抑菌率的檢測方法

Ⅰ 塑料抗菌性檢測方法

塑料抗菌性檢測方法

抗菌塑料是具備抗菌功能的塑料，需要同時達到作為塑料使用時的性能要求和抗菌要求。本文只關注塑料抗菌性檢測。

目前國內外抗菌塑料的檢測標准主要有ASTME 2149(2010)、ISO 22196(2007)、JIS Z2801(2006)、QB/T 2591(2003)、JC/T 939(2004)和GB 21551.1(2008)。

根據抗菌塑料的親疏水性、形態結構和抗菌劑的類型，可運用不同的測試方法。檢測方法主要是根據微生物對樣品敏感程度來進行分類。

最常用的評價抗菌性能的兩個指標是抗菌率和抑菌環。

抗菌率的計算見式(1)，是一種定量表徵的測試方法，主要有振盪法和貼膜法，其中貼膜法用於表面平整試樣的性能測定，而振盪法則用於表面不規則樣品或是塑料母粒的抗菌性能測定。

抗菌率/%=（空白試樣上的菌數-抗菌試樣菌數）/空白樣菌數×100…………式（1)

抗菌環是一種半定量式表徵方法，通過測量抗菌環的大小來評價抗菌能力的強和弱，該方法簡便快速，但是對於不同的抗菌劑，數據的可比性較差，實際使用的過程中存在一定的局限性。

Ⅱ 如何進行農葯抑菌活性測定

紋曲寧分別與9種不同的表面活性劑組合混用,通過測定製劑中的活菌含量和制劑對水稻紋枯病菌的活性,篩選出5種不影響枯草芽孢桿菌活性的表面活性劑組合A、B、C、D和E.紋曲寧分別與這5種表面活性劑按重量比100 ∶3混配後,降低了葯劑稀釋液的表面張力,在1∶500倍的稀釋液中,表面活性劑達到和超過了臨界膠束濃度,增加了枯草芽孢桿菌在水稻表面的滯留量.田間試驗結果表明,紋曲寧中加入適宜的表面活性劑後,能提高紋曲寧對水稻紋枯病的防治效果.
噻唑類殺菌劑（thiazoles），市場上常見的「噻唑類殺菌劑」主要有：噻菌銅（龍克菌）、噻枯唑（葉枯唑）、噻菌茂、噻唑鋅、噻森銅、噻唑菌胺（ethaboxam）、土菌靈（etridiazole）、辛噻酮（octhilinone）、苯噻硫氰（benthiazole）。

噻唑菌胺（ethaboxam）一種中等內吸性殺菌劑。主要防治卵菌病害。對不同的病菌活性有差異。該葯低毒、無致畸性，對蜜蜂安全。與甲霜靈、嘧菌酯無交互抗葯性。

拌種靈（ amicarthiazol ），「2-氨基-4-甲基-5-甲醯苯胺噻唑]」，一種高效，廣譜的內吸性殺菌劑，屬於噻唑類殺菌劑。
拌種靈通常主要用在防治禾穀類作物由擔子菌引起的多種病害。該葯劑在細菌病害防治上的應用主要是在中國，自1980年以來相繼報道了拌種靈對水稻白葉枯病菌、柑橘潰瘍病菌等細菌病害具有較好的防治效果[1,2] 。噻唑類葯劑因其復雜的作用機制一直被視為研究的熱點，如烯丙異噻唑在離體條件下幾乎沒有抑菌活性，只能在施用水稻上才能表現防病效果[3]；敵枯唑在離體和活體上表現不同的作用機制[4]。同時拌種靈又含有與萎銹靈相同的毒性結構——苯胺基甲醯基，目前萎銹靈的作用機制業已明確，主要干擾菌體呼吸過程中線粒體呼吸鏈上復合物處琥珀酸—輔酶Q之間氧化還原酶系，抑制生物能量的合成[5]。

benthiavalicarb-isopropyl，由組合化學和Ihara化學工業公司聯合開發的一種含氟苯並噻唑-氨基甲酸異丙酯的新型殺卵菌劑。具有保護、治療活性，持效性、耐雨水沖刷性和滲透性好。
1.把實驗室用的普通濾紙用打孔器打成0.5cm直徑的圓片，裝在試管中密封滅菌（121度，20分鍾）。
2.將已經培養好的菌製成一定濃度的懸浮液，取1ml該菌懸液至滅過菌的（121度，20分鍾）培養皿中，倒入適量（約4毫米厚吧）已滅菌的培養基（溫度約45度，用手摸瓶壁不感覺燙手即可），輕輕轉動培養皿，使培養基與菌液混勻，靜置凝成平板。
3.將用於試驗的農葯配製成幾個所需的濃度，用無菌鑷子夾起一片濾紙放入葯液中浸透，夾出時在容器邊緣停靠片刻，濾掉多餘的葯液，把濾紙片放在平板中凝好的培養基的中心，用鑷子稍用力按一下，使之與培養基充分緊貼。
4.按上述方法，每個濃度做3個重復，以滅菌水浸濕的濾紙片做空白對照。
5.在適當溫度下培養一定時間後觀察，用直尺或游標卡尺測量抑菌圈的大小，計算抑菌率就OK了！

