㈠ 好氧微生物适宜采用什么方法进行培养
好氧微生物适宜采用什么方法进行培养
液体培养和固体培养都可以,主要的限制因子是氧气。实验室中普通的平板培养法(固体)和震荡培养(液体)都可以。为了增加氧的供应,可以进行各种形式的通气,搅拌等。液体的浅层培养(不震荡)也是好氧菌培养
一、固体培养基分离
1、稀释倒平板
特点:菌落分离较为均匀,进行微生物计数结果相对准确。但操作相对麻烦,热敏感菌有时易被烫死,而严格好氧菌也可能因被固定在培养基中生长受到影响。
2、涂布平板法
特点:操作相对简单,是较常使用的常规方法。但有时会因涂布不均匀使某些部位的菌落不能分开,进行微生物计数时需对稀释和涂布过程的操作特别注意,否则不易得到准确的结果。
3、平板划线法
特点:操作简单,多用于对已有纯培养的确认和再次分离。
应用:这三种方法可用于所有能在固体培养基表面形成菌落的微生物的纯培养分离。并且,通过选用适当的选择平板及培养条件,可直接分离各种具有特定生理特征的微生物。和厌氧罐或厌氧手套箱技术结合,这3种方法也可用于获得各种厌氧菌的纯培养。
4、稀释摇管法
特点:稀释倒平板法的一种变通形式,但由于菌落形成在琼脂柱的中间,观察和挑取都相对困难。
应用:在缺乏专业的厌氧操作设备的情况下对严格厌氧菌进行分离和观察。
二、液体培养基分离
1、稀释法
特点:工作量大,是否获得纯培养需依靠统计学的推测。
应用:不能或不易在固体培养基上生长的微生物进行纯培养分离或数量统计。
2、富集培养
特点:一般不能直接获得微生物的纯培养,在通过富集培养使原本在自然环境中占少数的微生物的数量大大提高后,需再通过平板法进行相应微生物纯培养的分离和检测。 应用:
(1)根据某种微生物的特殊生长要求,按照意愿从自然界中对这种微生物进行有针对性的有效分离;
(2)分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物,尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长。
三、显微操作
单细胞(孢子)挑取
特点:分离过程直观,可靠,但对仪器和操作技术要求较高,多限于高度专业化的科学研究。而挑取的微生物单细胞或孢子需经固体或液体培养基培养后才能获得其纯培养物。 应用:从样品中直接分离所需的微生物细胞或孢子,获得其纯培养。
㈡ 微生物的培养方法
1.平板划线分离培养法
对混有多种细菌,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法:
①分区划线分离法:此法常用于含菌量较多的细菌的分离。先用接种环挑取标本涂布于琼脂平板1区(占培养基总面积的¼)并作数条划线,再于2、3、4区依次划线。每划完一个区域,均将接种环烧灼灭菌1次,冷后再划下一区域,每一区域的划线均与上一区域的划线交接1~3次。一个成功分区划线的平板,培养后分别观察1区形成菌苔,2区菌落连成线,3区和4区可分离到单个菌落。
②连续划线分离法:此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹,然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种,直至划满琼脂平板表面。
2.琼脂斜面接种法
主要用于菌落的移种,以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环(针)挑取单个菌落或培养物,从培养基斜面底部向上划一条直线,然后再从底部沿直线向上曲折连续划线,直至斜面近顶端处止。生化鉴定培养基斜面接种,用接种针挑取待鉴定细菌的菌落,从斜面中央垂直刺入底部,抽出后在斜面上由下至上曲折划线接种。
3.穿刺接种法
此法多用于半固体培养基或双糖铁、明胶等具有高层的培养基接种,半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时用接种针挑取菌落,由培养基中央垂直刺入至距管底0.4cm处,再沿穿刺线退出接种针。双糖铁等有高层及斜面之分的培养基,穿刺高层部分,退出接种针后直接划线接种斜面部分。
4.液体培养基接种法
用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落,倾斜液体培养管,在液面与管壁交界处研磨接种物(以试管直立后液体淹没接种物为准)。此接种法应避免接种环与液体过多接触,更不应在液体中混匀、搅拌,以免形成气溶胶,造成实验室污染。
5.倾注平板法
