的呢？

核酸的检测试剂及颜色变化为：红色是阳性，绿色是阴性。最常用的病毒快速检测方法主要有两大类：核酸检测，核酸（DNA 或 RNA）是病毒的遗传物质，筛选其中独一无二的特征核酸序列进行检测可准确确定病原体。

还有抗原抗体免疫检测，病毒作为抗原可激发人体免疫反应产生抗体，可以通过抗原抗体特异性相互结合的特性进行检测。当然，不论是哪种检测技术，只有操作简单，设备要求低，速度快，效率高才是王道。例如：针对新冠病毒的检测，主要是通过基于实时荧光PCR技术原理研发的核酸检测试剂进行快速确诊，基于抗体检测技术原理研发的核酸检测试剂进行补充检测。

核酸的检测方法有哪几种

核酸的检测方法并不只是有一种的，具体核酸的检测方法有哪几种呢？

核酸检测采用咽拭子检测，有口咽拭子采样和鼻咽拭子采样两种方式。口咽拭子采样就是在咽喉部位用棉签涂擦，取咽喉部上皮细胞的检测，检测方法一般是受检测者张口发出“啊——”的声音，检测人员用棉签采取样本，检测过程并没有创伤风险，是非常安全的检测。还有是鼻咽拭子采集，一般是将一根细棉签深入鼻孔，从下鼻道深入抵达鼻咽后壁，然后捻转棉签取样，一般检测很有可能会有呕吐的感觉，所以需要忍耐一下。

阳性(+)和阴性(-)是实验结果的判别方式之一，被称为定性检查。核酸检测阳性代表感染了病毒。核酸检测的操作要求较高，若因采样不当导致样本病毒含量低，或运输储存条件不当等情况，都有可能导致核酸检测可能出现假阴性结果。

核酸检测前注意事项

核酸检测前是有一些准备事项的，具体核酸检测前注意事项有哪些呢？

核酸在检测前，应当注意的是不要过度地吃东西，另外要少喝水，如果是在鼻子有症状或者是有咽喉症状的话，尽量不要去检测核酸。首先我们要知道这个核酸的检测，它是确定新型冠状病毒肺炎的一个很重要的方法。

其实通过核酸检测的结果，可以确诊或者是排除患者的新冠病毒的诊断，或者是确诊或者是排除。在检测的时候，医护人员会拿一个非常长的棉签，我们叫咽拭子，在咽后壁进行旋转、取样，如果我们吃太多的食物，很可能会引起恶心反射、咳嗽反射，从而导致误吸，一定要空腹。但是如果我们有咽喉部或者鼻部的炎症，也不适合去采样，容易出现大出血，所以还是等情况稳定的时候去做核酸。

核酸的检测时间怎么算

核酸的检测结果不会马上出来，那么对于核酸的检测时间怎么算呢？

核酸的检测一般是从做完核酸采样之后开始算时间。对于发热门诊患者的核酸检测，应在6小时内报告结果，并努力将报告时间缩短至4小时。对于普通门急诊患者、住院患者和护理人员的核酸检测，原则上应在12小时内报告结果。对于愿意接受检测的人的核酸检测，结果通常在24小时内报告。

目前，核酸的检测采用实时定量PCR方法被广泛应用于检测COVID-19特异性核酸片段。测试时，医生会用类似拭子的拭子擦拭扁桃体和咽凹附近的分泌物，或通过鼻腔清除鼻咽后部的分泌物，然后将其放入试管中，然后送到检验部门做相应的病毒核酸检测。核酸检测通过五个步骤完成：取样、样品保留、保存、核酸提取和计算机检测。

‘肆’ 核酸检测方法有哪些

核酸检测主要是鼻拭子或咽拭子法，经由鼻孔或口腔插入取得上呼吸道分泌物标本后送实验室检测。核酸检测主要是指目前对于新型冠状病毒肺炎的一种确诊的实验手段，核酸检测一般分为鼻拭子、咽拭子或者肺泡灌洗液以及痰液，通过呼吸道的标本，我们在实验室里可以检测2019新型冠状病毒的核酸，从而作为临床诊断的重要的依据。那临床上目前最常采用的检测方法是鼻拭子或者是咽拭子，操作的时候由医护人员采用特制的长柄取样的棉签，经由鼻孔或者经由口腔插入到鼻腔及咽腔中，在咽喉壁或者鼻腔的粘膜上进行涂抹，取得上呼吸道分泌物标本，这个标本取出之后再送到实验室进行相关的核酸检测。在做的过程中患者不用紧张，可能会有轻微的不适例如恶心，相信配合好医护人员的话，能够很快完成这个检查，不会给您带来很大的影响。

‘伍’ 核酸几种方法

1.定磷法。简单快捷，灵敏度高，但易受蛋白质和核苷酸影响。
2.定糖法。灵敏度高，但特异性差，戊糖也会产生反应，容易产生干扰。
3.紫外线吸收法。适用于浓度大的核酸溶液，而人体感染新冠病毒后，咽部所含的病毒量极少，无法通过此种方法被检测。
4.荧光法。目前广泛被使用的是荧光定量RT-PCR检测法，通过对标本进行逆转录扩增、使病毒片段达到一定数量，可以被检测到，但是由于受采样标本、运输等多种因素影响，也有假阴性的可能。