Ⅲ 抑菌試驗的常用方法

A、抗菌葯物貯存液制備
1.1.1.抗菌葯物貯存液制備 抗菌葯物貯存液濃度不應低於1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍於最高測定濃度。溶解度低的抗菌葯物可稍低於上述濃度。抗菌葯物直接購自廠商或相關機構。所需抗菌葯物溶液量或粉劑量可公式進行計算。例如：需配製100 ml濃度為1280μg/ml的抗生素貯存液，所用抗生素為粉劑，其葯物的有效力為750μg/mg。用分析天平精確稱取抗生素粉劑的量為182.6 mg。根據公式計算所需稀釋劑用量為：（182.6 mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然後將182.6 mg抗生素粉劑溶解於107.0ml稀釋劑中。制備抗菌葯物貯存液所用的溶劑和稀釋劑見表5。配製好的抗菌葯物貯存液應貯存於-60℃以下環境，保存期不超過6個月。
B、葯敏試驗用抗菌葯物濃度范圍
1.1.2.葯敏試驗用抗菌葯物濃度范圍 根據NCCLS抗菌葯物敏感性試驗操作標准，葯物濃度范圍應包含耐葯、中介和敏感分界點值，特殊情況例外。
C、培養基
1.1.3. 培養基 NCCLS推薦使用Mueller-Hinton（MH）肉湯，pH7.2~7.4。需氧菌及兼性厭氧菌在此培養基中生長良好。在測試葡萄球菌對苯唑西林的敏感性時，應在肉湯中加入2%（W/V）氯化鈉，按製造廠家的要求配製需要量的MH肉湯。嗜血桿菌屬菌使用HTM肉湯，肺炎鏈球菌和其它鏈球菌使用含2%~5%溶解馬血的MH肉湯。
D、接種物的制備
1.1.4.接種物的制備 有2種方法配製接種物，一是細菌生長方法，用接種環挑取形態相似待檢菌落3-5個，接種於4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉湯中，35℃孵育2-6h。增菌後的對數生長期菌液用生理鹽水或MH肉湯校正濃度至0.5麥氏比濁標准，約含1~2×108CFU/ml。二是直接菌落懸液配製法，對某些苛養菌，如流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌和鏈球菌及甲氧西林耐葯的葡萄球菌等菌株，推薦直接取培養18~24h的菌落調配成0.5麥氏比濁標準的菌懸液。用MH肉湯將上述菌懸液進行1∶100稀釋後備用。注意應在15分鍾內接種完配製好的接種物，並取一份接種物在非選擇性瓊脂平板上傳代培養，以檢查接種物純度。
註：在臨床微生物學檢驗中，麥氏比濁法常用於細菌鑒定、葯敏實驗前配置菌液時大致判斷菌液濃度的一種方法，通常認為，如將配菌液濃度配成0.5麥氏比濁管時，相當於1.5×108細菌數/ml，由於方法本身就是一種估計的方法，所以盡管不同細菌大小差異很大，除了真菌孢子，細菌的差別不大，結果不會有影響。但是，標准比濁管的濃度，是葯敏實驗結果的影響因素之一。
E、附：0.5麥氏比濁管配製方法
0.048M BaCL2 (1.17% W/V BaCL2 . 2H2O) 0.5ml
0.36N H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml
將二液混合，置螺口試管中，放室溫暗處保存。用前混勻。
有效期為6個月。
F、稀釋抗菌葯物的制備及菌液接種
1.1.5.稀釋抗菌葯物的制備及菌液接種 取無菌試管（13×100mm）13支，排成一排，除第1管加入1.6mlMH肉湯外，其餘每管加入MH肉湯1ml，在第1管加入抗菌葯物原液（如1280μg/ml） 0.4ml混勻，然後吸取1ml至第2管，混勻後再吸取1ml至第3管，如此連續倍比稀釋至第11管，並從第11管中吸取1ml棄去，第12管為不含葯物的生長對照。此時各管葯物濃度依次為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μg/ml。然後在每管內加入上述制備好的接種物各1ml，使每管最終菌液濃度約為5×105CFU/ml。第1管至第11管葯物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、05、0.25、0.125μg/ml。
G、孵育
1.1.6.孵育 將接種好的稀釋管塞好塞子，置35℃普通空氣孵箱中孵育16~20h；嗜血桿菌和鏈球菌在普通空氣孵箱中孵育20~24h；對可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐萬古黴素腸球菌應持續孵育滿24h。
H、結果判斷與解釋
1.1.7.結果判斷與解釋 在讀取和報告所測試菌株的MIC前，應檢查生長對照管的細菌生長情況是否良好，同時還應檢查接種物的傳代培養情況以確定其是否污染，質控菌株的MIC值是否處於質控范圍。以肉眼觀察，葯物最低濃度管無細菌生長者，即為受試菌的MIC。甲氧苄胺嘧啶或磺胺葯物的肉湯稀釋法終點判斷，與陽性生長對照管比較抑制80%細菌生長管葯物濃度為受試菌MIC。
根據NCCLS推薦的分界點值標准，判斷耐葯（resistant, R）、敏感(susceptible, S)或中介（intermediate, I）。S表示被測菌株所引起的感染可以用該抗菌葯物的常用劑量治療有效，禁忌症除外。R指該菌不能被抗菌葯物的常用劑量在組織液內或血液中所達到的濃度所抑制，或屬於具有特定耐葯機理（如β-內醯胺酶），所以臨床治療效果不佳。I是指MIC接近葯物的血液或組織液濃度，療效低於敏感菌。還表示被測菌株可以通過提高劑量（如β-內醯胺類葯物）被抑制，或在葯物生理性濃集的部位（如尿液）被抑制。另外，中介還作為「緩沖域」，以防止由微小的技術因素失控，所導致較大的錯誤解釋。 A、抗菌葯物和培養基制備
1.2.1.抗菌葯物和培養基制備 同常量肉湯稀釋法。
