檢測巰基的方法

Ⅰ 燙發類產品中巰基乙酸含量怎麼檢測

化妝品中巰基乙酸及其鹽類的測定方法疏基乙酸（HSCH2COOH）分子量92．12，是無色液體，伴有特異臭味，可與水以任何比例混合。
疏基乙酸在鹼性條件下有較強的還原作用，因其使用量不同，可使毛發從柔軟到斷裂。基於這一特點，其在燙發類、脫毛類化妝品中直被廣泛採用。由於它有較強的還原作用，所以使用時要控制其含量，以免使燙發劑變成脫毛劑，造成毛發脫落的嚴重後果，在化妝品中疏基乙酸及其鹽類視為限用物質。化妝品衛生標准（GB 7916—87）規定其最大允許濃度如下：2％（疏基乙酸計）用於用後沖洗掉的護發產品；5％（pH12．7）用於脫毛劑；8％（pH9）用於一般的直發和卷發產品；11％（pH11）用於專業使用的直發和卷發產品。
疏基乙酸及其鹽類在化妝品分析中普遍採用滴定方法，此法對儀器設備要求不高，而且簡單快速，方法精度能滿足化妝品分析要求。
1 應用范圍
本法適用於測定燙發類、脫毛類疏基乙酸及其鹽類。
本法最低檢測濃度為10mg/g。
2 原理
以有機溶劑提取化妝品中疏基乙酸及其鹽類，用碘溶液滴定定量。
3 試劑
3．1 10％（V/V）鹽酸。
3．2 三氯甲烷：優級純。
3．3 0．05mol/L碘溶液。
3．4 1％（V/V）澱粉溶液。
4 儀器
4．1 酸式滴定管。
4．2 電磁攪拌器。
5 分析步驟
5．1 樣品預處理
准確量取2．0ml溶液狀樣品或稱取約3．0g膏狀樣品於燒杯中，加20ml 10％（V/V）鹽酸及50ml水緩慢加熱至沸騰（1）。冷卻後加5ml三氯甲烷（2）。用電磁攪拌器攪拌5min後備用。
5．2 測定
5．2．1 以0．05mol/L在碘溶液滴定，加入1ml 1％（V/V）澱粉溶液作指示劑，至溶液呈穩定的藍色即為終點。
6 計算
按下式計算疏基乙酸及其鹽類濃度（3）：

式中：A——碘溶液消耗量，ml；
V——取樣體積，ml；
m——取樣質量，g。
7 本方法准確度
加標回收率87．33％～109．2％。
註解：
（1）本方法中10％HCl加入量以20ml為宜，加入HCl的目的是為了在酸性條件下煮沸趕出樣品中的硫化物。
（2）本方法加入三氯甲烷的量以5ml為宜，其目的是排除干擾物，如樣品中乳化劑的影響。
（3）計算式中的0．092、0．0184分別表示1ml的1mol碘溶液相當疏基乙酸或疏基乙酸鈣的克數。

Ⅱ 測量總巰基含量時dtnb中是加sds還是尿素

SDS、尿素的緩沖溶液溶解蛋白質都可以測定巰基總量.

Ⅲ 巰基怎麼修飾到適配體上的

線性DNA在納米金錶面上的構象為連接巰基的一端纏繞在納米金錶面，另一端與表面垂直向外伸展，隨著表面探針容量的增加，每條DNA探針纏繞在納米金錶面上的長度不斷減小，而同時向外延伸的尾部越來越長，這樣就把巰基修飾到適配體上了。

納米金錶面保持被DNA鹼基吸附包裹的低表面自由能狀態上述構象可以描述為DILOT模型，對於核酸感測器探針設計和基於DNA雜交的納米組裝等應用具有重要的指導意義。是利用動態光散射測定組裝過程中線性DNA或核酸適配體與納米金復合物的水合粒徑，結合吸附動力學，分別測定線性DNA或核酸適配體在不同表麵包被量時在納米金錶面上的構象。

巰基的檢測方法：

1. RP-HPLC法測定巰基含量。

採用色譜柱Kromasil-C18 (250×4.6mm, 5μm)，流動相A(0.1%TFA)和流動相B（甲醇）梯度洗脫：流動相B 40%~80%，0~10min，然後80% B保持5min，流速0.8mL/min，檢測波長327nm，得到NTB標准曲線y=3.67059x+0.14123，回收率101.9%，RSD=l.17%，從而建立了一種高靈敏度巰基檢測方法。