‘陆’ 核酸检测方法

核酸检测采用咽拭子检测，有口咽拭子采样和鼻咽拭子采样两种方式。

口咽拭子采样就是在咽喉部位用棉签涂擦，刷取咽喉部位上皮细胞的检测。受检测者只要放松心情，张口发出“啊——”的声音就可以了，检测过程并没有创伤风险，是非常安全的检测。

检测时可能会有恶心、想要呕吐的不适感觉，不过这些不适症状通常只需要半分钟到两分钟左右就可以完全缓解了。鼻咽拭子采样是将一根细棉签深入鼻孔，从下鼻道深入抵达鼻咽后壁，然后捻转棉签取样。棉签进入鼻腔的深度约为鼻尖到耳垂的距离。

(6)核酸的检测方法扩展阅读：

核酸检测相关知识：

核酸检测是检测病毒的方法，它可以更早发现感染。现在临床中对乙肝、丙肝、艾滋病都开展了核酸检测，可以在抗体产生前检测到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通过咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸检测来判断是否感染，以及推测是否具有传染性。

季节性流感、禽流感、冠状病毒感染等通过咽拭子检测可以方便地判断出上呼吸道是否存在病毒成份，从而判断被检测者是否属于感染者。

新冠病毒的核酸检测已经是比较成熟的检测方法了，只要在咽喉部位擦拭几秒钟就可以采集到标本。通过分析判断是否有新冠病毒的核酸成分，可以尽早发现感染者，甚至在感染者出现症状前就可以检测到阳性。

感染者经过隔离治疗后咽拭子检测阴性说明病毒已经清除，不具有传染性了。目前两次咽拭子核酸检测阴性是确诊病例和无症状感染者解除隔离的标准之一。

‘柒’ 怎么检查核酸检测

检测核酸目前多是通过取咽拭子的方法。

病毒感染口腔黏膜上皮以后会寄宿在口腔黏膜上皮，通过采咽拭子可以达到取样的目的，即不需要开刀，也不需要打针，只需要被检查者张开嘴，用一个像棉签一样的试子擦拭扁桃体和咽隐窝附近的分泌物，也可以通过鼻腔取鼻咽后部的分泌物，然后放入专门的试管内，在1小时内送到专门的检测室进行检测。

核酸检测作为病原诊断的一个依据，是目前确诊的重要依据，比如对于目前的新冠肺炎检测、病毒核酸检测仍是确诊的金标准。

‘捌’ 核酸检测是怎么检测

核酸检测是通过磁分离技术将病毒核酸分离，可检查艾滋病、乙肝或丙肝，还可用于新冠病毒的检查。核酸检测是采用PCR扩增方法进行检测血液中是否存在病毒核酸，是利用磁珠上标记特异性吸附特异性核酸，然后在通过磁分离技术将病毒核酸分离出来，适合用来检查艾滋病、乙肝或者丙肝等疾病的感染。核酸检查是准确度比较高，灵敏度高的医学方法，但是核酸检查的成本高，需要去三甲医院才可以进行检查，而且核酸检查适合于目前的新冠状病毒感染者，可以及时的区分出患者。

‘玖’ 核酸检测的方式都有什么

核酸检测主要有酸检测试剂、抗体检测两种方法，第一种方法通常是通过咽拭子进行PCR检测，基因扩增，然后再进行核酸检测。 而抗体检测是选择抽血，抽血的方法得出结果看，观察其抗体滴度是否升高，这种情况常常是指在抽血前常出现不能产生抗体的情况。

核酸检测是一种“进行时”检测，通过聚合酶链反应等方法检测病毒基因组中特定的核酸序列，从而判断被检测者此刻是否感染了病毒。

与核酸检测不同，新冠病毒抗体检测显示的是哪些人曾经被感染。抗体检测又被称为血清学检测，目的是检测血液样本中的抗体。人体感染病毒后，会产生IgM或IgG抗体。

被感染初期，人体会迅速产生IgM抗体，以抗感染；相比之下，产生IgG抗体的速度更慢，但IgG抗体保留时间更长。抗体检测就是检测血清中是否有这些特异性抗体，以确定被测试者是否曾被感染。

(9)核酸的检测方法扩展阅读：

六种人不宜做核酸检测

一、釆样前30分钟，对于有吸烟、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸检测，以免影响检测的准确度。

二、进食太饱的人不宜做核酸检测，否则容易发生恶心呕吐，影响采用结果的准确性。

三、核酸检测前有口服抗病毒和抗感染的药物的，应推迟做核酸检测，避免影响检测结果。

四、若是进行鼻拭子采样的话，对于鼻咽部有病症的急性期，如出血、水肿等人群可以暂不予检测。

五、刚进行核酸检测时出现恶心呕吐的人，应暂缓做核酸检测，需等检测者缓解后再予以进行。

六、被采样者用手或其他物品触及拭子采样冠、棉签的前端的不宜进行，否则容易造成污染，影响检测结果，需更换进行重做。

‘拾’ 核酸怎么检查

新型冠状病毒的核酸检测根据采样方式，大致分为上呼吸道标本和下呼吸道标本，上呼吸道标本主要为鼻咽拭子、鼻咽抽取物，下呼吸道标本主要是支气管肺泡灌洗液、深部痰液。