B、MIC板制備
1.2.2.MIC板制備 無菌操作，將倍比稀釋後不同濃度的抗菌葯物溶液分別加到滅菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第11孔加葯液，每孔10μl，第12孔不加葯作為生長對照，冰凍乾燥後密封，-20℃以下保存備用。
C、接種物制備
1.2.3.接種物制備 將用生長法或直接菌懸液法制備的濃度相當於0.5麥氏比濁標準的菌懸液，經MH肉湯1∶1000稀釋後，向每孔中加100μl，密封後置35℃普通空氣孵箱中，孵育16~20h判斷結果。當試驗嗜血桿菌屬，鏈球菌屬時，孵育時間為20~24h，試驗葡萄球菌和腸球菌對苯唑西林和萬古黴素的葯敏試驗時孵育時間必須滿24h。此時，第1孔至第11孔葯物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。
D、結果判斷
1.2.4.結果判斷 以在小孔內完全抑制細菌生長的最低葯物濃度為MIC。當陽性對照孔（即不含抗生素）內細菌明顯生長試驗才有意義。當在微量肉湯稀釋法出現單一的跳孔時，應記錄抑制細菌生長的最高葯物濃度。如出現多處跳孔，則不應報告結果，需重復試驗。通常對革蘭陰性桿菌而言，微量肉湯稀釋法測得的MIC與常量肉湯稀釋法測得的結果相同或低一個稀釋度（1孔或2倍）。 A、介紹
瓊脂稀釋法是將不同劑量的抗菌葯物，加入融化並冷至50℃左右的定量MH瓊脂中，製成含不同遞減濃度抗菌葯物的平板，接種受試菌，孵育後觀察細菌生長情況，以抑制細菌生長的瓊脂平板所含最低葯物濃度為MIC。本法優點是可在一個平板上同時作多株菌MIC測定，結果可靠，易發現污染菌；缺點是制備含葯瓊脂平板費時費力。
B、培養基制備
2.1.培養基制備 使用MH瓊脂，按商品說明書進行配製，pH7.2~7.4。淋病奈瑟菌使用GC瓊脂基礎加1%添加劑；其它鏈球菌使用含5%（V/V）綿羊血的MH瓊脂（當試驗磺胺葯時，使用溶解的馬血）。
C、含葯瓊脂平板制備
2.2.含葯瓊脂平板制備 根據實驗設計，將已倍比稀釋的不同濃度的抗菌葯物分別加入已加熱溶解，並在45~50℃水浴中平衡的MH瓊脂中，充分混勻傾倒滅菌平皿，瓊脂厚度3~4mm。通常按1∶9比例配製葯物瓊脂平板，根據需要來選擇葯物濃度范圍。配製好的含葯瓊脂平板應裝入密封塑料袋中，置2~8℃冰箱可貯存5天。
D、接種物制備與接種
2.3.接種物制備與接種 制備濃度相當於0.5麥氏標准比濁管的菌懸液，再1∶10稀釋，以多點接種器吸取制備好菌液（約1~2μl）接種於瓊脂平板表面，每點菌數約為104CFU，形成直徑為5~8mm的菌斑。接種好後置35℃孵育16~20h（甲氧西林耐葯葡萄球菌、萬古黴素耐葯腸球菌孵育時間應滿24h），觀察結果。奈瑟菌屬、鏈球菌屬細菌置5%二氧化碳、幽門螺桿菌置微需氧環境中孵育。
E、結果判斷
2.4.結果判斷 將平板置於暗色、無反光物體表面上判斷試驗終點，以抑制細菌生長的最低葯物濃度為MIC。在含甲氧苄胺嘧啶或磺胺瓊脂平板上可見輕微細菌生長，與生長對照比較抑制80%以上細菌生長的最低葯物濃度作為終點濃度。
如果出現有2個以上菌落生長於含葯濃度高於終點水平的瓊脂平板上，或低濃度葯物瓊脂平板上不長而高濃度葯物瓊脂平板上生長現象，則應檢查培養物純度或重復試驗。 紙片擴散法(K-B法)又稱瓊脂擴散法
K-B法葯敏試驗時接種物配製有兩種方法。
第一種是肉湯增菌法（對數生長法），是用接環挑取3-5個細菌菌落入肉湯增菌管中進行增菌4-6小時，然後用生理鹽水或肉湯對增菌管中的培養物進行稀釋校正使其濃度達到0.5麥氏比濁標准（因為經過增菌培養其培養物濃度一般都高於此標准）。
第二種方法是直接菌落法：從孵育18-24小時的非選擇性培養基上，挑取3-5菌落，直接用肉湯或鹽製成懸液作為接種，然後將濁度調整至0.5麥氏比濁標准。此法是檢測苛養菌（如嗜血桿菌、淋病奈瑟菌和鏈球菌）和潛在的對甲氧西林耐葯的葡萄球菌的推薦方法。
將菌製成菌懸液用無菌棉簽蘸取菌液在管壁上擠去多餘菌液 ,塗布整個M2H平板表面 ,反復 3 次 ,每次將平板旋轉60 度 ,保證塗布均勻 ,35 ℃培養後菌落呈半融合狀態 ,否則影響葯敏結果。
K-B 法指定用 M-H瓊脂平板 ,應用直徑90cm平皿 ,在水平的無菌台上傾倒 ,准確量取高壓滅菌後的M2H瓊脂液25ml ,使之瓊脂板厚度為 4mm。否則厚度過高 ,使含葯物紙片的葯物半球形擴散的體積加大 ,導致假耐葯;反之導致假敏感。
要求紙片直徑 6.00～6.35mm每片吸水量約012 μl ,紙片的葯物含量必須與 K 2B 法規定的
一致 ,用前必須做質量鑒定 ,質量合格方可使用。紙片的保存尤為重要 ,一般要求保存在有乾燥劑的容器內低溫保存 ,紙片取出後須放室溫10min後方可打開 ,否則空氣中的水份冷凝在紙片上易潮解 ,使葯物失效影響葯敏試驗結果。 E試驗是指濃度梯度瓊脂擴散試驗，其原理基本同擴散法，即濃度呈連續梯度的抗菌葯物從塑料試條中向瓊脂中擴散，在試條周圍抑菌濃度范圍內受試菌的生長被抑制，從而形成透明的抑菌圈。E試驗綜合了稀釋法和擴散法的原理和特點，同時還彌補了二者的一些不足，可以像稀釋法一樣直接定量測出抗菌葯物對受試菌的MIC。
A、培養基、菌液制備和接種
3.1.培養基、菌液制備和接種 同紙片擴散法。
B、貼E試驗條
3.2.貼E試驗條 同紙片擴散法，E試驗條的刻度面朝上，不得貼反，一旦接觸瓊脂後不得再移動。直徑150mm的平皿內可放置6根E試驗試條，90mm者一般只能放置1根。
C、孵育時間和溫度
3.3.孵育時間和溫度 同紙片擴散法。
D、結果閱讀
3.4.結果閱讀 孵育後圍繞試條可形成一個橢圓形的抑菌圈，在抑菌圈和試條的橫切相交處試條上的讀數刻度即是測定抗菌葯物對受試菌的MIC。閱讀時應注意的問題見供應商的產品說明書。

