㈠ 分光光度法對物質進行含量測定的操作步驟和注意事項
一，在測量方法上
如果是標准曲線的基體和樣品的基體大致相同的情況，用標准曲線法：
首先配製一系列濃度的所測物質的標准溶液，用分光光度計測的吸光度A值，作出標准曲線（最好估測所測物質的濃度，使標准曲線包含這個濃度），再測出樣品的A值，由標准曲線求出其濃度。
如果被測溶液成分復雜未知，就用標准加入法：
在數份樣品溶液中加入不等量的標准溶液;然後按照繪制標准曲線的步驟測定吸光度繪制吸光度-加入濃度曲線用外推法求得樣品溶液的濃度。首先要大概知道樣品中待測物的含量；然後確定加入的C標準的量要和Cx相當；再就是線性方程一定要過坐標原點，即空白含量的吸光度值要為零，否則，你的線性方程為A=KC+B，此時還應該要作A=K(Cx+2C標准)、A=K(Cx+3C標准)，然後才能得出Cx。（選用這種方法需保證樣品溶液足夠量）
二，在紫外可見分光光度計使用上
首先確定要使用的分光光度計型號，我使用的為為雙光束的T6型紫外可見分光光度計，使用時注意，開機初始化時不能打開儀器蓋子，比色皿不能放在槽內，可以先對所測樣品的任意一濃度在儀器波長范圍內掃描，找出最大吸收波長，然後再最大波長下進行定量測定，每個溶液測定時先用該溶液潤洗比色皿2-3次，倒入比色皿中液體約2/3，然後用擦鏡紙擦乾比色皿外壁，標准曲線法測量時，需用除含待測成分外的與樣品一致的溶液校零（最重要的是在使用儀器前要了解具體儀器使用方法，可閱讀說明書，操作和注意事項都有介紹）