哪些方法可以求得米氏常數

① 米氏方程度表達式是什麼，如何求出vmax和km

米氏常數Km表示的是當酶促反應速率達到最大反應速率一半時的底物濃度。通過米氏方程：v = Vmax*[S]/(Km+[S])，我們可以計算出Vmax的值。如果將某個特定的底物濃度[S]代入方程，即可求得該濃度下的反應速率v。例如，假設已知某一底物濃度為10^-4 mol/L，代入方程後可以計算得出v的具體數值。

具體地，如果已知Vmax為134.144 μmol/(L·min)，並且代入[S] = 10^-4 mol/L，那麼可以計算出v的值為5.366 μmol/(L·min)。這表明在該底物濃度下，酶促反應速率達到了最大速率的一半。

米氏方程不僅有助於我們理解酶的動力學特性，還能夠幫助我們確定酶的特異性以及底物的親和力。通過調整底物濃度，我們可以觀察到酶促反應速率的變化趨勢，進而確定Km的具體數值。這種研究方法對於生物化學領域的研究具有重要意義。

在實際操作中，通常需要通過實驗來確定Km和Vmax的具體數值。實驗設計時，需要保證底物濃度的逐步增加，並記錄下不同底物濃度下的反應速率。通過擬合米氏方程，可以得到最符合實驗數據的Km和Vmax值。

值得注意的是，Km和Vmax的計算結果會受到實驗條件的影響，因此在進行相關研究時，需要嚴格控制實驗條件，以確保結果的准確性和可靠性。

通過上述方法，我們可以更好地理解酶促反應的動力學特性，這對於深入研究酶的催化機制以及開發新的葯物具有重要意義。

② 常見酶的米氏常數

常見酶的米氏常數：2.5。

米氏常數是酶的特徵性常數，可用來表示酶和底物親和力的大小。米氏常數與底物濃度和酶濃度無關，而受溫度和pH值的影響，競爭性抑制劑米氏常數增大，最大反應速度不變；非競爭性抑制劑米氏常數不變，最大反應速度減小；反競爭性抑制劑米氏常數減小，最大反應速度減小。

Km的求法

Km即是當反應速度為最大反應速度一半時的底物濃度。從v—[s]矩形雙曲線上可得V，再從V/2處可求得Km值，但實際上，即使用很大的底物濃度，也只能得到趨近於V的反應速度，而達不到真正的V，因此測不到准確的Km值，為了得到准確的Km值，可以把米氏方程式加以改變，使之成為斜截式：y=kx+b的直線方程，然後用圖解法求出Km值。

以上內容參考：網路-米氏常數

③ 請問米氏常數的求法。

你可以用吸光值代替反應速度，因為在一定范圍內，吸光值與物質濃度成線性關系，而生成物濃度又與反應速度成正比。米氏常數的定義是反應速度為最大反應速度一半時的底物濃度，而最大吸光值的一半時的底物濃度可以近似等於最大反應速度一半的底物濃度。因此你將反應速度一項換作吸光值即可

④ 【生物化學】求米氏方程式推導過程

米氏方程
v＝Vmax[S]/（Km+[S]，這個方程稱為Michaelis-Menten方程，是在假定存在一個穩態反應條件下推導出來的，其中 Km 值稱為米氏常數，Vmax是酶被底物飽和時的反應速度，[S]為底物濃度。由此可見Km值的物理意義為反應達到1/2Vmax的底物濃度，單位一般為mol/L，只由酶的性質決定，而與酶的濃度無關。可用Km的值鑒別不同的酶。當底物濃度非常大時，反應速度接近於一個恆定值。在曲線的這個區域，酶幾乎被底物飽和，反應相對於底物S是個零級反應。就是說再增加底物對反應速度沒有什麼影響。反應速度逐漸趨近的恆定值稱為最大反應速度Vmax。對於給定酶量的Vmax可以定義為處於飽和底物濃度的起始反應速度n。對於反應曲線的這個假一級反應區的速度方程可寫成一種等價形式：
n（飽和時）＝Vmax＝k[E][S]0＝k[E]total＝k cat[ES]
速度常數k等於催化常數k cat，k cat是ES轉化為游離的E和產物的速度常數。飽和時，所有的E都是以ES存在。方程（3.2）中還有另一個簡單的關系式：Vmax＝k cat [E]total。從中得出：k cat＝Vmax / [E]total。k cat的單位是s－1。催化常數可以衡量一個酶促反應的快慢。
米氏常數Km是酶促反應速度n為最大酶促反應速度值一半時的底物濃度。這可通過用[S]取代米氏方程中的Km證明，通過計算可得n＝Vmax /2。
Km和Vmax的意義
①當ν=Vmax/2時，Km=[S]。因此，Km等於酶促反應速度達最大值一半時的底物濃度。
②當k-1>>k+2時，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。
③Km可用於判斷反應級數：當[S]<0.01Km時，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]>100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；當0.01Km<[S]<100Km時，反應處於零級反應和一級反應之間，為混合級反應。
④Km是酶的特徵性常數：在一定條件下，某種酶的Km值是恆定的，因而可以通過測定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來判斷是否為不同的酶。
⑤Km可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。
⑥Km可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。
⑦Vmax可用於酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間內每個酶分子催化底物轉變為產物的分子數。
⑷Km和Vmax的測定：主要採用Lineweaver-Burk雙倒數作圖法和Hanes作圖法。