Ⅳ 洗手液成分有哪些

洗手液的成分為：

1、去污成分是為提供去污作用和豐富的泡沫，主要是陰離子表面活性劑以及少量的非離子和兩性離子表面活性劑。 陰離子表面活性劑有皂、十二烷基硫酸鈉、Q一烯烴磺酸鹽、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸 鹽、Q一磺基脂肪酸脂、月桂醯肌氨酸鹽和單油酸醯胺磺基琥珀酸二鈉；

2、 洗手時，由於表面活性劑的脫脂作用，使得手洗後皮膚感到乾燥，因此要加入一些富脂 劑和潤膚劑，補充皮膚油脂防止皮膚乾燥粗糙，如各種天然與合成的羊毛脂、甘油、丙二 醇、山梨醇、乳酸鹽和吡咯烷酮羧酸鈉；

3、 手時刻都在接觸外界，手上會沾染上各類的細菌甚至有真菌的存在，因此殺菌組分要有 廣譜性，如3,4，4』一三氯一2』一羥基苯醚、氯代二甲苯酚、中草葯提取物，為了提高殺菌劑 的殺菌效率，還需要添加增加滲透力的助劑，使其促進殺菌組分滲透進細菌壁，快速殺菌，增強殺菌效率；

4、 為了讓消費者更喜歡和接受洗手液，給洗手液賦予特殊的效果和外觀，加人染料或珠光劑，為了取用的方便添加增稠劑調整一個合適的黏度，為了在洗手過程中有一種輕松愉悅的感受添加適量的香精；

5、 隨著人們安全、環保意識的提高，對綠色天然產品更加崇尚，因此在洗手液配方中加入 天然原料是許多洗手液品牌的選擇，這些天然添加劑起到了降低刺激、滋潤皮膚、抗菌、抑 菌、以及提供天然的香氣和色澤的作用，如各種植物、中草葯、水果提取物，蘆薈、銀 杏、菊花、人參、田七、甘草、牡丹皮、茶果、殺菌和檸檬。

(4)抑菌率的檢測方法擴展閱讀:

洗手液的實行標准：

1、2004-12-24由中華人民共和國國家發展和改革委員會發布，於2005-06-01實施的洗手液中華人民共和國輕工業行業標准QB2654一2004；

2、2005-09-0由3中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局、中國國家標准化管理委員會發布，於2006-06-01實施的特種洗手液中華人民共和國國家標准GB19877.1-2005；

3、2008-07-22由國家質量監督檢驗檢疫總局發布，於2008-10-01實施的洗發液、護發素、免洗護發素、沐浴劑、洗手液產品質量監督抽查實施規范CCGF211。

參考資料來源：網路-洗手液

Ⅳ 殺菌率和抑菌率有什麼不同

國標規定：能殺死＞50%細菌的產品才能標稱有抑菌效果；能殺死＞90%細菌的產品才能標稱有殺菌效果。殺菌率和抑菌率都是殺菌能力的指標。50%-90%稱為抑菌率，＞90%稱為殺菌率。
殺菌跟抑菌的作用方式是不一樣的，抑菌的意思就是抑制細菌的生長，抑菌是抑制細菌不讓其繼續繁殖，而殺菌是破壞細菌細胞的結構，讓細菌死亡。抑菌跟殺菌只是一字之差，可以通過字面意思來理解，一個是殺掉細菌，一個是抑制細菌的生長。
抑菌和殺菌的區別很好理解，抑制細菌的生長與殺掉細菌的區別。對於抑菌劑來說是對體內病原菌發生作用，是抑制細菌的生長，是解決其生長的環境，是消滅了病原，而殺菌僅僅是把生長出來的新細菌殺死。殺菌是殺死細菌的葯物，抑菌是抑制細菌的生長繁殖，讓細菌處於一種休眠的狀態下，一旦細菌從休眠狀態下蘇醒就會再次增長以及繁殖，殺菌是消除病根，抑菌只是消除病因。

Ⅵ 誰有GB-15979標准

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫局2002－03－05發布
2002－09－01實施

中華人民共和國國家標准

一次性使用衛生用品衛生標准
GB 15979－2002

Hygienic standard for disposable sanitary procts
代替GB 15979-1995

前言

本標准全文強制。

GB15979－1995《一次性衛生用品衛生標准》自1996年發布以來，使生產企業明確了衛生要求和目標，管理部門也有了監督監測依據，對推動該行業的健康發展與衛生水平的提高起到了積極作用。與此同時，隨著產品種類與材料的發展，該標准有一些地方需要完善。因此提出修訂本標准。

本標准自實施之日起代替GB15979－1995。

本標準的附錄A至附錄G為標準的附錄。

本標准由中華人民共和國衛生部提出。

本標准負責起草單位：上海市疾病預防控制中心；參加起草單位：寶潔（中國）有限公司、強生（中國）有限公司。

本標准主要起草人：沈偉、盧敏、楊宏平、周密、潘希和、劉育京。

1范圍

本標准規定了一次性使用衛生用品的產品和生產環境衛生標准、消毒效果生物監測評價標准和相應檢驗方法，以及原材料與產品生產、消毒、貯存、運輸過程衛生要求和產品標識要求。

在本標准中，一次性使用衛生用品是指：

本標准適用於國內從事一次性使用衛生用品的生產與銷售的部門、單位或個人，也適用於經銷進口一次性使用衛生用品的部門、單位或個人。

2 引用標准

下列標准所包含的條文，通過在本標准中引用而構成為本標準的條文。本標准出版時，所示版本均為有效。所有標准都會被修訂，使用本標準的各方應探討使用下列標准最新版本的可能性。

GB 15981-1995 消毒與滅菌效果的評價方法與標准

3 定義

本標准採用下列定義：

一次性使用衛生用品

使用一次後即丟棄的、與人體直接或間接接觸的、並為達到人體生理衛生或衛生保健（抗菌或抑菌）目的而使用的各種日常生活用品，產品性狀可以是固體也可以是液體。例如，一次性使用手套或指套（不包括醫用手套或指套）、紙巾、濕巾、衛生濕巾、電話膜、帽子、口罩、內褲、婦女經期衛生用品（包括衛生護墊）、尿布等排泄物衛生用品（不包括皺紋衛生紙等廁所用紙）、避孕套等，在本標准中統稱為「衛生用品」。

4 產品衛生指標

4.1 外觀必須整潔，符合該衛生用品固有性狀，不得有異常氣味與異物。

4.2 不得對皮膚與粘膜產生不良刺激與過敏反應及其他損害作用。

4.3 產品須符合表1中微生物學指標。

表1

產品種類
微生物指標

初始污染菌1)

cfu/g
細菌

菌落總數

cfu/g或cfu/mL
大腸菌群
致病性化膿菌2)
真菌

菌落總數

cfu/g或cfu/mL

手套或指套、紙巾、濕巾、帽子內褲、電話膜
.
≤200
不得檢出
不得檢出
≤100

抗菌（或抑菌）液體產品

≤200
不得檢出
不得檢出
≤100

衛生濕巾
.
≤20
不得檢出
不得檢出
不得檢出

口罩
.
.
.
.
.

普通級
.
≤200
不得檢出
不得檢出
≤100

消毒級
≤10 000
≤20
不得檢出
不得檢出
不得檢出

婦女經期衛生用品
.
.
.
.
.

普通級
.
≤200
不得檢出
不得檢出
≤100

消毒級
≤10 000
≤20
不得檢出
不得檢出
不得檢出

尿布等排泄物衛生用品
.
.
.
.
.

