细胞外酸化率检测方法

Ⅰ 百度提问

【什么是卵巢囊肿】
卵巢囊肿属广义上的卵巢肿瘤的一种，各种年龄均可患病，但以 20-50 岁最多见。卵巢恶性肿瘤由于患病期很少有病，因此早期诊断困难，就诊时 70 ％已属晚期，很少能得到早期治疗， 5 年生存率始终徘徊在 20-30 ％，是威胁妇女生命最严重恶性肿瘤之一，卵巢是人体中较小的器官，但为多种多样肿瘤的好发部位，卵巢肿瘤可以有各种不同的性质和形态－－单一型或混合型、一侧性或双侧性、囊性或实质性、良性或恶性，并有不少卵巢肿瘤能产生妇性或男性的性激素。
[编辑本段]【卵巢囊肿是怎么造成的】
长期的饮食结构，生活习惯不好、心理压力过大等因素造成体质过度酸化，人体整体的机能下降，引起肾虚，肝肾同源，肾卵巢囊肿病理虚肝亦虚，进而引起下焦代谢循环变慢，造成卵巢疾病和内分泌失调，免疫功能下降，从而发展为卵巢组织异常增生,终致卵巢囊肿，甚至癌变。
身体组织液酸化，身体细胞处于酸性体液中，进而形成身体正常细胞溶氧量下降，造成细胞的活性下降，代谢循环减慢，下降到正常值的65％时，正常细胞就无法生存，但也有不惜改变染色体采取主动变异的细胞，细胞的表型发生改变，肿瘤性状得以表达，这些细胞迅速扩增，从而形成真正的肿瘤实体。
另外，还有因体质酸化身体发生其他组织的癌变，又因身体机能下降，身体组织液酸化，造成了卵巢囊肿。
[编辑本段]【多囊卵巢综合征】
多囊卵巢综合征是一种常见的女性内分泌疾病，是导致生育期女性月经紊乱的最常见的原因之一。患此症的女性多有较明显的自觉症状，如：月经失调(多为月经稀发或闭经)、不孕、多毛、痤疮、肥胖、黑棘皮症(阴唇、颈背部、腋下、乳房下等处皮肤出现色素沉着，对称，皮肤增厚而柔软)。因此多能自觉就诊。由于PCOS异常的内分泌环境，还易发生2型糖尿病’>糖尿病、妊娠期糖尿病’>糖尿病(GDM)、糖耐量减低、高脂血症、高血压、血液高凝状态和冠心病等代谢综合征。所以认为多囊卵巢综合征是一种复杂的多系统综合征。
多囊卵巢综合征的病因尚不清楚，目前仅有一些假说。由于其病因不清，治疗也多以对症为主，主要有以下几个方面的治疗：
1、 控制体重
严格限制热量的摄入和长期坚持体育锻炼。部分病人可能恢复排卵及生育功能。
2、调节月经周期
对于青春期和没有生育要求的患者，可以选择口服避孕药(目前常用的有妈富隆和达英-35),用药后可以使月经规则,改善痤疮及多毛。连续应用3个周期后可以明显改善性激素紊乱,从而调整月经周期。
3、促排卵治疗
促排卵治疗适用于有生育要求的患者，克罗米芬，促性腺激素，二甲双胍手术治疗 腹腔镜下卵巢打孔术，超声引导下经阴道未成熟卵泡穿刺术，经阴道超声引导卵巢间质水凝术等
[编辑本段]【卵巢早衰是怎么回事】
卵巢早衰不代表整个机体的衰老
卵巢功能早衰对女性机体的影响确实是明显的，由于性激素过早地撤退，可导致月经紊乱、闭经、绝经期提前来临，出现一些本该发生在更年期的代谢紊乱。但是，卵巢功能早衰并不一定意味着人整个机体的衰老。科学研究认为，即使是进入更年期月经停止后，女性全身调节系统会做出积极的变化，进入一种新的平衡状态，从而确保全身其他系统的正常运转。
关键是卵巢功能衰减者要正视现实，摆脱精神上的压力，调整好心态，注意自我保健。另外出现了卵巢早衰，应及时用药物治疗。“卵巢保养”目前没有医学根据目前一些美容院（科）推出了所谓的“卵巢保养”，是用一种从植物里提炼的“香精油”在女性小腹上进行按摩，并刺激一些穴位的疗法
正常妇女卵巢功能在45岁至50岁左右时才开始衰退，如果在40岁以前出现衰退迹象，医学上称之为卵巢功能早衰。这种女性常伴有闭经或少经。
引起卵巢早衰可能与精神压力过大有关
引起卵巢早衰的原因有很多，最大的因素可能与现代女性精神压力过大有关。卵巢功能早衰的特点是卵巢对正常的促性腺激素不能做出正常反应，出现了体内促性腺激素水平很高，而卵巢产生的雌激素水平很低的现象。并非过早出现闭经、少经都是卵巢早衰。要确诊卵巢早衰需要做内分泌检查，卵巢早衰会出现促黄体素、促卵泡激素增高，性激素降低。
[编辑本段]【卵巢囊肿早期症状】
卵巢囊肿在临床上多表现有小腹疼痛，小腹不适，白带增多，白带色黄，白带异味，月经失常，而且通常小腹内有一个坚实而无痛的肿快，有时性交会发生疼痛。当囊肿影响到激素生产时，可能出现诸如阴道不规则出血或毛体增多等症状。囊肿而发生扭转，则有严重腹痛腹帐、呼吸困难、食欲降低、恶心及发热等。较大的囊肿会对膀胱附近造成压迫，引起尿频和排尿困难。尤其当这些症状比较严重、出血频繁且同时出现时，女性患卵巢囊肿的可能性更高，病变恶性卵巢癌的危害就更大。
[编辑本段]【卵巢囊肿的临床表现】
卵巢囊肿在早期并无明显的临床表现患者往往因其他疾病就医在行妇科检查时才被发现以后随着肿瘤的生长患者有所感觉其症状与体征因肿瘤的性质大小发展有无继发变性或并发症而不同
1、下腹不适感 为患者未触及下腹肿块前的最初症状由于肿瘤本身的重量以及受肠蠕动及体位变动的影响使肿瘤在盆腔内移动牵扯其蒂及骨盆漏斗韧带以致患者有下腹或骼窝部充胀下坠感
2、腹围增粗腹内肿物 是主诉中最常有的现象患者觉察自己的衣服或腰带显得紧小方才注意到腹部增大或在晨间偶然感觉因而自己按腹部而发现腹内有肿物加之腹胀不适
3、腹痛 如肿瘤无并发症极少疼痛因此卵巢瘤患者感觉腹痛尤其突然发生者多系瘤蒂发生扭转偶或为肿瘤破裂出血或感染所致此外恶性囊肿多引起腹痛腿痛疼痛往往使患者以急症就诊
4、月经紊乱 一般卵巢甚至双侧卵巢囊肿由于并不破坏所有的正常卵巢组织故多半不引起月经紊乱有的子宫出血并不属于内分泌性或因卵巢瘤使盆腔的血管分布改变引起子宫内膜充血而起；或由于卵巢恶性肿瘤直接转移至子宫内膜所致因内分泌性肿瘤所发生的月经紊乱常合并其他分泌影响
5、压迫症状 巨大的卵巢肿瘤可因压迫横膈而引起呼吸困难及心悸卵巢肿瘤合并大量腹水者也可引起此种症状；但有的卵巢肿瘤患者的呼吸困难系由一侧或双侧胸腔积液所致；并且往往合并腹水形成所谓 M eigs 综合症
巨大的良性卵巢囊肿充盈整个腹腔使腹腔内压增加影响下肢静脉回流可导致腹壁及双侧下肢水肿；而固定于盆腔的恶性卵巢囊肿压迫髂静脉往往引起一侧下肢水肿，盆腹腔脏器受压发生排尿困难尿潴留便急或大便不畅等现象，主要表现在以下几方面：
（1）、腹内肿块 中等大以下的腹内肿块如无并发症或恶变其最大特点为可动性往往能自盆腔推移至腹腔 肿块一般无触痛但如有并发症或恶变则不仅肿块本身有压痛甚至出现腹膜刺激症状
（2）、腹水征 腹水存在常为恶性肿瘤的特征但良性囊肿如卵巢纤维瘤及乳头状囊腺瘤亦可产生腹水 内分泌症状 如多毛声音变粗阴蒂肥大等为男性化囊肿
（3）、恶病质 其特征是腹部极度膨大显着消瘦痛苦的面部表情及严重衰竭
临床上对于卵巢瘤的诊断应达到4个要求：（1）是否卵巢肿瘤；（2）是何种卵巢肿瘤；（3）有无并发症；（4）何侧生长
[编辑本段]【卵巢囊肿导致不孕】
卵巢是卵子发育、成熟、排出的场所，而各个不同阶段的卵泡在卵巢皮质，若卵巢遭受到破坏，使卵子发育、成熟及排出受损，就会导致不孕。卵巢囊肿属于卵巢肿瘤的一种，其引起不孕的机制与干扰排卵功能有关。某些含有内分泌功能的卵巢囊肿，如卵巢甲状腺瘤、卵巢颗粒—卵泡膜细胞瘤、睾丸母细胞瘤等，可因其所含肿瘤组织成分不同而产生某些相应激素，从而干扰了卵巢激素的正常分泌和排卵，出现闭经，子宫出血，多毛和不孕等症状。
[编辑本段]【如何预防卵巢囊肿】
研究表明：
1、肿瘤不能在弱碱性的人体中形成；
2、肿瘤只能在酸性身体中形成；
3、如果你有肿瘤，说明身体是酸性的；
4、 肿瘤只能在一个酸性的身体扩展；
5、 如果你的身体变弱碱性，肿瘤不能扩展；
6、 如果你能平衡你的身体PH值，让你的身体转变成弱碱性，不管你得的是什么肿瘤都有转变和被治好；
7、不管你的情况多么糟糕，哪怕只能活6个月，如果你能转变你的身体PH值到弱碱性，你的肿瘤就不会扩展，就会好；
