导航:首页 > 知识科普 > dna提取方法有哪些方法有哪些方法

dna提取方法有哪些方法有哪些方法

发布时间:2025-01-17 01:05:18

⑴ 提取DNA的方法总结与比较

dna提取是一项经常要做的实验,下面我们就总结了四种dna提取方法并做详细说明和比较。

一.浓盐法提取dna:

A. 利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.

B. 也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.

两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.

C.以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

二.阴离子去污剂法提取dna: 用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA

三.苯酚抽提法提取dna:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态

四.水抽提法提取dna:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

阅读全文

与dna提取方法有哪些方法有哪些方法相关的资料

热点内容
手机外壳的加工方法 浏览:867
哪里可以学文笔的方法和技巧 浏览:106
快速分析人性的方法 浏览:779
捉老鼠的简单方法视频教学 浏览:333
帕金森病早期锻炼方法 浏览:975
高压锅电脑版使用方法 浏览:69
干皮病的介绍和治疗方法 浏览:807
钢管外防腐常用的方法是 浏览:260
视频信息的压缩有哪些方法 浏览:633
腰椎间盘突出的较佳治疗方法 浏览:145
紧急止血最佳方法 浏览:652
蜂毒面霜使用方法视频 浏览:760
语言写作技巧与方法 浏览:279
经线测量方法 浏览:967
串联电路二次回路的检测方法 浏览:892
欧尚a600导航没声音解决方法 浏览:583
鸡柳条的制作方法视频 浏览:143
石远凯最新治疗方法 浏览:349
海尔洗衣机安装在柜子的方法 浏览:972
儿童气球制作方法简单 浏览:743