普通級
.
≤200
不得檢出
不得檢出
≤100

消毒級
≤10 000
≤20
不得檢出
不得檢出
不得檢出

避孕套
.
≤20
不得檢出
不得檢出
不得檢出

1) 如初始污染菌超過表內數值，應相應提高殺滅指數，使達到本標准規定的細菌與真菌限值。

2) 致病性化膿菌指綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌與溶血性鏈球菌。

4.4 衛生濕巾除必須達到表1中的微生物學標准外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺滅率須≥90％，如需標明對真菌的作用，還須對白色念珠菌的殺滅率≥90％，其殺菌作用在室溫下至少須保持1年。

4.5 抗菌（或抑菌）產品除必須達到表1中的同類同級產品微生物學標准外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率須≥50％（溶出性）或＞26％（非溶出性），如需標明對真菌的作用，還須白色念珠菌的抑菌率≥50％（溶出性）或＞26％（非溶出性），其抑菌作用在室溫下至少須保持1年。

4.5 任何經環氧乙烷消毒的衛生用品出廠時，環氧乙烷殘留量必須≤250μg/g。

5 生產環境衛生指標

5.1 裝配與包裝車間空氣中細菌菌落總數應≤2 500 cfu/m3。

5.2 工作台表面細菌菌落總數應≤20 cfu/cm2。

5.3 工人手錶面細菌菌落總數應≤300 cfu/只手，並不得檢出致病菌。

6 消毒效果生物監測評價

6.1 環氧乙烷消毒：對枯草桿菌黑色變種芽胞(ATCC 9372)的殺滅指數應≥103。

6.2 電離輻射消毒：對短小桿菌芽胞E6d(ATCC 27142)的殺滅指數應≥103。

6.3 壓力蒸氣消毒：對嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953)的殺滅指數應≥103。

7 測試方法

7.1 產品測試方法

7.1.1 產品外觀：目測，應符合本標准3.1的規定。

7.1.2 產品毒理學測試方法：見附錄A。

7.1.3 產品微生物檢測方法：見附錄B。

7.1.4 產品殺菌性能、抑菌性能與穩定性測試方法：見附錄C。

7.1.5 產品環氧乙烷殘留量測試方法：見附錄D。

7.2 生產環境采樣與測試方法：見附錄E。

7.3 消毒效果生物監測評價方法：見附錄F。

8 原材料衛生要求

8.1 原材料應無毒、無害、無污染；原材料包裝應清潔，清楚標明內含物的名稱、生產單位、生產日期或生產批號；影響衛生質量的原材料應不裸露；有特殊要求的原材料應標明保存條件和保質期。

8.2 對影響產品衛生質量的原材料應有相應檢驗報告或證明材料，必要時需進行微生物監控和採取相應措施。

8.3 禁止使用廢棄的衛生用品作原材料或半成品。

9 生產環境與過程衛生要求

9.1 生產區周圍環境應整潔，無垃圾，無蚊、蠅等害蟲孳生地。

9.2 生產區應有足夠空間滿足生產需要，布局必須符合生產工藝要求，分隔合理，人、物分流，產品流程中無逆向與交叉。原料進入與成品出去應有防污染措施和嚴格的操作規程，減少生產環境微生物污染。

9.3 生產區內應配置有效的防塵、防蟲、防鼠設施，地面、牆面、工作檯面應平整、光滑、不起塵、便於除塵與清洗消毒，有充足的照明與空氣消毒或凈化措施，以保證生產環境滿足本標准第5章的規定。

9.4 配置必需的生產和質檢設備，有完整的生產和質檢記錄，切實保證產品衛生質量。

9.5 生產過程中使用易燃、易爆物品或產生有害物質的，必須具備相應安全防護措施，符合國家有關標准或規定。

9.6 原材料和成品應分開堆放，待檢、合格、不合格原材料和成品應嚴格分開堆放並設明顯標志。倉庫內應乾燥、清潔、通風，設防蟲、防鼠設施與墊倉板，符合產品保存條件。

9.7進入生產區要換工作衣和工作鞋，戴工作帽，直接接觸裸裝產品的人員需戴口罩，清洗和消毒雙手或戴手套；生產區前應相應設有更衣室、洗手池、消毒池與緩沖區，

9.8 從事衛生用品生產的人員應保持個人衛生，不得留指甲，工作時不得戴手飾，長發應卷在工作帽內。痢疾、傷寒、病毒性肝炎、活動性肺結核、尖銳濕疣、淋病及化膿性或滲出性皮膚病患者或病原攜帶者不得參與直接與產品接觸的生產活動。

9.9 從事衛生用品生產的人員應在上崗前及定期(每年一次)進行健康檢查與衛生知識(包括生產衛生、個人衛生、有關標准與規范)培訓，合格者方可上崗。

10 消毒過程要求

10.1 消毒級產品最終消毒必須採用環氧乙烷、電離輻射或壓力蒸氣等有效消毒方法，所用消毒設備必須符合有關衛生標准。

10.2 根據產品衛生標准、初始污染菌與消毒效果生物監測評價標准制定消毒程序、技術參數、工作制度，經驗證後嚴格按照既定的消毒工藝操作。該消毒程序、技術參數或影響消毒效果的原材料或生產工藝發生變化後應重新驗證確定消毒工藝。

10.3 每次消毒過程必須進行相應的工藝（物理）和化學指示劑監測，每月用相應的生物指示劑監測，只有當工藝監測、化學監測、生物監測達到規定要求時，被消毒物品才能出廠。

10.4 產品經消毒處理後，外觀與性能應與消毒處理前無明顯可見的差異。

11 包裝、運輸與貯存要求

11.1 執行衛生用品運輸或貯存的單位或個人，應嚴格按照生產者提供的運輸與貯存要求進行運輸或貯存。

11.2 直接與產品接觸的包裝材料必須無毒、無害、清潔，產品的所有包裝材料必須具有足夠的密封性和牢固性以達到保證產品在正常的運輸與貯存條件下不受污染的目的。

12 產品標識要求

12.1 產品標識應符合《中華人民共和國產品質量法》的規定，並在產品包裝上標明執行的衛生標准號以及生產日期和保質期（有效期）或生產批號和限定使用日期。

12.2 消毒級產品還應在銷售包裝上註明「消毒級」字樣以及消毒日期和有效期或消毒批號和限定使用日期，在運輸包裝上標明「消毒級」字樣以及消毒單位與地址、消毒方法、消毒日期和有效期或消毒批號和限定使用日期。