8 、不用担心你的家族中你的妈妈、爸爸或任何人有肿瘤，只要你的身体是弱碱性的，你不会得，如果你已经有了，它将会转变；
9、 肿瘤都是酸性体液中生存的，没别的。如果你的身体是酸的，你就会得肿瘤。如果是弱碱的，你就不会得肿瘤。如果你已有了肿瘤，只要你能调整你身体的PH值到弱碱性，肿瘤就会离你而去。
预防肿瘤的秘诀十分简单，就是常吃碱性食物以防止酸性废物的累积，因为酸化的体液环境，是正常细胞癌变的肥沃土壤，调整体液酸碱平衡，是预防癌症的有效途径。
1） 养成良好的生活习惯，戒烟限酒。吸烟，世界卫生组织预言，如果人们都不再吸烟，5年之后，世界上的癌症将减少1/3；其次，不酗酒。烟和酒是极酸的酸性物质，长期吸烟喝酒的人，极易导致酸性体质。
2） 不要过多地吃咸而辣的食物，不吃过热、过冷、过期及变质的食物；年老体弱或有某种疾病遗传基因者酌情吃一些防癌食品和含碱量高的碱性食品，保持良好的精神状态。
3） 有良好的心态应对压力，劳逸结合，不要过度疲劳。可见压力是重要的癌症诱因，中医认为压力导致过劳体虚从而引起免疫功能下降、内分泌失调，体内代谢紊乱，导致体内酸性物质的沉积；压力也可导致精神紧张引起气滞血淤、毒火内陷等。
4） 加强体育锻炼，增强体质，多在阳光下运动，多出汗可将体内酸性物质随汗液排出体外，避免形成酸性体质。
5） 生活要规律，生活习惯不规律的人，如彻夜唱卡拉OK、打麻将、夜不归宿等生活无规律，都会加重体质酸化，容易患癌症。应当养成良好的生活习惯，从而保持弱碱性体质，使各种癌症疾病远离自己。
6） 不要食用被污染的食物，如被污染的水，农作物，家禽鱼蛋，发霉的食品等，要吃一些绿色有机食品，要防止病从口入。
[编辑本段]【卵巢囊肿的诊断及治疗】
在日常生活中，定期去体检，时常注意自己的身体有无卵巢囊肿的征兆，如果有一些反应就要弄清楚到底是什么原因造成的不适。要确诊是不是卵巢囊肿需要到医院去做具体的检查，看自己的血检指标，CEA，CA125，做核磁共振等检查确诊。
如果确诊是卵巢囊肿，首先不要慌，一定要根据具体的情况做判断应该如何治疗，进行多方面的咨询。随着卵巢囊肿早期诊断方法的出现，治疗技术及术后综合治疗的日趋成熟，一般的卵巢囊肿不易做手术，建议保守治疗，进行食疗。
[编辑本段]治疗：卵巢囊肿应该如何治疗？
卵巢囊肿是卵巢囊性肿块的统称，它对于身体的危害以及对它的治疗，取决于它的性质。
一般来说，如囊肿直径小于5厘米，又无证据提示肿瘤的话，多为功能性囊肿，可以密切随访，即2－3个月检查一次，以后再根据情况调整检查间隔时间；
若囊肿直径大于5厘米，则多为卵巢肿瘤，一般需要手术治疗；
如果同时伴有进行性加重的痛经及性交痛、盆腔有触痛性结节，则应考虑子宫内膜异位症（即巧克力囊肿）。可根据具体情况，采取不同的治疗。
[编辑本段]【中医学对卵巢囊肿的看法】
中医学认为，引起卵巢囊肿主要有以下诸因素。
1、痰瘀凝结，忧思伤;虚生痰，痰饮停聚而阻滞气机，引起气滞血瘀、痰饮与血瘀结成块。痰瘀久积也可导致癌症。除有上述气血凝滞的症状外，患者常有胃脘满闷、心慌、气短、纳差，浮肿、呕恶、筋惕肉、腹围增粗、月经紊乱，排尿困难，便急或大便不畅、下腹或窝部充胀，有下坠感等现象。
2、气血凝滞期或产后受寒，寒凝血滞。或内伤情志，抑郁伤肝，气机运行不畅，气滞血也滞，气血瘀凝而致。若瘀积日久变成癌症。表现为除下腹部有肿块外，一般无明显症状或仅见舌有瘀点。如为恶性者，下腹部肿块坚硬固定，疼痛拒按，皮肤不润面色紫;，舌有瘀点。恶性晚期患者可有腹水，形;枯槁，神疲乏力等症。
[编辑本段]【现代治疗卵巢囊肿的方法】
日前，国内外对卵巢囊肿的治疗多采用手术，化疗、放疗等，但大多难以治愈，恶性肿瘤病程短，发展快，根据恶性程度高低手术切除的多少或放化疗的敏感度，复发有早有晚，手术后瘤体还会再复发、再生长因此大部分患者手术后仍然会再复发。
目前，中医治疗卵巢囊肿已经获得一定突破，大部分9CM以下普通液性囊肿，只需一月即治愈，巧克力性的卵巢囊肿也只需三月左右！
[编辑本段]【食疗法治疗卵巢囊肿】
今天我们治疗卵巢囊肿所采取的方法手术和化疗为什么没有真正的治愈癌症，减轻患者的痛苦呢，人们最终没有得到康复的真正原因就是体液是酸化的，酸性体液不改变卵巢囊肿也就不会死亡，这就是因为做了手术和化疗后卵巢囊肿再度转移和复发的原因。要治疗卵巢囊肿还得从改善自身的体质开始，从源头上饿死变异细胞。多吃碱性食品，改善自身的酸性体质，同时补充人体必须的有机营养物质，这样才能在饿死变异细胞的同时，恢复自身的免疫力。
[编辑本段]【常见的酸性食物与碱性食物】
1、强酸性食品：蛋黄、奶酪、白糖做的西点或柿子、乌鱼子、柴鱼等。
2、中酸性食品：火腿、培根、鸡肉、鲔鱼、猪肉、鳗鱼、牛肉、面包、小麦、奶油、马肉
等。
3、弱酸性食品：白米、落花生、啤酒、酒、油炸豆腐、海苔、文蛤、章鱼,泥鳅。
4、弱碱性食品：红豆、萝卜、苹果、甘蓝菜、 洋葱、豆腐等。
5、中碱性食品：萝卜干、大豆、红萝卜、蕃茄、 香蕉、橘子、番瓜、草莓、蛋白、梅干、柠檬、菠菜等。
6、强碱性食品：恰玛古、葡萄、茶叶、海带芽、海带，柠檬等。
[编辑本段]【卵巢囊肿的饮食宜与忌】
【宜】�
1、宜多吃具有抗肿瘤作用的食物：鲎、海马、鳖、龙珠茶、山楂。
2、出血宜吃羊血、螺狮、淡菜、乌贼、荠菜、藕、蘑菇、马兰头、石耳、榧子、柿饼。
3、感染宜吃鳗鱼、文蛤、水蛇、针鱼、鲤鱼、麒麟菜、芹菜、芝麻、荞麦、油菜、香椿、赤豆、绿豆。
4、腹痛、腹胀宜吃猪腰、杨梅、山楂、橘饼、核桃、栗子。
【忌】
1、忌烟、酒。
2、忌葱、蒜、椒、桂皮等刺激性食物。
3、忌肥腻、油煎、霉变、腌制食物。
4、忌羊肉、狗肉、韭菜、胡椒等温热动血食物。
卵巢囊肿注意事项
1、发现卵巢肿瘤生长速度较快者，为手术指征。
2、突然下腹部阵发性绞痛，妇检或B超提示卵巢肿瘤扭转者，也应及时手术或保守治疗。
3、发现恶性卵巢肿瘤者，应先予手术，术后予以中西药综合治疗。
4、患者化疗期间身体较虚弱，容易感冒或受细菌感染，因此中医治疗至关重要。
卵巢囊肿类型
目前多数采用按组织发生、组织形态的分类方法。
1、 普通上皮性囊肿
2、性索间质性囊肿
3、生殖细胞囊肿
[编辑本段]【卵巢囊肿分几类】
大致上卵巢囊肿的种类可分为下列几种:
1、功能性囊肿：这是最常见的囊肿。发生在排卵周期的育龄妇女，异常量的液体聚集在滤泡内或黄体内，形成滤泡囊肿或黄体囊肿。这种功能性囊肿有时会很大，但不管用药与否，通常会在三个月内自行消失。
2、出血性囊肿：有时滤泡囊肿及黄体囊肿生长过速，造成卵巢的组织牵扯而裂开流血。这些血液因没有出口出去而积在卵巢里，就称为出血性囊肿。这种囊肿一般会自行消失但所需时间较长。如果身体不适的现象较为明显，则可服药减缓症状。只有在少数的情况下，病人呈现较严重症状时才需要开刀切除。
3、浆液性上皮囊肿及黏液性上皮囊肿：在观察三个月后，仍然存在的囊肿有可能是属于上皮卵巢囊肿，而非功能性囊肿。这是因为具有分泌功能的浆液细胞及黏液细胞在排卵后被包埋在卵巢内，不断的分泌液体形成囊肿。这种囊肿是不会消失的，需要开刀切除。
4、巧克力囊肿(子宫内膜异位瘤)：是指子宫内膜异位症长在卵巢内，在卵巢内形成大量黏稠咖啡色像巧克力状的液体。因为子宫内膜异位瘤会随着时间增加而变大，渐渐侵蚀正常的组织，造成卵巢组织不可逆的损害。经过评估其严重性后，可能需要开刀处理。
5、畸胎瘤：这是一种很特别的囊肿，可能是在胚胎时期的细胞分化上出了问题， 经过很久的时间才表现出来。它会在卵巢内生成毛发、牙齿还有一些油脂类的聚集。由于畸胎瘤本身不会自行消失，而且还有可能不断的成长， 另有15% 机率会造成卵巢扭转，所以最好及早切除。一般来说恶性的比率小于千分之一。
6、卵巢癌：罹患卵巢癌的机率相当低，但因为位于骨盆腔内，并不容易早期发现。
卵巢的恶性肿瘤，种类繁多，其预后情形皆不相同。一般来说，中老年女性较容易得到上皮细胞癌，此种癌症复发机率较高，预后较差。

