從唾液中檢測乳鐵蛋白的方法

⑴ 乳鐵蛋白的檢測方法

原理：混有乳鐵蛋白(LF) 抗原的瓊脂糖傾入平板，凝凍後打一些小孔，接入LF樣品。隨著抗原呈放射形擴散， 在以小孔為中心的環狀區域形成抗原�抗體反應沉澱帶， 沉澱帶在RID染色液的作用下被染色，環的直徑與抗體(LF)的濃度成正比。通過標准曲線，可以測出樣品中的(LF) 濃度。
操作步驟：將預塗過的玻璃板置於水平桌面上，在瓊脂糖緩沖液中 加入150ml(抗血清，仔細混合後將溶液倒在玻璃板中心。表面張力可以阻止溶液溢出，必要時用試管上緣幫助溶液分散以確保溶液均勻分散到玻璃板的各邊。 將凝膠在室溫下固化15min，然 後置於恆濕器中在冰箱中保存1h 。將打孔器與抽真空設備連接，並利用帶模板的隔板架在凝膠上 打16個小孔。用注射器小心地將12.5ml樣品注入玻璃板中，將凝膠置於恆濕器中，室溫下在水平桌面上放置48h後清洗凝膠。選擇正確角度，2次精確測量環的直徑，以此來測定LF濃度。
結果計算：每毫升LF的濃度(×10-6 ) =
式中：A為LF標准溶液(mg/mL) ；
W為質量(mg) 。