2. 採用分子熒光光譜法作為反應條件，用反相高效液相色譜梯度洗脫法測定巰基。

用OPA、丹醯氯、茚三酮與半胱氨酸反應，測其可見紫外吸收光譜及熒光光譜；在不同PH、溫度、反應時間條件下，用OPA與半胱氨酸反應測其熒光度；分別吸收0.1mmol/L半胱氨酸溶液0、20、40、60、80、100μl，各加入10μlHO,室溫下反應30min，然後加熱蒸干，殘渣用200μl OPA衍生液，定容至5 ml，4 min時測其熒光光譜。取pH8.4的硼酸緩沖溶液5μl，混合10次；加入OPA衍生液2μl，混合進樣走HPLC。梯度條件：洗脫液B所佔比例0min為0，17min線性增加至60%，17.5min線性增加至100%，20min洗脫結束。激發波長為340nm,熒光檢測波長為450nm。

3.柱前衍生高效液相色譜-紫外檢測法。

以tris(2-carboxylethyl)–phosphine (TCEP)為還原劑，7–fluorbenzo–2–oxa–1,3–diazole–4-sulfonate(SBD-F)為衍生劑，N-乙醯半胱氨酸為內標，C8色譜柱分離，流動相為甲醇－磷酸鹽緩沖液（pH =3. 0），梯度洗脫，385 nm處檢測。線性范圍為8. 3～1042. 6μmol/L,最低檢測限為0.42μmol/L,日內精密度為1.67%～1.86%,日間精密度為2.08%～3.06 %,平均回收率為98.1%～103.2 %。

4. 電化學脫附與熒光技術聯用。

將樣品固定在烷基硫醇自組裝膜修飾的金電極表面，通過熒光試劑馬來醯亞胺與游離巰基反應原位標記GSH,恆電位條件下脫附電極表面吸附物，檢測脫附物在0.1 mol·L.KOH溶液中的熒光強度。

5.拉曼光譜法。

對於巰基在拉曼光譜方面研究主要集中在含巰基的芳香族化合物上，根據李曉偉等研究，巰基與銀反應生成牢固的－SAg鍵，失去了原有的特徵性巰基氫鍵，其光譜特點發生明顯改變。

以上內容參考：網路-巰基

Ⅳ 求救巰基乙酸的分析方法

疏基乙酸（HSCH2COOH）分子量92．12，是無色液體，伴有特異臭味，可與水以任何比例混合。

疏基乙酸在鹼性條件下有較強的還原作用，因其使用量不同，可使毛發從柔軟到斷裂。基於這一特點，其在燙發類、脫毛類化妝品中直被廣泛採用。由於它有較強的還原作用，所以使用時要控制其含量，以免使燙發劑變成脫毛劑，造成毛發脫落的嚴重後果，在化妝品中疏基乙酸及其鹽類視為限用物質。化妝品衛生標准（GB7916—87）規定其最大允許濃度如下：2％（疏基乙酸計）用於用後沖洗掉的護發產品；5％（pH12．7）用於脫毛劑；8％（pH9）用於一般的直發和卷發產品；11％（pH11）用於專業使用的直發和卷發產品。

疏基乙酸及其鹽類在化妝品分析中普遍採用滴定方法，此法對儀器設備要求不高，而且簡單快速，方法精度能滿足化妝品分析要求。

1應用范圍

本法適用於測定燙發類、脫毛類疏基乙酸及其鹽類。

本法最低檢測濃度為10mg/g。

2原理

以有機溶劑提取化妝品中疏基乙酸及其鹽類，用碘溶液滴定定量。

3試劑

3．110％（V/V）鹽酸。

3．2三氯甲烷：優級純。

3．30．05mol/L碘溶液。

3．41％（V/V）澱粉溶液。

4儀器

4．1酸式滴定管。

4．2電磁攪拌器。

5分析步驟

5．1樣品預處理

准確量取2．0ml溶液狀樣品或稱取約3．0g膏狀樣品於燒杯中，加20ml10％（V/V）鹽酸及50ml水緩慢加熱至沸騰（1）。冷卻後加5ml三氯甲烷（2）。用電磁攪拌器攪拌5min後備用。

