❶ 微生物药敏试验（一）：纸片扩散法
药敏试验，是评估微生物（包括病毒、细菌）对特定抗生素敏感性或耐药性的科学程序。这项试验的目的是理解致病微生物如何对各类抗生素作出反应，从而为临床医生提供选择最佳抗生素治疗患者感染的依据。药敏试验结果可以分为敏感、中介和耐药三种情况，分别表示药物对细菌的活性程度和治疗可能性。
药敏试验在临床治疗、耐药性监测和新药验证等领域具有重要意义。它指导临床合理选择抗生素，防止药物滥用，减少治疗成本，缩短疗程，并对维护公共卫生安全、控制疾病的传播起到关键作用。试验中，研究人员通过将浸有抗生素的纸片贴在含有致病菌的琼脂平板上，观察抗生素扩散形成的抑菌圈大小，以此判断微生物对特定药物的敏感程度。
纸片扩散法（Kirby-Bauer法）是药敏试验中常用的简便方法。其基本原理是：抗生素纸片中的药物通过琼脂传递给周围微生物，形成递减浓度梯度。在抑菌浓度范围内，微生物生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的直径与药物对微生物的最低抑制浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC值越小，表示微生物对药物的敏感度越高。
在操作过程中，需要收集样本并进行无菌处理，分离出待测菌种，制备合适的菌悬液，确保其浓度满足试验要求。之后，将菌悬液均匀涂布在琼脂平板上，并贴上预先准备的药敏纸片。纸片需紧贴琼脂表面，间距保持一定距离，以保证试验结果的准确性和重复性。平板需在适宜的温度下培养一段时间，期间观察抑菌圈的形成情况。
试验结果的判断依据是抑菌圈的大小，以此评估微生物对特定药物的敏感性。敏感、中介和耐药分别对应不同的MIC值和治疗策略。敏感表示药物在常规剂量下对病原微生物有效，中介表示在高剂量下或特定条件下有效，而耐药则表示药物无法抑制微生物生长。
通过药敏试验，研究人员可以了解不同微生物对多种抗生素的敏感性和耐药性，为临床医生提供精确的治疗建议，确保患者得到最合适的治疗方案，同时有助于监测和控制耐药菌株的产生和发展。这种试验在普通微生物实验室中应用广泛，为公共卫生和临床医学领域提供了重要支持。
❷ 通过抑菌圈直径判断细菌对不同药物的敏感性，而不以最小抑菌浓度（MIC）判断药物抗菌作用的药敏试验方法是
【答案】：C
本题考查具体的药敏试验方法。药敏试验方法包括稀释法（肉汤稀释法、琼脂稀释法）、纸片扩散法、E-test法等。其中稀释法和E-test法均为读取抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC）；纸片扩散法是通过比较含药纸片在培养基上产生的抑菌圈直径（mm）与CLSI规定规定的敏感、中介、耐药的直径值，从而判断细菌对不同药物的敏感性。
❸ 幽门螺杆菌药敏实验怎么做
幽门螺杆菌药敏实验是一种检测方法，用于确定幽门螺杆菌是否存在于人体内，以及哪种抗生素对这种细菌最为敏感。这种检查对于诊断和治疗胃部疾病至关重要，尤其是当患者出现胃区不适时，医生会建议进行这种检查。
幽门螺杆菌感染是常见的胃部疾病原因之一，可以通过多种方式进行检测。其中最常用的是碳十四或碳十三呼气试验，这种试验可以在三甲医院的消化内科进行。患者在医生的指导下完成呼气试验，通过检测呼出气体中的特定成分来判断是否存在幽门螺杆菌感染。