本法主要用于饮水、饮料、牛乳等标本中的细菌计数。取纯培养物的稀释或原标本1ml至无菌培养皿内,再将已融化并冷却至45~50℃左右的琼脂培养基15~20ml倾注入该无菌培养皿内,混匀,待凝固后置37℃培养,长出菌落后进行菌落计数,以求出每毫升标本中所含菌数。先数6个方格(每格为1cm2)中菌落数,求出每格的平均菌落数,并算出平皿直径,然后按下列公式计数,求出每毫升标本中的细菌数。
全平板菌落数=每方格的平均菌落数×лr2
每ml标本中的细菌数=全平板菌落数×稀释倍数
6.涂布接种法
本法多用于纸片扩散法药敏试验的细菌接种。将一定量或适量的菌液加到琼脂培养基表面,然后用灭菌的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布,使被接种液均匀分布于琼脂表面,然后贴上药敏纸片,或直接培养,本法经培养后细菌形成菌苔。
1、丰富孩子的生活环境
有生活经历才有记忆,有的孩子年龄很小,却因为“见多识广”,能记住和讲述很多见闻。从小给孩子提供丰富多彩的生活环境,给他玩各种颜色(如:曼陀罗)、有声的、能活动的玩具,听音乐,多与孩子讲话,给孩子念儿歌、诗歌,讲故事,带孩子去公园、动物园、商店,和孩子一起做游戏等等,这些都会在他们的脑海中留下深刻印象,能在较长时间内保持记忆。这些印象在遇到新的事物时会引起联想,帮助孩子记住新的对象。
2、从培养孩子注意力入手
离开了对识记材料的注意,记忆自然也如过眼烟云消失殆尽。因此,要想提高孩子记忆力,训练孩子注意力应作为整个训练过程的第一步。针对注意力不集中的孩子,不可急躁,更不能强迫孩子按自己的意愿行事。可以注意观察孩子,如果孩子对某一事物感兴趣,那好,我们就以这个事物作为起点,让孩子尽可能对这个事物保持较长时间的注意力。只要孩子一次比一次能坚持的时间更长一点,父母就应该感到欣慰。
3、制定规律的作息制度
有规律的作息可以有效地帮助孩子建立时间的概念,防止孩子在大脑中形成错乱的时空观念。在作息制度实行初期,父母可以一边安排孩子的活动,一边向孩子叙说:“12点半了。现在是午餐时间,宝宝该吃饭了。”“1点半了,宝宝该午睡了。”“4点了,宝宝可以玩玩具了。”建立正确的时空概念可以在无形中强化孩子的记忆力。
4、给孩子明确的识记任务
对大一些的孩子,可以尝试让孩子有意识、有目的地去识记某些事物。如在听故事、外出参观、饭后散步时,都应该给孩子提出识记任务。“宝贝,妈咪记性不好,待会儿你得记住回家的路哦。”“宝贝,我们昨天出来散步走到哪儿啦?妈咪还想去那儿。宝贝带妈妈去好不好?”
5、欣赏古典音乐---@脑波音乐
脑智能学的研究表明,多给孩子欣赏一些优美的古典音乐作品不仅可以陶冶孩子性情,还可以增强孩子对语言的记忆力。这种训练最早可以从孩子听胎教音乐开始。不管孩子是在玩玩具、做游戏、读书还是吃饭,家长都可以放一些比较轻柔优美的音乐,让孩子有意无意地欣赏就可以了。
6、创设各种有趣的记忆游戏
游戏始终是孩子的最爱。孩子在游戏过程中身心都处于亢奋状态,这时候孩子记忆的积极性被最大限度地调动起来。“妈妈,我们玩昨天玩的游戏好不好?”孩子可能把具体玩游戏的时间搞错,但是他会记住游戏本身。根据孩子的这一特点,父母可以自己创设一些有趣的游戏来帮助孩子提高记忆力。
7、适当重复,加深印象
越熟悉的事物孩子越容易记住,适当重复可以帮助孩子对需要记忆的对象加深印象,产生长久的记忆。比如,父母想要让孩子认识各种颜色,其实根本不需要拿出专门的时间来教孩子认识颜色,只要在日常生活中,见到什么物品告诉孩子这是什么颜色:“这些红色的花好漂亮。”“宝宝要吃苹果,这个红红的苹果很好吃。”经过多次重复,孩子就能牢记各种颜色。
8、用各种有趣的形象辅助记忆
配上一些图片、采用夸张的动作与声音等,如我们右脑课堂的联想词记忆,运用夸张有趣的故事把词语串联起来,有利于孩子的记忆;如边讲故事边做动作,或将故事画成连环画,和孩子一起一边画一边看着画面讲故事,这些都有助于孩子更好地记忆所听到的故事。还可将想要孩子记忆的内容编成一段乐曲或一首有趣的儿歌,这样孩子就能记得又快又牢。
9、多感官参与记忆
引导孩子用多种感官参加记忆,提高记忆效果。我们右脑课堂的联想环节,就是运用故事里的多种感官,提高孩子的想象力和记忆力。如想让孩子认识纸的特性,父母可以让孩子把纸放在沾有水的桌面上,观察纸怎样把水吸干;把纸放在火上烧一烧,观察纸燃烧的情景;用手撕一撕,听听撕纸的声音,观察纸片不规则裂开的情形。通过这些有趣的实验,孩子就会牢记纸的主要特征。
10、教给孩子一些记忆策略