5．2測定

5．2．1以0．05mol/L在碘溶液滴定，加入1ml1％（V/V）澱粉溶液作指示劑，至溶液呈穩定的藍色即為終點。

6計算

按下式計算疏基乙酸及其鹽類濃度（3）：

式中：A——碘溶液消耗量，ml；

V——取樣體積，ml；

m——取樣質量，g。

7本方法准確度

加標回收率87．33％～109．2％。

註解：

（1）本方法中10％HCl加入量以20ml為宜，加入HCl的目的是為了在酸性條件下煮沸趕出樣品中的硫化物。

（2）本方法加入三氯甲烷的量以5ml為宜，其目的是排除干擾物，如樣品中乳化劑的影響。

（3）計算式中的0．092、0．0184分別表示1ml的1mol碘溶液相當疏基乙酸或疏基乙酸鈣的克數。

Ⅳ 10mmol/LDTNB怎麼配置 為什麼我用去離子水配置的不能溶解完全要注意什麼謝謝高手指點！

可以考慮稍微加熱下

DTNB為Ellman試劑。它用於比色法測定生物樣 品中巰基。它易溶於水。在巰基化合物的存在下，無色的DTNB將被轉變成黃 色的5-巰基-2-硝基苯甲酸。由於5-巰基-2-硝基苯甲酸在412 nm處具有最大吸收，DTNB的吸收光譜並不幹擾巰基的測定。

配置方法：

准確稱取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配製成50ml溶液，存放於棕色瓶中，於暗處低溫保存備用。應該注意的是配置緩沖、濃度，儲存時要避免見光。

應用舉例：

半胱氨酸中自由巰基的定量檢測方法

一、試劑的配製：

1、Tris－HCL緩沖液（0.25M）：DDW准確配製後，用鹽酸調節pH＝8.3；

2、半胱氨酸標准溶液（1mM）：准確稱取0.017563gL－半胱氨酸（175.63），用1ml甲酸溶解，以DDW定容至100ml；

3、DTNB（分子量：396.35）標准溶液（10mM）：准確稱取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4（pH＝7.0）配製成50ml溶液，存放於棕色瓶中，於暗處低溫保 存備用

4、DTNB分析溶液（0.1mM）：由1體積10mMDTNB標准液加99體積0.25M的Tris緩沖液配製而成，現用現配。

二、標准曲線的製作;

1、25℃條件下，用Tris緩沖液稀釋半胱氨酸標准液配成梯度的稀釋液（5.0ml）， 其濃度分別為：0.00mM、0.025mM、0.05mM、0.1mM、0.15mM、0.2mM；

2、取上述各濃度溶液1ml分別加入到5ml預先恆溫於25℃水中的DTNB分析溶液，搖勻，准確靜止10min，立即於波長412nm處測定吸光度值（A）。

根據目的蛋白的吸光度在標准曲線上讀出對應的濃度即可

Proct Name:DTNB

Proct Number:D8130

Proct Brand:Sigma

CAS Number:69-78-3

Molecular Formula:[-SC6H3(NO2)CO2H]2

Molecular Weight:396.35

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Ⅵ 用紫外怎麼檢測巰基

以tris(2-carboxylethyl) – phosphine (TCEP)為還原劑，7–fluorbenzo–2–oxa –1,3– diazole– 4-sulfonate(SBD-F)為衍生劑，N-乙醯半胱氨酸為內標，C8色譜柱分離，流動相為甲醇 -磷酸鹽緩沖液（pH =3. 0）,梯度洗脫 ,385 nm處檢測。線性范圍為8. 3～1042. 6 μmol/L,最低檢測限為 0. 42μmol/L,日內精密度為 1. 67%～1. 86%,日間精密度為 2. 08%～3. 06 %,平均回收率為 98. 1%～103. 2 %

Ⅶ 求助：請問巰基用紅外光譜是不是很難檢測出

cookie634(站內聯系TA)應該能夠出來，在2500-2600左右，比較明顯。qingyy(站內聯系TA)巰基的伸縮振動在2550－2590cm－1，在這個區域的吸收峰不多。它紅外光譜很特徵，但是比較弱。如果樣品在此處沒有吸收的話，那是很容易識別的。看看你的樣品，如果沒有共軛雙鍵或者三鍵的話就可以用紅外光譜測出來。