A. 培养流感病毒的方法有哪几种
鸡胚传代培养、MDCK细胞培养、本动物回归培养。
B. 如何培养病毒
培养某个生命,要给它养料。病毒只能以活细胞内的营养物质生活。所以要以活细胞为“培养基”来培养。具体做法以噬菌体病毒的培养为例:在培养基中加入完全培养液,再加入适量的大肠杆菌,然后接入噬菌体病毒,盖上盖子,放在适宜条件下就行了。
C. 病毒的培养方式有哪些
动物接种:病毒经注射、口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖,并使动物产生特定的反应。优点:操作方面易行。
D. 目前病毒分离培养最常用的方法是
一般来说病毒培养的方法有三种 一是动物接种 常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种部位。二是鸡胚接种 鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜。第三是组织培养 将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒,根据细胞的来源,染色体特性及传代次数又可分为下列类型:原代和次代细胞培养,二倍体细胞株和传代细胞系。 最常用的应该是细胞培养。
E. 病毒常用的培养方法有哪些
适龄鸡胎接种,传代培养,组织细胞培养,易感动物接种。
F. 目前病毒分离培养的主要方法是哪一种
1.动物接种
这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同,选择敏感动物及适宜接种部位。
2.鸡胚接种鸡胚对多种病毒敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上。
3.组织培养
将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型:器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒,根据细胞的来源,染色体特性及传代次数又可分为下列类型:原代和次代细胞培养,二倍体细胞株和传代细胞系。
G. 病毒的人工培养方法
病毒研究的发展常常与病毒培养和检测方法的进步有密切的关系,特别在脊椎动物病毒方面,小鼠和鸡胚接种、组织培养、超速离心、凝胶电泳、电子显微镜和免疫测定等技术,对病毒学的发展具有深刻的影响。
噬菌体的培养和检测方法最为简单。将噬菌体接种到易感细菌的肉汤培养物中,经18~24小时后,混浊的培养物重新透明,此时细菌被裂解,大量噬菌体被释放到肉汤中,再经除菌过滤,即为粗制噬菌体。为了测定其中噬菌体的数量,将粗制噬菌体稀释到每一接种量含100个左右,与过量的细菌混合,然后铺种于琼脂平皿上,在温箱中培养过夜,细菌繁殖成乳白色衬底,被噬菌体裂解的区域则在此衬底上表现为圆形的透明斑,称为噬斑。噬斑数代表该接种量中有活力的噬菌体数量。如果挑出单个噬斑来培养,就能获得由单个噬菌体所繁殖的后代,达到分离纯化的目的。
动物病毒(见脊椎动物病毒)的培养可在自然宿主、实验动物、鸡胚或细胞培养中进行,以死亡、发病或病变等作为病毒繁殖的直接指标,或以血细胞凝集、抗原测定等作为间接指标。收获发病动物的组织磨成悬液或有病变的细胞培养液,即为粗制病毒。测定活病毒数量可采用空斑法,其原理与噬斑法相同,但以易感的动物单层细胞代替细菌,在接种适当稀释的病毒后,用含有培养液和中性红的琼脂覆盖,使病毒感染局限在小面积内形成病变区,衬底的健康细胞被中性红染成红色,病变区不染色而显示为空斑。
至今植物病毒的培养和检测大都是在整株植物上进行的。从捣碎的病叶汁中制备病毒,常用枯斑法检测。用手指蘸上混有金刚砂的稀释病毒在植物叶片上轩轻摩擦,经一定时间后出现单个分开的圆形坏死或退绿斑点,称为枯斑。
除了利用病毒的致病性定量检测病毒外,还可应用物理方法,如在电子显微镜下计数病毒颗粒,或用紫外分光光度计测定提纯病毒的蛋白和核酸量,这些方法所测得的数据包括了有感染性和无感染性的病毒粒。
应用电子显微镜不但能看清病毒粒的大小、形态,还可以分辨其表面的蛋白亚单位和内部的核壳等超微结构。
H. 病毒的培养方法有哪些为什么不能用一般培养基来培养病毒
适龄鸡胎接种,传代培养,组织细胞培养,易感动物接种。不可以。病毒是寄生在活体上的生物,而培养基是没有生命的有机物或无机物,病毒在上面不能生存。
病毒的结构是有一个DNA,和蛋白质外壳,和其它功能性的附属结构。
病毒不能自己生产蛋白质,它只有在寄生在活体上之后,把自己的DNA,注入到寄主细胞内,和寄主DNA结合,然后表达,利用寄主的蛋白质、DNA的和成功能,和成自己的蛋白质外壳,DNA,然后这些DNA和外壳在及主细胞破裂之后溢出,重新组合成好多病毒,感染其它细胞或寄主。 可以看出,这个细胞必须有生命(新陈代谢,能合成蛋白质DNA等),培养基是不行的。