附 錄 A

（標準的附錄）

產品毒理學測試方法

A1 各類產品毒理學測試指標

當原材料、生產工藝等發生變化可能影響產品毒性時，應按表A1根據不同產品種類提供有效的（經政府認定的第三方）成品毒理學測試報告。

表A1

產品種類
皮膚刺激試驗
陰道粘膜刺激試驗
皮膚變態反應試驗

手套或指套、內褲
√

√

抗菌（或抑菌）液體產品
√
根據用途選擇1）
√

濕巾、衛生濕巾
√
根據用途選擇1）
根據材料選擇

口罩
√

婦女經期衛生用品

√
√

尿布等排泄物衛生用品
√

√

避孕套

√
√

1）用於陰道粘膜的產品須做陰道粘膜刺激試驗，但無須做皮膚刺激試驗。

A2 試驗方法

皮膚刺激試驗、陰道粘膜刺激試驗和皮膚變態反應試驗方法按衛生部《消毒技術規范》（第三版）第一分冊《實驗技術規范》（1999）中的「消毒劑毒理學實驗技術」中相應的試驗方法進行。

固體產品的樣品制備方法按照A3進行。

注

1 用於皮膚刺激試驗中的空白對照應為：生理鹽水和斑貼紙。

2 在皮膚變態反應中，致敏處理和激發處理所用的劑量保持一致。

A3 樣品制備

A3.1 皮膚刺激試驗和皮膚變態反應試驗

以橫斷方式剪一塊斑貼大小的產品。對於乾的產品，如尿布、婦女經期衛生用品，用生理鹽水潤濕後貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。濕的產品，如濕巾，則可以按要求裁剪合適的面積，直接貼到皮膚上，再用斑貼紙覆蓋。

A3.2 陰道粘膜刺激試驗

A3.2.1 乾的產品（如婦女經期衛生用品）

以橫斷方式剪取足夠量的產品，按1g/10mL的比例加入滅菌生理鹽水，密封於萃取容器中攪拌後置於37℃±1℃下放置24h。冷卻到室溫，攪拌後析取樣液備檢。

A3.2.2 濕的產品（如衛生濕巾）

在進行陰道粘膜刺激試驗的當天，擠出濕巾里的添加液作為試樣。

A4 判定標准

以衛生部《消毒技術規范》（第三版）第一分冊《實驗技術規范》（1999）中「毒理學試驗結果的最終判定」的相應部分作為試驗結果判定原則。

附錄B

（標準的附錄）

產品微生物檢測方法

B1 產品採集與樣品處理

於同一批號的三個運輸包裝中至少抽取12個最小銷售包裝樣品，1／4樣品用於檢測，1／4樣品用於留樣，另1／2樣品（可就地封存）必要時用於復檢。抽樣的最小銷售包裝不應有破裂，檢驗前不得啟開。

在100級凈化條件下用無菌方法打開用於檢測的至少3個包裝，從每個包裝中取樣，准確稱取10 g±1g樣品，剪碎後加入到200 mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個生理鹽水樣液。液體產品用原液直接做樣液。

如被檢樣品含有大量吸水樹脂材料而導致不能吸出足夠樣液時，稀釋液量可按每次50mL遞增，直到能吸出足夠測試用樣液。在計算細菌菌落總數與真菌菌落總數時應調整稀釋度。

B2 細菌菌落總數與初始污染菌檢測方法

本方法適用於產品初始污染菌與細菌菌落總數（以下統稱為細菌菌落總數）檢測。

B2.1 操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降後取上清液作菌落計數。共接種5個平皿，每個平皿中加入1 mL樣液，然後用冷卻至45℃左右的熔化的營養瓊脂培養基15 ～20mL倒入每個平皿內混合均勻。待瓊脂凝固後翻轉平皿置35℃±2℃ 培養48h後，計算平板上的菌落數。

B2.2 結果報告

菌落呈片狀生長的平板不宜採用；計數符合要求的平板上的菌落，按式(B1)計算結果：

X1＝
A×
K

--------------------------------------------------------------------------------
．．．（B1）

5

式中：X1――細菌菌落總數，cfu/g或cfu/mL；

A――5塊營養瓊脂培養基平板上的細菌菌落總數；

K――稀釋度。

當菌落數在100以內，按實有數報告，大於100時採用二位有效數字。

如果樣品菌落總數超過本標準的規定，按B2.3進行復檢和結果報告。

B2.3 復檢方法

將留存的復檢樣品依前法復測2次，2次結果平均值都達到本標準的規定，則判定被檢樣品合格；其中有任何1次結果平均值超過本標准規定，則判定被檢樣品不合格。

B3 大腸菌群檢測方法

B3.1 操作步驟

取樣液5mL接種50mL乳糖膽鹽發酵管，置35℃±2℃ 培養24 h，如不產酸也不產氣，則報告為大腸菌群陰性。

如產酸產氣，則劃線接種伊紅美藍瓊脂平板，置35℃±2℃培養18～24 h，觀察平板上菌落形態。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。

取疑似大腸菌落1～2個作革蘭氏染色鏡檢，同時接種乳糖發酵管，置35℃±2℃培養24 h，觀察產氣情況。

B3.2 結果報告

凡乳糖膽鹽發酵管產酸產氣，乳糖發酵管產酸產氣，在伊紅美藍平板上有典型大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌，可報告被檢樣品檢出大腸桿菌。

B4 綠膿桿菌檢測方法

B4.1 操作步驟

取樣液5 mL，加入到50 mL SCDLP培養液中，充分混勻，置35℃±2℃培養18～24 h。如有綠膿桿菌生長，培養液表面呈現一層薄菌膜，培養液常呈黃綠色或藍綠色。從培養液的薄菌膜處挑取培養物，劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板，置35℃±2℃培養18～24 h，觀察菌落特徵。綠膿桿菌在此培養基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養基略帶粉紅色，其他菌不長。

取可疑菌落塗片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應進行下列試驗：

氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內，用無菌玻棒挑取可疑菌落塗在濾紙片上，然後在其上滴加一滴新配製的1％二甲基對苯二胺試液，30 s內出現粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗陽性，不變色者為陰性。

綠膿菌素試驗：取2～3個可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養基斜面，35℃±2℃培養24 h，加入三氯甲烷3～5 mL，充分振盪使培養物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍色時，用吸管移到另一試管中並加入1 mol/L的鹽酸1 mL，振盪後靜置片刻。如上層出現粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。