有意识地教给孩子归纳、分类、联想、比较等一些有效的记忆策略可以帮助宝贝提高记忆力。比如,孩子认识了苹果、梨、香蕉等,就可以教给孩子水果的概念;孩子分不清小鸭和小鸡,就可以引导孩子观察小鸭和小鸡最显着的区别——小鸭的嘴扁扁的,小鸡的嘴尖尖的;小鸭会游泳,小鸡不会游泳……总之,父母可以利用各种场合与时机,潜移默化地向孩子灌输这些记忆策略
㈣ 无土栽培常用的方法除了水培还有哪些
无土栽培法可以分为5种,即水溶液培养法、砂培养法、培养基培养法、混合培养法和营养膜培养法,其中最常用的是水培法和培养基法。
培养基法:中最有效和最有推广价值的就是有机质无土栽培
㈤ 细胞生物学中常用的实验技术或者方法
第二节 细胞生物学实验方法与技术
当前细胞生物学与医药保健事业联系的较为紧密的热点问题主要有以下几种:1)真核细胞基因结构及其表达调控;2)细胞膜、膜系、受体与信号传递研究;3)细胞生长、分化、衰老、癌变、死亡,尤其是程序性细胞死亡的研究;4) 细胞工程,包括基因工程及体细胞核移植的研究。
一、细胞培养常用方法
1、细胞原代培养(primay culture) 又称初代培养,即直接从机体取下细胞、组织、或器官、让他们在体外维持与生长。原代细胞的特点是细胞或组织刚离开机体,他们的生物状态尚未发生很大的改变,一定程度上可反映他们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性,因此用于药物实验尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等研究是极好工具。常用的原代培养方法有组织快培养法及消化培养法。前者方法简单,细胞也较易生长,尤其是培养心肌有时能观察到心肌组织块的搏动。细胞从组织块外长并铺满培养皿或培养瓶后即可进行传代。2、细胞的传代培养 当细胞生长至单层汇合时,便需要进行分离培养否则会因无繁殖空间、营养耗竭而影响生长,甚至整片细胞脱离基质悬浮起来直至死亡。为此当细胞达到一定密度时必须传代或再次培养,目的是借此繁殖更多的细胞,另一方面是防止细胞的退化死亡。
二、器官培养方法
器官培养(organ culture)是指用特殊的装置使器官、器官原基或它们的一部分在体外存活,幷保持其原有的结构和功能。器官培养可模拟体内的三维结构,用于观察组织间的相互反应、组织与细胞的分化以及外界因子包括药物对组织细胞的作用。
器官培养方法很多,最经典的方法即表玻皿器官培养法;一种最常用的方法是不锈钢金属网格法及Wolff培养法和扩散盒培养法,实验者可根据情况选择采用。
三、放射自显影术测定
放射自显影术(autoradiography)是利用放射性同位素电离辐射对核子乳胶的感光作用,显示标本或样品中放射物的分布、定量以及定位的方法。放射性同位素能在紧密接触的感光乳胶中记录下它存在的部位和强度,准确显示出形态与功能的定位关系。现已可将放射自显影术与电镜以及生物分子结合起来。不但可以研究放射性物质在组织和细胞内的分布代谢,而且可以揭示核酸合成及其损伤等改变,目前已在生命科学各领域被广泛应用。
四、染色体分析技术
染色质或染色体是遗传物质在细胞水平的形态特征。前者是指当细胞处于合成期时遗传物质经碱性染料着色后,呈现出细丝状弥漫结构;当细胞进入分裂期时,染色质细丝高度螺旋化凝聚为形态有特征的染色体。特别是在分裂中期,复制后的染色体达到最高程度的凝聚,称为中期染色,是进行染色体形态观察分析的最佳时期。染色体分析应用领域越来越广,主要用于以下几方面:1)为临床诊断提供新手段;2)研究不育和习惯性流产发生的遗传基础;3) 通过检查胎儿的染色体,预防有染色体异常患儿出生(先天愚型);4)根据染色体的多肽性进行亲子和异型配子的起源研究;结合DNA重组技术可以将基因定位于染色体的具体区带上。
五、电镜技术
早在1940年,英国剑桥大学首先试制成功扫描电子显微镜,但因分辨率低无实用价值。1965年英国剑桥科学仪器有限公司开始生产出商品扫描电镜,其以显着优点广泛用于生物学、医学、物理学、化学、电子学及勘探、冶金、国防、公安、机械与轻工业等诸多领域,并已成为非常有用的研究工具。
㈥ 大学生的培养方式都分哪些呢
作为一名大学老师,我对这个问题还是很清楚的。这几年,高考扩招,高等教育规模增长速度越来越快,高校毕业生就业问题已成为全社会都十分关注的问题。
十年寒霜苦读进入高等学府,而高校必然面临着毕业生就业的巨大压力。如何培养高素质的优秀人才,以满足社会的需要,使大学生毕业即能实现充分就业,如何破解这一两难困境仍摆在高校一个重要的课题,也是高等教育亟待解决的问题。