【超声介入治疗卵巢囊肿】

超声介入疗法是一种治疗各类囊肿、肌瘤的先进医疗办法，是在超声引导下直接穿刺到病变组织，注入药物，使病变组织迅速脱水、变性坏死、萎缩纤维化的方法，其特点有：
1、显示病灶准确。实时超声监测可以准确显示病灶的精确部位，找到最佳进针点，确定进针的部位、角度、方向和深度，同时显示人体不同解剖层次，保证不刺破重要器官、血管和胆道，最大限度减少穿刺的危险性。
2、操作简便、迅速。超声引导下既简便，又迅速，在门诊、在病人床边均可进行，给病人提供很大方便。
3、治疗效果明显。超声介入治疗各类囊肿，不需开腹，在超声的引导下，精确定位，采用进口穿刺针从腹部进针，穿刺囊肿，抽出囊液，注入特效药物，使囊肿萎缩、消失，单纯无分隔囊肿可一次性治愈，并有效避免了腹腔粘连的发生，也不必担心手术时因剥离而破裂，避免复发。
4、患者组织损伤小、痛苦少。18G进口细针穿刺，针眼不足1毫米，无创伤，不痛苦，不影响正常工作和生活，随治随走。
5、费用低廉。CT、核磁、同位素引导介入，费用均比较昂贵，需要重复检查患者费用更高；超声介入疗法比起手术、长期药物治疗的费用而言相对较低，患者能在花费较少的医疗费用就能获得一次性治疗不反复的最佳效果。
6、无放射性损伤。无论是X引导，CT引导还是磁共振引导，病人均会或多或少地受到放射污染或核污染，而超声介入治疗囊肿肌瘤，在超声引导下，避免了多次的放射污染或核污染。