硝酸鹽還原產氣試驗：挑取被檢菌純培養物接種在硝酸鹽腖水培養基中，置35℃±2℃培養24 h，培養基小倒管中有氣者即為陽性。

明膠液化試驗：取可疑菌落純培養物，穿刺接種在明膠培養基內，置35℃±2℃培養24h，取出放於4～10℃，如仍呈液態為陽性，凝固者為陰性。

42℃生長試驗：挑取可疑培養物，接種在普通瓊脂斜面培養基上，置42℃培養24～48 h，有綠膿桿菌生長為陽性。

B4.2 結果報告

被檢樣品經增菌分離培養後，證實為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及綠膿桿菌試驗均為陽性者，即可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產氣和42℃生長試驗三者皆為陽性時，仍可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。

B5 金黃色葡萄球菌檢測方法

B5.1 操作步驟

取樣液5 mL，加入到50 mL SCDLP培養液中，充分混勻，置35℃±2℃培養24 h。

自上述增菌液中取1～2接種環，劃線接種在血瓊脂培養基上，置35℃±2℃培養24～48 h。在血瓊脂平板上該菌菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。

挑取典型菌落，塗片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應進行下列試驗：

甘露醇發酵試驗：取上述菌落接種甘露醇培養液，置35℃±2℃培養24 h，發酵甘露醇產酸者為陽性。

血漿凝固酶試驗：玻片法：取清潔乾燥載玻片，一端滴加一滴生理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿，挑取菌落分別與生理鹽水和血漿混合，5 min如血漿內出現團塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴仍呈均勻混濁無凝固則為陽性，如兩者均無凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝固現象，再進行試管凝固酶試驗；試管法：吸取1∶4新鮮血漿0.5 mL，放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24 h肉湯培養物0.5 mL。混勻，放35℃±2℃溫箱或水浴中，每半小時觀察一次，24 h之內呈現凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養物各0.5 mL作陽性與陰性對照。

B5.2 結果報告

凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭氏陽性葡萄球菌，並能發酵甘露醇產酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。

B6 溶血性鏈球菌檢測方法

B6.1 操作步驟

取樣液5 mL加入到50 mL葡萄糖肉湯，35℃±2℃培養24 h。

將培養物劃線接種血瓊脂平板，35℃±2℃培養24 h觀察菌落特徵。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突起，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無色透明溶血圈。

挑取典型菌落作塗片革蘭氏染色鏡檢，應為革蘭氏陽性，呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況，應進行下列試驗：

鏈激酶試驗：吸取草酸鉀血漿0.2 mL(0.01 g草酸鉀加5 mL兔血漿混勻，經離心沉澱，吸取上清液)，加入0.8 mL滅菌生理鹽水，混勻後再加入待檢菌24 h肉湯培養物0.5 mL和0.25％氯化鈣0.25 mL，混勻，放35℃±2℃水浴中，2 min觀察一次(一般10 min內可凝固)，待血漿凝固後繼續觀察並記錄溶化時間。如2 h內不溶化，繼續放置24 h觀察，如凝塊全部溶化為陽性，24 h仍不溶化為陰性。

桿菌肽敏感試驗：將被檢菌菌液塗於血平板上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上，同時以已知陽性菌株作對照，在35℃±2℃下放置18～24 h，有抑菌帶者為陽性。

B6.2 結果報告

鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌，血平板上呈現溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗陽性，可報告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。

B7 真菌菌落總數檢測方法

B7.1 操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降後取上清液作真菌計數，共接種5個平皿，每一個平皿中加入1mL樣液，然後用冷卻至45℃左右的熔化的沙氏瓊脂培養基15～25 mL倒入每個平皿內混合均勻，瓊脂凝固後翻轉平皿置25℃±2℃培養7天，分別於3、5、7天觀察，計算平板上菌落數，如果發現菌落蔓延，以前一次的菌落計數為准。

B7.2 結果報告

菌落呈片狀生產的平板不宜採用；計數符合要求的平板上的菌落，按式（B2）計算結果：

K

X2＝
B×

--------------------------------------------------------------------------------

．．．（B2）

5

式中：X2――真菌菌落總數，cfu/g或cfu/mL；

B――5塊沙氏瓊脂培養基平板上的真菌菌落總數；

K――稀釋度。

當菌落數在100以內，按實有數報告，大於100時採用二位有效數字。

如果樣品菌落總數超過本標準的規定，按B7.3進行復檢和結果報告。

B7.3 復檢方法

將留存的復檢樣品依前法復測2次，2次結果都達到本標準的規定，則判定被檢樣品合格，其中有任何1次結果超過本標准規定，則判定被檢樣品不合格。

B8 真菌定性檢測方法

B8.1 操作步驟

取樣液5mL加入到50mL沙氏培養基中，25℃±2℃培養7天，逐日觀察有無真菌生長。

B8.2 結果報告

培養管混濁應轉種沙氏瓊脂培養基，證實有真菌生長，可報告被檢樣品檢出真菌。

附 錄 C

（標準的附錄）

產品殺菌性能、抑菌性能與穩定性測試方法

C1 樣品採集

為使樣品具有良好的代表性，應於同一批號三個運輸包裝中至少隨機抽取20件最小銷售包裝樣品，其中5件留樣，5件做抑菌或殺菌性能測試，10件做穩定性測試。

C2 試驗菌與菌液制備

C2.1 試驗菌

C2.1.1 細菌：金黃色葡萄球菌 (ATCC 6538)，大腸桿菌 (8099或ATCC 25922)。

C2.1.2 酵母菌：白色念珠菌（ATCC 10231）。

菌液制備：取菌株第3～14代的營養瓊脂培養基斜面新鮮培養物(18～24h)，用5mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（以下簡稱PBS）洗下菌苔，使菌懸浮均勻後用上述PBS稀釋至所需濃度。

C3 殺菌性能試驗方法

該試驗取樣部位，根據被試產品生產者的說明而確定。

C3.1 中和劑鑒定試驗

進行殺菌性能測試必須通過以下中和劑鑒定試驗。

C3.1.1試驗分組

1)染菌樣片＋5mLPBS

2)染菌樣片＋5mL中和劑

3)染菌對照片＋5mL中和劑

4)樣片＋5mL中和劑＋染菌對照片

5)染菌對照片＋5mLPBS

6)同批次PBS

7)同批次中和劑

8)同批次培養基。

C3.1.2 評價規定

1)第1組無試驗菌，或僅有極少數試驗菌菌落生長。

2)第2組有較第1組為多，但較第3、4、5組為少的試驗菌生長，並符合要求。

3)第3、4、5組有相似量試驗菌生長，並在1×104～9×104cfu/片之間，其組間菌落數誤差率不超過15％。

4)第6～8組無菌生長。

5)連續3次試驗取得合格評價。

C3.2 殺菌試驗

C3.2.1 操作步驟

將試驗菌24h斜面培養物用PBS洗下，製成菌懸液（要求的濃度為：用100μL滴於對照樣片上，回收菌數為1×104～9×104cfu/片）。

取被試樣片（2.0cm×3.0cm）和對照樣片（與試樣同質材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經滅菌處理）各4片，分成4組置於4個滅菌平皿內。