更重要的是,每位老师在教学工作中,都努力的善待每一位学生,以良好的职业道德与素养,以先进的教学理念去影响指导每一位学生。
每位老师都希望自己的学生能学有所成,能有一个美好的未来,也希望我们的教学培养方式能为大家的未来有所帮助。
㈦ 目前病毒分离培养最常用的方法是
一般来说病毒培养的方法有三种 一是动物接种 常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种部位。二是鸡胚接种 鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜。第三是组织培养 将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒,根据细胞的来源,染色体特性及传代次数又可分为下列类型:原代和次代细胞培养,二倍体细胞株和传代细胞系。 最常用的应该是细胞培养。
㈧ 晶体培养的常用方法有哪些
(1)溶液挥发。将样品溶解在沸点较低的溶剂内,溶液在室温下缓慢挥发,样品浓度逐渐增大,然后饱和,析出晶体。
(2)重结晶。适合高温易溶但低温溶解度差的样品。配制样品的热饱和溶液。热溶液冷却过程中,样品溶解度逐渐减小,析出晶体。
(3)扩散法。将样品用易溶的溶剂溶解,溶液置于试管内。同时用滴管,沿着试管壁小心加入另一种不能溶解样品的溶剂。两种溶剂之间必须是能互溶的。第二个溶剂加入后,由于密度的不同,会与样品溶液发生分层,而不会立即混匀。两种溶剂在相互扩散的过程中,经常能在二者界面附近得到晶体。
(4)另一种扩散法。将少量样品溶液置于试管内,试管置于一个大瓶子内。大瓶子底部装有少量不能溶解样品的溶剂,并且该溶剂沸点低于溶解样品的溶剂。将大瓶子盖好,大瓶子内的溶剂蒸气会逐渐挥发扩散进入试管,与试管内的溶液混合,造成样品溶解度降低,析出晶体。
无论哪种方法,样品溶液都需要过滤去掉不溶物。而且更纯的样品更容易得到高质量的单晶。
㈨ 细菌培养的方法有哪些
根据培养细菌的目的和培养物的特性培养方法分为一般培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法三种。
1、一般培养法:将已接种过的培养基,置37℃培养箱内18-24小时,需氧菌和兼性厌氧菌即可于培养基上生长。少数生长缓慢的细菌,需培养3-7天直至一个月才能生长。
为使培养箱内保持一定湿度,可在其内放置一杯水。培养时间较长的培养基,接种后应将试管口塞棉塞后用石腊凡士林封固,以防培养基干裂。
2、二氧化碳培养法:某些细菌,如牛流产布氏杆菌和胎儿弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空气中才能生长,尤其是初代分离培养要求更为严格。将已接种的培养基置于二氧化碳环境中进行培养的方法即二氧化碳培养法,
3、厌氧培养法:常用的厌氧培养方法有厌氧罐法、气袋法及厌氧箱三种。
(9)常用的培养方法有几种扩展阅读:
培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基,制定培养条件(温度、pH值、时间,对氧的需求与否等)。
一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上,做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。
一般细菌可在有氧条件下,37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。
通过日常管理、检测、检查,了解光合细菌的生长情况,就可以结合当时环境条件的变化进行分析,找出影响光合细菌生长繁殖的原因,采取相应的措施。影响光合细菌生长的原因很多,内因是菌种是否优良,外因是光照、温度、营养、敌害和厌气程度等。
温度、光照和pH值都能影响着光合细菌的生长,而且温度、光照和pH值之间是互相制约的,温度与光照的强弱是对立统一的,所以光合细菌生长的最适条件应是互应的,即温度高,光照应弱;温度低,光照应强。
如果是温度高,光照强,pH值就会迅速升高,培养基产生沉淀,抑制光台细菌的生长;如果温度低,光照弱,光合细菌得不到最佳能源,生长速度也慢。经试验得出光合细菌生长的最适条件是:
①温度15~20℃时,光照30000~50000lx,培养基pH值为7.0;
②温度25~30℃时,光照为3000~5000lx,培养基的pH值为7.0。