当患者出现胃区不适的症状时，建议前往正规的三甲医院消化内科进行诊治。医生会根据患者的症状和体征，进行详细的检查和诊断，以确定是否需要进行幽门螺杆菌药敏实验。只有在确诊后，医生才能根据实验结果选择最合适的抗生素进行治疗，从而有效控制病情。
值得注意的是，药敏实验的结果对于指导治疗方案的选择非常重要。通过这项实验，医生可以了解不同抗生素对幽门螺杆菌的敏感性，从而选择最有效的药物进行治疗，提高治疗成功率。
总的来说，幽门螺杆菌药敏实验是诊断和治疗幽门螺杆菌感染的关键步骤。患者在出现胃部不适时，应及时就医并进行相关检查，以确保获得准确的诊断和有效的治疗。
❹ 药物敏感试验的药物敏感试验的方法
测定细菌对抗菌药物敏感性的试验称为药物敏感试验或简称药敏试验。由于养鸡业中抗菌药物的广泛使用，导致抗药菌株越来越多，盲目用药常常效果不佳。因此，进行药物敏感试验已成为正确使用抗菌药物的必要手段。药物敏感试验的方法有多种，如纸片扩散法、试管法、挖洞法等。其中，纸片扩散法简便易行，出结果快，是目前生产中最常见的方法，现将该种方法介绍如下：
（1）药敏纸片的准备
常用抗菌药敏纸片已有商品供应，一般可以买到，可直接利用。
（2）药敏培养基的制备
①普通肉汤琼脂：又称营养琼脂。蛋白胨10克、氯化钠（NaCl）15克、磷酸氢二钾（K2HPO4）1克、琼脂20克、牛轮岁逗肉浸出液1000毫升（可用牛肉浸膏10克浸于1000毫升蒸馏水代替）。
牛肉浸出液的配制方法：取瘦牛肉去掉脂肪、腱膜等，绞碎或切碎，按500克牛肉加1000毫升蒸馏水混合，置4℃冰箱内过夜，取出后加热到80～90℃，经1小时后，以数层纱布滤除肉渣并挤出肉水，再用脱脂棉过滤，量其体积并用蒸馏水补足1000毫升，分装后20分钟高压蒸汽灭菌，即制成牛肉浸出液。
将以上其他成分加入到牛肉浸出液中，加热溶解，冷却后调pH至7.6，煮沸10分钟，用滤纸过滤后分装，再以10.4万帕高压蒸汽灭菌25分钟，取出后冷却至55℃左右，在90毫升直径灭菌的平皿上倾注成4毫米厚的平板。做好的平雀乎板，密封包装后可在冰箱中保存2～3周。使用前应将平皿置37℃温箱中培养24小时，确认无菌后再用于试验。
②鲜血琼脂：将灭菌的营养琼脂加热融化，至45～50℃时加入无菌鲜血5%（每100毫升营养琼脂中加入鲜血5～6毫升）倾注平皿。无菌鲜血，用无菌手术取健康动物（绵羊或家兔等）的血液，加入盛有无菌5%柠檬酸钠溶液的容器中（血与5%柠檬酸钠的比例为9∶1）混匀，置冰箱中保存备用。
（3）试验方法
临床上分离到的细菌进行纯培养。用灭菌的接种环挑取被检菌的纯培养物划线或涂布于平板上，并尽可能使其密而均匀。用灭菌镊子将药敏纸片平放于平板上并轻压使其紧贴平板。直径9.0厘米的平皿可贴7张纸片，纸片间距不少于24毫米，纸片与平皿边缘距离不少于15毫米。贴好后将平板底部朝上置于37℃温箱中培养24小时，取出观察结果。
（4）结果判定
凡对被检菌有抑制力的抗菌药物，由于向周围扩散，抑制细菌的生长，故在纸片周围出现一个无细菌生长的圆圈，称为抑菌圈。抑菌圈越大，说明该菌对此种药物敏感度越高，反之越低。如果无抑菌圈，则说明该菌对此种药物具有耐药性。所以，判定结果时，以抑菌圈直径的大小来作为细菌对该药物敏感度高低的标准。
一般来说，抑菌圈直径70毫米以上为极度敏感，15～20毫米为高度敏感，10～15毫米为中度敏感，10毫米以下为低敏感，无抑菌腊卖圈为不敏感。对多黏菌素的作用，抑菌圈在10毫米以上者为高度敏感，6～9毫米为低度敏感。
经药敏试验后，应该选择极度敏感或高度敏感的药物进行治疗。