【腹腔镜治疗卵巢囊肿】

近年来腹腔镜技术日趋成熟，广泛应用于妇产科领域，使卵巢囊肿的治疗也从“巨创”走向“微创”。因其具有手术创伤小、出血少、手术时间短、术后恢复快、住院时间短、 腹部几乎不留瘢痕、盆腔粘连少、输卵管阻塞轻微，更易于保留输卵管。组织凝固创面可以防止纤维素的渗出、沉积、明显提高患者手术后的生活质量。深受广大患者欢迎。
卵巢囊肿与相似疾病的区别】
如何才能明确的诊断与治疗出呢？应该注意与以下疾病进行鉴别：
1、卵巢瘤样病变：滤泡囊肿和黄体囊肿最常见。多为单侧，直径小于5cm，壁薄，2个月内自行消失。
2、输卵管卵巢囊肿：为炎性囊块，常有不孕或盆腔感染史，两侧附件区形成囊性块物，边界清或不清，活动受限。
3、子宫肌瘤：浆膜下肌瘤或肌瘤囊性变易与卵巢实质性肿瘤或囊肿相混淆。肌瘤常为多发性，与子宫相连，并伴月经异常如月经过多等症状，检查时肿瘤随宫体及宫颈移动。
4、妊娠子宫：妊娠早期，三合诊时宫体与宫颈似不相连，易将柔软的宫体误认为卵巢肿瘤。但妊娠妇女有停经史，若能详细询问病史，作HCG测定或B型超声检查可鉴别。
5、腹水：大量腹水应与巨大卵巢囊肿鉴别，腹水常有肝病、心脏病史，平卧时腹部两侧突出如蛙腹，叩诊腹部中间鼓音，两侧实音，移动性浊音阳性;巨大囊肿平卧时腹部中间隆起，叩诊浊音，腹部两侧鼓音，移动性浊音阴性;下腹块物边界清楚，B型超声检查可以鉴别
为什么会得卵巢囊肿】
卵巢囊肿是指卵巢内有囊性的肿物形成，可分为肿瘤性和非肿瘤性两类。肿瘤性囊肿即为卵巢肿瘤，非肿瘤性囊肿包括卵巢的功能性囊肿以及子宫内膜异位囊肿。生育年龄的妇女最容易发生的卵巢囊肿是卵巢的功能性囊肿，它是由于卵巢本身或药物刺激造成的过度生理性反应所致。卵巢囊肿患者一般没有任何症状，少数人可能会有月经失调，多因其它原因就医检查时意外发现。卵巢囊肿西医多采用手术治疗的办法,我院特效中医中药治疗卵巢囊肿有特效,经过长期实践及无数患者验证。

Ⅱ Th细胞的Th细胞胞外细胞检测

胞外细胞因子的检测：主要检测血浆（血清）和其他本液中的细胞因子，血浆（血清）中细胞因子的测定。可确切反应细胞因子的表达状态，某些体液标本如脑脊液、滑膜组织液、支气管灌洗液、胸腹水等与特定疾病直接相关。 流式细胞术（flow cytometery，FCM）其基本原理是：用刺激剂PMA、ionomycin（离子霉素）体外激活淋巴细胞，用蛋白转运抑制如黄能霉素（monensin）阻止细胞因子分泌到细胞外，细胞内蛋白质转运方式被打乱，引起细胞因子向高尔基体积聚，用流式细胞仪便可测出增强细胞因子。这一技术的发展使得以往通过T细胞克隆方式在几个月才能回答的问题，在几个小时内就能得以解决。该技术成为单细胞水平上检测细胞因子产生的标准分析方法，尽管细胞因子标记流式细胞技术具有其他方法无可比拟的优越性，但是在操作过程中，需要对细胞进行刺激、阻断、固定、穿透和标记，任何一个环节都会影响实验结果[8]。流式细胞仪法常用检测指标为以CD4设门进行FCM分析。通过CD4+ 细胞中IFN-γ和IL-4的表达来确定TH1/ TH2细胞的百分率[9-10]。以CD3/CD8设门，用FCM检测分析TH1/ TH2细胞的表达率，结果准确可靠，操作方便快捷，是检测TH1/ TH2细胞较理想的方法[11-12]。近年来发现CD4+T细胞向不同的方向极化，细胞表面表达不同趋化因子受体（chemokine receptor），趋化因子受体CCR5主要表达于TH1细胞表面，是TH1细胞的特异性标记[14]，因此，利用针对趋化因子受体的特异性单克隆抗体来测定TH不同亚群特异笥较高，而且操作较简单。CCR5和CCR3抗体是最近开发出来的，但只能反映TH细胞数量上的变化，其与功能（细胞因子分泌）的变化不否一致，有待进一步的研究。

Ⅲ 简述检测蛋白质磷酸化的检测方法及其原理

方法及原理：
1.激酶活性分析
生物学样品中的激酶活性通常是在体外测定的，在ATP的存在下将免疫沉淀的激酶与外源底物共同孵育。之后通过一些报告系统来评估特定激酶对底物的磷酸化，包括显色、放射性或荧光检测。
直接测定蛋白磷酸化的一种经典方法是将整个细胞与放射性标记的32P-磷酸盐共同孵育，获得细胞提取物，通过SDS-PAGE分离，并曝光在胶片上。这种繁琐的方法需要多次几小时的孵育，且使用放射性同位素。其他传统方法包括2D凝胶电泳，这种技术假定磷酸化会改变蛋白的迁移率和等电点。
2.WesternBlot
利用SDS-PAGE分离生物样品，随后转移到膜上（通常是PVDF或尼龙膜），之后利用磷酸化特异的抗体来鉴定目的蛋白。
由于测得的磷酸化蛋白水平可能随处理或凝胶上样误差而变化，研究人员常常利用一个抗体来检测同源蛋白的总水平（而不考虑磷酸化状态），以确定磷酸化组分相对于总组分的比例，并充当上样内对照。化学发光和显色法都很常用，而分子量marker常用来提供蛋白分子量的信息。
3.酶联免疫吸附分析（ELISA）
ELISA的定量能力优于Westernblot，且在调节激酶活性和功能的研究中表现出巨大的作用。这种微孔板形式的分析一般利用目的蛋白特异的捕获抗体，与磷酸化状态无关。随后让目的蛋白结合在抗体包被的分析板中，目的蛋白可以是纯的，也可以是复杂的异质样品（如细胞裂解液）中的一个组分。加入待分析的磷酸化位点特异的检测抗体。这些分析通常设计为显色或荧光检测。
4.基于细胞的ELISA
来自目的蛋白的信号可通过第二种蛋白来标准化，校正各孔之间的差异，实现磷酸化蛋白水平的准确评估，并比较多个样品，与传统免疫印迹中使用磷酸化特异和总蛋白抗体相似。这些分析绕过了制备细胞裂解液的需要，因此更适合高通量分析。
5.质谱
首先，磷酸化肽段的信号通常较弱，因为它们带负电荷，而电喷雾质谱在正电模式下作用，因此电离效果不好。其次，在大量非磷酸化蛋白的高背景之下，很难观察到低丰度目的蛋白的信号。
6.多个分析物图谱分析