取上述菌懸液，分別在每個被試樣片和對照樣片上滴加100μL，均勻塗布，開始計時，作用2、5、10、20min，用無菌鑷分別將樣片投入含5mL相應中和劑的試管內，充分混勻，作適當稀釋，然後取其中2～3個稀釋度，分別吸取0.5mL置於兩個平皿，用涼至40～45℃的營養瓊脂培養基（細菌）或沙氏瓊脂培養基（酵母菌）15mL作傾注，轉動平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固後翻轉平板，35℃±2℃培養48h（細菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計數。

試驗重復3次，按式（C1）計算殺菌率：

X3＝(A-B)/A×100%．．．（C1）

式中：X3――殺菌率，％；

A――對照樣品平均菌落數；

B――被試樣品平均菌落數。

C3.2.2 評價標准

殺菌率≥90％，產品有殺菌作用。

C4 溶出性抗（抑）菌產品抑菌性能試驗方法

C4.1 操作步驟

將試驗菌24h斜面培養物用PBS洗下，製成菌懸液（要求的濃度為：用100μL滴於對照樣片上或5mL樣液內，回收菌數為1×104～9×104cfu/片或mL）。

取被試樣片（2.0cm×3.0cm）或樣液（5mL）和對照樣片或樣液（與試樣同質材料，同等大小，但不含抗菌材料，且經滅菌處理）各4片（置於滅菌平皿內）或4管。

取上述菌懸液，分別在每個被試樣片或樣液和對照樣片或樣液上或內滴加100μL，均勻塗布／混合，開始計時，作用2、5、10、20min，用無菌鑷分別將樣片或樣液（0.5mL）投入含5mLPBS的試管內，充分混勻，作適當稀釋，然後取其中2～3個稀釋度，分別吸取0.5mL，置於兩個平皿，用涼至40～45℃的營養瓊脂培養基（細菌）或沙氏瓊脂培養基（酵母菌）15mL作傾注，轉動平皿，使其充分均勻，瓊脂凝固後翻轉平板，35℃±2℃培養48h（細菌）或72h（酵母菌），作活菌菌落計數。

試驗重復3次，按式（C2）計算抑菌率：

X4＝(A-B)/A×100%．．．（C1）

式中：X4――抑菌率，％；

A――對照樣品平均菌落數；

B――被試樣品平均菌落數。

C4.2 評價標准

抑菌率≥50％～90％，產品有抑菌作用，抑菌率≥90％，產品有較強抑菌作用。

C5 非溶出性抗（抑）菌產品抑菌性能試驗方法

C5.1 操作步驟

稱取被試樣片（剪成1.0cm×1.0cm大小）0.75g分裝包好。

將0.75g重樣片放入一個250mL的三角燒瓶中，分別加入70mLPBS和5mL菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度為1×104～9×104cfu/mL。

將三角燒瓶固定於振盪搖床上，以300r/min振搖1h。

取0.5mL振搖後的樣液，或用PBS做適當稀釋後的樣液，以瓊脂傾注法接種平皿，進行菌落計數。

同時設對照樣片組和不加樣片組，對照樣片組的對照樣片與被試樣片同樣大小，但不含抗菌成分，其他操作程序均與被試樣片組相同，不加樣片組分別取5mL菌懸液和70mLPBS加入一個250mL三角燒瓶中，混勻，分別於0時間和振盪1h後，各取0.5mL菌懸液與PBS的混合液做適當稀釋，然後進行菌落計數。

試驗重復3次，按式（C3）計算抑菌率：

X5＝(A-B)/A×10

Ⅶ 塑料製品抗菌性能檢測流程和標准

塑料的表面抗菌性能測試流程是比較簡單的，平板培養法進行試驗，流程一般按照細菌預培養-試樣制備-接種液制備-試樣接種-接種試樣培養-試樣上細菌回收的順序，經過定期培養之後再對菌落數量進行統計，得出最後結論，飛凡檢測提供活化好的菌種，因此可以縮短試驗周期。

Ⅷ 抑菌產品檢測方法

含抑菌劑產品微生物限度檢查如何去除活性微生物限度檢查法系檢查非規定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法.檢查項目包括細菌數、黴菌數、酵母菌數及控制菌檢查. 微生物限度檢查應在環境潔凈度10000級下的局部潔凈度 100級的單向流空氣區域內進行.檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作,防止再污染,防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出.單向流空氣區域、工作檯面及環境應定期按《醫葯工業潔凈室（區）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現行國家標准進行潔凈度驗證. 供試品檢查時,如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑,應證明其有效性及對微生物無毒性. 除另有規定外,本檢查法中細菌及控制菌培養溫度為30℃～35℃；黴菌、酵母菌培養溫度為23℃～28℃. 檢驗結果以 1g、1ml、10g、10ml或10cm2 為單位報告,特殊品種可以最小包裝單位報告. 檢驗量檢驗量即一次試驗所用的供試品量（g、ml 或cm2）. 除另有規定外,一般供試品的檢驗量為10g 或10ml；膜劑為100cm2；貴重葯品、微量包裝葯品的檢驗量可以酌減.要求檢查沙門菌的供試品,其檢驗量應增加20g 或20ml（其中10g或10ml用於陽性對照試驗）. 檢驗時,應從2 個以上最小包裝單位中抽取供試品,膜劑還不得少於4 片. 一般應隨機抽取不少於檢驗用量（兩個以上最小包裝單位）的3 倍量供試品. 供試液的制備根據供試品的理化特性與生物學特性,採取適宜的方法制備供試液.供試液制備若需加溫時,應均勻加熱,且溫度不應超過45℃.供試液從制備至加入檢驗用培養基,不得超過1 小時.

Ⅸ 抑菌圈法如何計算抑菌率

基於計算機圖像處理技術的抗生素抑菌圈自動測量系統。