Ⅳ 用什么办法才能查出身体是酸性和碱性呢

判断自己是酸性或碱性体质 ：
第一种办法是自我感觉，如果长期体力不支、容易疲劳、形容憔悴或有其他亚健康特征，无疑说明自己的体液在酸化。
第二种办法是用PH试纸检测。最简单的是连续三天清晨空腹检测唾液，如PH平均值小于7.0即为酸性体质。
第三种办法是到医院查血。
需要说明的是，血液的PH值波动范围极小，为7.35-7.45。小于7.35即为酸性，小于7.0，表明病情极为严重。
酸性体质的形成是一个漫长的过程，对身体的影响也是一个从量变到质变的过程。当酸性不很强时，反应出来的是亚健康状态，进一步酸化，就会出现各种疾病。这几乎是所有内源性慢性疾病的患病原因。比如，癌症病人的体液都是酸性的，病情越重，酸性越强。因为癌细胞只能在酸性体液和缺氧的条件下，才会疯狂的生长，形成肿瘤。糖尿病人、痛风病人、心血管病病人的体液都是酸性的。所以说，酸性体质是百病之源。
同理，疾病的治疗必须从根本上改变酸性体质。
酸性体质 ：正常人的体液平均PH值是7.0——7.4，为中性或弱碱性。低于这个平均值，就是酸性体质。
人的身体构成中约有70%是水分，成为体液。体液含有各种人体不可缺少的离子、化合物以及代谢物。生命活动的大多数生化反应都是在水溶液中进行的。
体液包括细胞内液(占体液的2/3)和细胞外液(占体液1/3)。细胞外液包括血液、淋巴液、组织液、脑脊液和各种分泌液(如唾液、尿液、眼泪、汗液、胃液、精液、宫颈液等)。
形成酸性体质主要有三个因素：
第一，代谢因素。人体体内每时每刻都在进行新陈代谢，产生的代谢物是酸性的。
第二，饮食因素。绝大多数人的日常饮食都是酸性食物为多，如肉类、蛋类、奶类、酒类、碳酸饮料类等等，这些食物消化后在体内留下硫、氮、磷、氯等酸性物质，在体内形成酸根，这是导致酸性体质形成的最重要的原因。
第三，环境因素。大环境的被污染同样影响着体内小环境，破坏了体内酸碱平衡体系，加速了体液的酸化 。
酸性体质对 身体的危害：
一.、对循环系统的影响：体液偏酸使 血液粘稠度增高、血液循环减慢、血液中的脂质类物质易沉积在血管壁上，导致早期动脉硬化、血栓或心、脑血管疾病。
对骨骼的影响：偏酸的体液刺激甲状旁腺，使甲状旁腺素分泌增多，骨骼释放到血液中的钙增多，钙虽然可以中和血液中的酸，但这样长期“借”钙的结果，会导致骨质疏松、骨质增生、骨骼变形及牙损害等。
对眼睛影响：体液偏酸、血液粘稠度增高、血循环减慢、对组织细胞供氧减少，易造成组织细胞衰老死亡，而眼底的血管又细又长，所以极易受累病变，使循环不畅，发生眼部疾病。
对皮肤的影响：偏酸的体液使皮脂腊的微酸性状态受到破坏，失去了对细菌的抑制作用，易引发痤疮、毛囊炎、疖肿等感染性皮肤病。据调查，80%痤疮患者的体液偏酸。粘稠度增高，血循环减慢，黑色素及酸性产物在皮下瘀积，晚出现色素斑、皮肤干燥，以及皮肤弹性差、晦暗等。此时皮肤还处于高敏感状态，极易过敏。
对免疫系统的影响：体液偏酸、人的免疫力降低，易患感冒及其他感染性疾病。因此，体液的酸碱平衡对健康与美容起着很重要的作用。
酸性体质是百病之源，增加碱性营养才是健康的真正出路，恰玛古富含植物有机活性碱，是维吾尔族人药食同源的碱性食物。
二..食品的酸碱性：
1.食品的酸碱性与其本身的PH值无关(味道是酸的食品不一定是酸性食品)，主要是食品经过消化、吸收、代谢后，最后在人体内变成酸性或碱性的物质来界定。产生酸性物质的称为酸性食品，如动物的内脏、肌肉、植物种子(五谷类)。产生碱性物质的称为碱性食品，如蔬菜瓜豆类，茶类等。
2. 动物的内脏、肌肉、脂肪、蛋白质、五谷类，因含硫(S)、磷(P)、氯(Cl)元素较多，在人体内代谢后产生硫酸、盐酸、磷酸和乳酸等，他们是人体内酸性物质的来源;而大多数菜蔬水果、海带、豆类、乳制品等含钙(Ca)、钾(K)、钠(Na)、镁(Mg)元素较多，在体内代谢后可变成碱性物质。
3.如果过多食用酸性食品，以至不能中和而导致酸性，消耗钙、钾、镁、钠等碱性元素，会导致血液色泽加深，粘度、血压升高、从而发生酸毒症(Acidosis)，年幼者会诱发皮肤病、神经衰弱、胃酸过多、便秘、蛀牙等，中老年者易患高血压、动脉硬化、脑出血、胃溃疡等症。酸毒症是由于过多食用酸性食品引起的，所以不能偏食，应多吃蔬菜和水果保持体内酸碱的平衡。
4.水果虽然含有各种有机酸，吃起来有酸味，但消化后大多氧化成碱性食物。但草莓有不能氧化代谢的有机酸(苯甲酸、草酸)，会使体液的酸度增加，属于酸性食品，是个例外。存在于蔬菜中的有机酸主要是苹果酸、柠檬酸、酒石酸和草酸。这里特别要注意的是草酸，它的有机体不易氧化，与钙盐形成的草酸钙不溶于水而累积于肾脏中，影响了钙的吸收。在菜蔬中，番茄、马铃薯、菠菜等都含有草酸。理论上碱性中毒(alkalosis)亦会发生，但人类碱性中毒现象不常见，因为人类有大量的胃酸可以中和。
体液酸碱度[PH值]小于7.35时，称体液酸化，酸性体质。产生酸性体质的因素主要是：营养过剩、运动较少、压力过大和环境污染。其中最主要的因素是营养过剩，体内摄入过多的酸性食物，无法排出体外，其酸性分解产物导致体液酸化，如蛋白质分解出尿酸，脂肪分解出乙酸，糖类分解出丙酮酸、乳酸。
酸性食物：
好吃的东西几乎都是酸性的，如：鱼、肉、米饭、酒、砂糖等，全都是酸性食物，相反，碱性食物如海带、蔬菜、白萝卜、豆腐等多半是不易引起食欲但却对身体有益的食物。外行人的想法，以为酸的东西就是酸性食物，诸如一看就会令人流口水的草莓、柠檬等，其实，这些东西正是典型的碱性食物，麻烦也就在这个地方。
可以参考食物中的钙、磷的含量来判断，钙质多的就是碱性食物，磷质多的就是酸性食物。所以我们应该好好检讨自己平日所吃的东西，是否有酸性过度的倾向。
白米饭是典型酸性食物，以此为主食的中国人，如果没有摄取相当量的碱性食物，就容易变成酸性体质。尤其是近年来，工业发展而引起环境污染、果菜类的农药污染、化学性加工食品等危害，变本加厉，加上土壤的酸性化导致食物中的钙也相对缺少。
此外还有一种酸性体质的原因，那就是都市人精神上的压力反应。从外面而来的压力，透过间脑而传到副肾和脑下垂体，以荷尔蒙分泌再传达到各器官，此时，若测定血液中的钙离子，一定会比正常值下降，也就是压力使血液中的钙离子降低，使血液变成酸性化。总之，环境污染及不正常生活及饮食习惯，使我们体质逐渐转为酸性、生活步调失常会造成酸性体质、情绪过于紧张、动手术之身体的负荷都易让体质变成酸性。
保持碱性体质的措施：
1、保持良好的心情、情绪对体液酸化影响很大。适量运动以及杜绝抽烟、酗酒等不良嗜好。
2、不吃宵夜：通常晚上八点过后进食就称之为宵夜。因晚上人体活动力低，且大部分处于休息状态，因此食物 留在肠子理会变酸、发酵、产生毒素，使体质变酸。
3、要吃早餐：人体在凌晨 4 ： 30 体温达到最低点，血循会变慢，如果睡太晚再加上不吃早餐，血液循环变慢， 氧气减少，形成缺氧性燃烧，会使体质变酸。
4、调整饮食结构，酸碱食物的比例建议为 20 ∶ 80 。多喝碱性离子水，少喝酸性水，如纯净、可乐等。如果体质偏酸性，可多实用碱性食物，例如糙米、蔬菜水果，另外海藻类食品也是很好的选择。体重反应身体健康，身体的健康与否，在于您平日的保健，多一分关心，将多一些健康。
我们日常摄取的食物可大致分为酸性食物和碱性食物。从营养的角度看，酸性食物和碱性食物的合理搭配是身体健康的保障。
食物酸碱一览表 ：
强酸性食品：蛋黄、奶酪、甜点、白糖、金枪鱼、比目鱼。
中酸性食品：火腿、培根、鸡肉、猪肉、鳗鱼、牛肉、面包、小麦。
弱酸性食品：白米、花生、啤酒、海苔、章鱼、巧克力、空心粉、葱。
强碱性食品：葡萄、茶叶、葡萄酒、海带、柑橘类、柿子、黄瓜、胡萝卜。
中碱性食品：大豆、蕃茄、 香蕉、草莓、蛋白、梅干、柠檬、菠菜等。
弱碱性食品：红豆、苹果、甘蓝菜、豆腐、卷心菜、油菜、梨、马铃薯。
大部分人对食物酸碱性的认识十分模糊，认为吃起来酸酸的柠檬就是酸性的。其实，食物的酸碱性不是用简单的味觉来判定的。所谓食物的酸碱性，是指食物中的无机盐属于酸性还是属于碱性。食物的酸碱性取决于食物中所含矿物质的种类和含量多少的比率而定：钾、钠、钙、镁、铁进入人体之后呈现的是碱性反应;磷、氯、硫进入人体之后则呈现酸性。
碱性食物主要分为：
一、蔬菜、水果类;
二、海藻类;
三、坚果类;
四、发过芽的谷类、豆类。
要避免或减少以下酸性食物的摄取：
一、淀粉类;
二、动物性食物;
三、甜食;
四、精制加工食品(如白面包等);
五、油炸食物或奶油类;
六、豆类(如花生等)

Ⅳ 关于细胞膜通透性的检测方法，有哪些

当细胞膜的通透性发生改变时，一些正常情况下不能透过细胞膜的外部物质进入细胞的量增多，正常细胞内的有些物质也易于释放到细胞外，检测细胞通透性变化的方法也就是基于这样的原理而设计的。常用的细胞膜通透性的检测方法有：
（1）死/活细胞染色法 ： 使用选择性死/活细胞染色的特殊染料如不易穿透活细胞膜的台盼兰、苯胺黑及用于活细胞着色的中性红、健那绿、亚甲蓝、甲苯胺蓝等，通过染色区分死活细胞并计数来间接判断细胞膜通透性的改变情况。该方法简单，方便，价廉；但灵敏度和精确性差。
（2）荧光标记法 ： 使用二乙酸荧光素（FDP）、碘化丙啶（PI）或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育，用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是（1）法的“荧光”版，但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。

（3）硝酸镧(La)示踪法： 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙，但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜)，也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时， 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内， 并在电镜下显示， 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
（4）LDH释放法： 在正常情况下，细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的， 但在细胞膜受损伤而通透性增加时，可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
还有一些检测指标是针对不同细胞的一些特殊成分变化而设计。原则都是检测正常细胞内、外某类些物质的比例变化情况。

Ⅵ 细胞活性检测的方法有多少种 每种的原理是什么

简单说几个把

1. 染色体法 主要在培养基中利用死活细胞对燃料亲和力不同 来判断

2. 克隆形成实验 原理是单个细胞在体外增至六代后，后代形成的细胞群体 ，通过计算其克隆形成率 来判断

3. 比色法 也是比较经典的 M,RR 活体细胞中的线粒体中的琥珀酸脱氢酶可以将M，rr还原成蓝紫色的结晶甲醋 死细胞无此功能
   

Ⅶ 简述T细胞功能测定的常用方法

免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。1．体液免疫测定主要利用抗原与相应抗体在体外发生特异性结合，并在一些辅助因子参与下出现反应，从而用已知抗原或抗体来测知未知抗体或抗原。此外，尚包括检测体液中的各种可溶性免疫分子，如补体、免疫球蛋白、循环复合物、溶菌酶等。2．细胞免疫测定法是根据各种免疫细胞（T细胞、B细胞、K细胞、NK细胞及巨噬细胞等）表面所具有的独特标志和产生的细胞因子等，测定各种免疫细胞及其亚群的数量和功能，以帮助了解机体的细胞免疫水平。体液免疫检测法1.凝集反应。颗粒性抗原（细菌或红细胞等）与相应抗体特异性结合，在电解质参与下形成肉眼可见的凝集物，称之为凝集反应。1）直接凝集反应。颗粒性抗原与相应抗体直接结合所产生的凝集现象，前者多为细胞表面的结构成分，如细菌或红细胞的表面结构抗原。⑴玻片法：多用于抗原的定性检测。⑵试管法：多用于抗体的定量检测。2）间接凝集反应。将可溶性抗原吸附于载体颗粒（如乳胶颗粒、红细胞等）的表面，称之为致敏颗粒。当致敏颗粒与相应抗体结合，即可出现凝集现象。这个反应常用于测定细菌性抗体、病毒性抗体、钩端螺旋体和梅毒螺旋体抗体及某些自身抗体（如抗核抗体、抗肾抗体、抗甲状腺抗体等）。根据凝集反应的原理，还有间接凝集抑制试验、反向间接凝集试验、协同凝集试验等。2．沉淀反应。可溶性抗原（外毒素、血清、细菌培养的滤液、组织浸出液等）与相应抗体特异性结合，在电解质参与下，形成沉淀物，称为沉淀反应。沉淀反应的抗原多为多糖、类脂、蛋白质等。1）单向扩散试验。这是一种抗原定量试验，是可溶性抗原在含抗体的琼脂介质中扩散的沉淀反应。此法常用于检测血清免疫球蛋白和补体各成分的含量。2）双向扩散试验。这是可溶性抗原与抗体在琼脂介质中相互扩散的沉淀反应。本法常用于定性试验，如检测血清免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等。单克隆抗体技术3）对流免疫电泳。对流电泳是一敏感快速的检测方法，即在电场作用下的双向免疫扩散。此法常用于检测血清中的乙型肝炎表面抗原与甲胎蛋白等。3．中和试验。特异性抗体可抑制相应抗原物质的活性，抗体使相应抗原的毒性或传染性消失的反应为中和试验。例如抗毒素中和外毒素的毒性，病毒的中和抗体可使病毒失去感染性等。诊断风湿热的抗链球菌溶血毒素“O”试验也为一种中和试验。乙型溶血性链球菌能产生一种溶解人、兔红细胞的溶血毒素“O”，该毒素的溶血毒性可被抗溶血毒素“O”抗体所中和而不出现溶血。试验时将病人血清与溶血毒素“O”混合，作用一段时间后加入人红细胞，红细胞不被溶解为阳性反应，表示病人血清中存在抗溶血毒素“O”抗体。血清抗体效价达400单位以上时提示患者曾感染乙型溶血性链球菌，有助于风湿热的诊断。4.免疫荧光法（荧光抗体法）。是应用荧光素染料（如异硫氰酸荧光黄等）来标记抗体，但不影响其活性，此种抗体称荧光抗体。用已知种类的荧光抗体浸染待检的含有抗原的细胞或组织切片，如有相应抗原存在，则抗原即与此种抗体发生特异性结合，形成复合物而粘着在细胞上，不易洗脱，在荧光显微镜下成为发出荧光的可见物，可达到诊断或定位的目的。包括直接法和间接法。5．酶联免疫吸附试验。本法的原理是利用酶（常用辣根过氧化物酶）标记的抗原或抗体，以测定被检标本中有无相应的抗原或抗体。有间接法、双抗体法、竞争法三种。6．溶血空斑试验。7．免疫印迹技术。免疫印迹或免疫转印技术(immunoblotting或Westernblot）是在Southern(1975)抗体抗原反应创建的DNA印迹术(Southernblotting）基础上发展起来的新型免疫生化技术。细胞免疫检测法近代免疫学广泛采用了细胞生物学、免疫血清学、免疫标记、免疫组化等多方面技术，不断发展和完善了一系列细胞免疫检测技术，用于检测各类免疫细胞的表面标志（包括抗原及受体）、细胞的活化、增殖、吞噬、杀伤功能、各种细胞因子的活性或含量等方面。这些技术为深入研究和认识机体免疫系统的生理、病理改变，阐明某些疾病的发病机制和临床诊治提供了有用的手段。随着细胞免疫学的迅猛发展，时有新的细胞免疫检测技术出现。二十一世纪初期，新发展的项目集中在对有关细胞因子以及细胞受体方面的检测。1．淋巴细胞转化试验。人类淋巴细胞在体外与特异性抗原（如结核菌素）或非特异性有丝分裂原（如植物血凝素，PHA）等一起孵育，T细胞即被激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可伴随有DNA、RNA、蛋白质的合成增加，最后导致细胞分裂。在光学显微镜下可计数转化后的淋巴母细胞数，也可用氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR）掺入正在分裂的淋巴细胞，用液闪测定仪来确定掺入量以确定淋巴细胞转化率。2000年开始出现一种不用同位素，又可用仪器测量的淋巴细胞增殖反应的检查法，称为MTT检测法。MTT是一种甲氮唑盐，它是细胞线粒体脱氢酶的底物，细胞内的酶可将MTT分解产生蓝黑色成分。该产物的多少与活细胞数成正比，结果可用酶标仪(595nm）测量光密度，作为MTT法的指标。2．E-花环法。人类T细胞表面有羊细胞受体(CD2）能与羊红细胞结合形成玫瑰花样结构。即将分离液分离出的外周的单个核细胞悬液与羊红细胞在体外混合，经37℃培养5～10分钟后放4℃过夜，取细胞悬液计数，外周血淋巴细胞中约70%～80%淋巴细胞结成花环即为T细胞，此法可用来分离T细胞。3．T细胞亚群检测。4．细胞毒试验。Tc细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞等对其靶细胞有直接的细胞毒（杀伤）作用。抗体制备常用的检测方法是51Cr（铬）释放法，将51Cr-Na2CrO4盐水溶液与靶细胞（不同的细胞需不同的靶细胞，如NK细胞的靶细胞为K562），于37℃培养1小时左右，51Cr即进入靶细胞，与胞浆结合，洗去游离的51Cr后，即可得到51Cr标记的靶细胞，将待测细胞毒的细胞与51Cr标记的靶细胞混合（比例约为50:1或100:1），靶细胞杀伤越多，释放到上清液中的游离51Cr就越多，且不能再被其他细胞吸收，用γ射线测量仪检测上清液中的cpm值，可计算出待检细胞杀伤活性高低。细胞毒的检测对肿瘤免疫有较大价值。5．巨噬细胞吞噬功能的测定。将中药(10%斑蝥）乙醇浸出液浸渍的滤纸（1cm2大小）置于受试者前臂屈侧皮肤上，4～5小时后取下滤纸。48小时内皮肤局部可水泡，内含巨噬细胞。取水泡液0.5ml加鸡红细胞悬液0.01ml，37℃经30分钟后作涂片、染色与镜检，计算吞噬百分率及每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数。本试验有助于肿瘤病情及疗效的观察。6．移动抑制试验。致敏淋巴细胞与其特异性抗原再次接触时，可以产生移动抑制因子(MIF）。这种因子可以抑制巨噬细胞和中性粒细胞的移动，使之定位于局部而增强其免疫作用。本试验用来观察受检者淋巴细胞在体外受特异性抗原刺激后，有无MIF产生，以测定机体对某种抗原的特异性细胞免疫反应的功能。7．时间分辨荧光测量技术。时间分辨荧光测量技术(time-resolvedfluorometry,TrF）是一项新型的超微量非放射性分析技术。该技术的敏感性和特异性与放射性核素测量技术相仿，但无放射测量的弊端，故问世虽短，进展却极为迅速，有取代放射测量之势。8．细胞因子检测技术。细胞因子的检测，2005年起在中医临床及实验室中已广泛应用。9．细胞受体的检测。受体是细胞表面标志之一，通过对受体的检测，可以了解细胞的功能，并为某些疾病的发病机制提供一定的理论依据。

Ⅷ 细胞活力测定常用的简便方法是

MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
缺点：由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。
细胞活力常用百分比表示，活力的大小对试验结果有很大影响。细胞活力的测定有许多方法，最简便常用的方法是台盼蓝（trypanblue）染色法。台盼蓝又称锥蓝，是一种阴离子型染料，这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色。

Ⅸ 细胞免疫功能检测常用有哪几种方法

细胞免疫（CMⅠ）是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定，因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂，且很难标准化。
一、迟发型过敏反应的体外检测方法
皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应（DTH）的两种常用方法。皮肤试验中诱发对曾经使病人致敏的抗原的再次应答，而接触性过敏是测试受者对从未接触过的物质发生致敏的能力。
1．皮肤试验 用皮肤试验诊断DTH，常用的抗原有结核菌纯蛋白衍生物（PPD）、腮腺炎病毒、念珠菌素等，在人类试验时在前臂皮内注射少量可溶性抗原，24～48小后，测量红肿硬结的大小，硬结直径大于10mm即被看作为阳性。表明受试者对该病原菌有了一定的细胞免疫能力，若皮试无反应，可用更高浓度的抗原重复试验，若仍无反应即为阴性，需排除皮试技术误差，也可能受试者从未接触过此抗原，也可能由于细胞免疫功能缺损，或由于细胞免疫功能缺损，或由于严重感染（麻疹、慢性播散性结核）造成的无反应性。
2．接触性过敏常应用低分子量化合物如二硝基氯苯（DNCB）诱生接触性过敏。化合物与皮肤蛋白质结合而导至DTH反应。在动物试验时，初次皮肤上涂抹DNCB后间隔7～10天再激发刺激，则皮肤出现即为阳性。此试验人类已不使用。
二、细胞免疫的体外检测方法
体外检测淋巴细胞的数量和功能，最易采集的是血标本，首先需分离或纯化淋巴细胞，一般使用萄聚糖-泛影葡胺配成比重为1.077的淋巴细胞分层液，当将血液重叠于淋巴细胞分层液之上离心时，由于红细胞（1.092）、多形核白细胞（1.090）、淋巴细胞（1.070）的比重不同而相互分开。淋巴细胞和单核细胞在血浆和分层液交界处形成一薄层。仔细分出这一薄层的细胞，其中淋巴细胞占80%，单核细胞占20%，淋巴细胞中T细胞占80%，B细胞占4%～10%，其作为非DT、非B细胞。
1．T细胞计数
（1）E花环法：人类T细胞表面有SRBC受体（CD2）能与SRBC结合形成玫瑰花环样结构，将经分层液分离现的RBM悬液与SRBC在含有血清的平衡盐水中混合，经37℃培养5～10分钟放4℃过夜，取细胞悬计数，外周血淋巴细胞中约70%～80%淋巴细胞结成花环即为T细胞。目前此方法已用来分离T细胞，而不用做T细胞计数。
（2）用单克隆抗体计数T细胞：将人的PBM分成三等份，分别用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的单克隆抗体作第一抗体与细胞结合，再用FITC标记的兔抗小鼠IgG抗体作第二抗体进行间接免疫荧光染色，在荧光显微镜下或流式细胞仪检测结果，在PBM中被CD3抗体染上荧光的细胞称为CD3 细胞即总T细胞。正常人在PBM中T细胞占70%～80%。正常人的CD4 细胞和CD8 细胞之和应与CD3 细胞数一致。CD4 细胞与CD8 细胞的比值正常人约为2/1而艾滋病患者则比值小于1.7。
2．T细胞活化试验 T细胞能被非特异的物质称为有丝分裂原所激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可伴随有DNA、RNA、蛋白质的合成增加，最图导致细胞分裂。在光学显微镜下可计数转化后的淋巴细胞数，也可用氚标记的胸腺嘧啶核苷（3HTdR）掺入正在分裂的淋巴细胞，用液闪测定仪检查掺入正在分裂的淋巴细胞，用液测量仪检查掺入的3H-TdR的多少确定淋巴细胞转化率。最近有一种不用同位素，又可用仪器测量的淋巴细胞增殖反应的检查法，称为MTT检测法，MTT是一种甲氮唑盐，它是细胞线粒体脱氢酶的底物，细胞内的酶可将MTT分解产生蓝黑色甲（fromazan）产物。该产物的多少与活性细胞数正相关。结果可用酶标检测仪（595mm）测量汇丰银行密度，做为MTT法的检查指标。此法的结果与3H-TdR掺入法平行，并能反应试验中的活细胞数。
3．细胞毒试验 TC细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞对其靶细胞有直接的细胞毒（杀伤）作用。常用的栓测细胞毒效应的方法是51Cr-Na2Cro4盐水溶液与靶细胞胞混合，于37℃培养1小时左右，51Cr即可进入靶细胞，与胞浆蛋白结合，洗去游离的51Cr后，即可得到51Cr标记的靶细胞，将待检细胞毒性的细胞与51Cr标记的靶细胞混合（比例约为50：1或100：1）靶细胞被杀伤越多，释放到上清液中的液游离的51Cr越多，且不能被其他细胞吸收。用γ射线测量仪检测上清液中的cpm值，即可计算出待检细胞杀伤活性的高低。
细胞毒试验检测Tc细胞效应功能是否健全，及经IgG介导的ADCC效应，或NK细胞在抗肿瘤免疫中的作用是有意义的。
4．混合淋巴细胞的反应（MIR） 是体外研究T细胞的较好的方法，双向MLR常被用来筛选骨髓移植的供体。来自不同供体的淋巴细胞分别与病人的淋巴细胞混合培养4～5天，在最后8小时掺入51TdR掺入法测T细胞的反应性。或用细胞毒法观察受刺激的T细胞与活的靶细胞混合（靶细胞来自与刺激细胞相同的个体）如果T细胞受刺激后产生了细胞毒T细胞，可杀死活的细胞，根据靶细胞释放51Cr的多少算出T细胞移动抑制因子）和LIF（白细胞移动抑制因子）来评估细胞免疫功能。近年来应用测定IL-2的免疫酶技术，操作简单，并能定量以取代了MIF和LIF的测定。单个核细胞与分裂原一起培养24小时，然后测定清液中的IL-2活性。在细胞免疫功能缺损时，特别是AIDS病人，IL-2分泌明显降低。而有些疾病，如多发性硬化、类风湿关节炎、移植排斥反应等病人体内血清中IL-2水平升高，表明病人T细胞活性增高。发生移植排斥反应的病人尿中IL-2也可升高。
也可用酶联免疫吸附试验测定各种体液中活化的T细胞脱落的IL-2受体（CD25），一般来说IL-2的水平和IL-2受体水平是平行的，IL-2和IL-2受体的检测可用于对某些疾病的监测，如移杆排斥、自身免疫病以及接受免疫抑制治疗的病人。
对体外培养的细胞进行细胞因子产生能力检测是检查细胞培养上清液中细胞因子的生物活性或抗原性。现已可用核酸杂交技术，即从组织中或细胞中提取RNA，与同位素或酶标记的该种细胞因子的cDNA探针作分子杂交试验，即印迹（dot blotting）或Northern印迹，若查出有某种因子的mRNA存在，即说明该细胞在所处培养条件下有产生某种细胞因子的能力。

Ⅹ 怎样测验身体体液酸碱性

酸性体质的形成是一个漫长的过程，对身体的影响也是一个从量变到质变的过程。当酸性不很强时，反应出来的是亚健康状态，进一步酸化，就会出现各种疾病。这几乎是所有内源性慢性疾病的患病原因。比如，癌症病人的体液都是酸性的，病情越重，酸性越强。因为癌细胞只能在酸性体液和缺氧的条件下，才会疯狂的生长，形成肿瘤。糖尿病人、痛风病人、心血管病病人的体液都是酸性的。所以说，酸性体质是百病之源。
同理，疾病的治疗必须从根本上改变酸性体质。
什么是酸性体质
人的身体构成中约有70％是水分，成为体液。体液含有各种人体不可缺少的离子、化合物以及代谢物。生命活动的大多数生化反应都是在水溶液中进行的。
体液包括细胞内液（占体液的2/3）和细胞外液（占体液1/3）。细胞外液包括血液、淋巴液、组织液、脑脊液和各种分泌液（如唾液、尿液、眼泪、汗液、胃液、精液、宫颈液等）。
正常人的体液平均PH值是7.0——7.4，为中性或弱碱性。低于这个平均值，就是酸性体质。
如何判断自己是酸性体质
第一种办法是自我感觉，如果长期体力不支、容易疲劳、形容憔悴或有其他亚健康特征，无疑说明你的体液在酸化。
第二种办法是用PH试纸检测。最简单的是连续三天清晨空腹检测唾液，如PH平均值小于7.0即为酸性体质。
需要说明的是，血液的PH值波动范围极小，为7.35－7.45。小于7.35即为酸性，小于7.0，表明病情极为严重。
形成酸性体质主要有三个因素：第一，代谢因素。人体体内每时每刻都在进行新陈代谢，产生的代谢物是酸性的。第二，饮食因素。绝大多数人的日常饮食都是酸性食物为多，如肉类、蛋类、奶类、酒类、碳酸饮料类等等，这些食物消化后在体内留下硫、氮、磷、氯等酸性物质，在体内形成酸根，这是导致酸性体质形成的最重要的原因。第三，环境因素。大环境的被污染同样影响着体内小环境，破坏了体内酸碱平衡体系，加速了体液的酸化