压力蒸汽灭菌技术检测方法

① 高压蒸汽灭菌法效果最可靠的是哪种检测方法

细菌培养法。取灭过菌的样品，涂布到无菌培养基上，用未灭菌样品和未涂布的板子分别做对照，培养一定时间后数菌落数，即可获得灭菌效果。

② 脉动真空压力蒸汽灭菌器空锅做生物监测怎么操作

如果是做灭菌效果检测的话，常用下面两种方法：

一、化学指示卡测试法

将化学指示卡放置拟灭菌物品包中央。灭菌后，将包裹取出，观察指示卡，如果指示卡色块颜色达到或深于卡面标准色，说明物品包中心已达到灭菌温度和时间；如果指示剂颜色无变化或变色浅于标准色，则表明未达到规定的灭菌温度和时间。

二、生物监测法。通常采用国际通用的热力灭菌试验菌株为嗜热脂肪芽胞杆菌。将生物指示剂放入标准试验包中心部位。试验包大小为25 cm×30 cm×30 cm。测试设5个点,分别为灭菌柜（上层中心,中层左前,右后,下层左后,排气口附近）。按灭菌操作程序,灭菌结束后，压碎安瓿培养基与菌片混合一起置于56°C培养箱内,24 h～48 h之间观察结果。如培养基的灭菌管，说明无嗜热脂肪芽胞杆菌生长繁殖，表示灭菌彻底；如由紫红色变为黄色，说明有嗜热脂肪芽胞杆菌生长繁殖，表示灭菌失败。

(2)压力蒸汽灭菌技术检测方法扩展阅读：

灭菌原理：利用机械抽真空的方法，使灭菌室内形成负压，蒸汽得以迅速穿透到物品内部，与器械接触后饱和蒸汽释放出大量的潜热（2250KJ），当蒸汽遇到冷的灭菌物品时即冷凝成水，释放全部潜热，使灭菌物品的温度快速的升高，迅速升高的温度使细菌中的蛋白质凝固变性，从而将所有微生物包括细菌芽孢全部杀死。

灭菌过程：待灭菌器械由消毒员放置到专用灭菌架内，推入灭菌器，关闭前门，操作人员运行灭菌器已预先设定好的灭菌程序进行灭菌处理。程序运行过程如下：脉动——升温——灭菌——排汽——干燥——结束。

a．脉动：对灭菌器内室进行抽真空、进蒸汽操作，反复进行三次，然后再次抽真空，待内室压力到达脉动下限后，程序转入升温阶段。经过该阶段后，内室的冷空气排除率可达到99%以上，确保内室无死点，保证灭菌的合格。

b．升温：蒸汽经过灭菌器夹层进入内室，对器械进行加热，同时内室疏水阀间歇性开启，将蒸汽冷凝后产生的水排出。内室温度达到设定值后程序转入灭菌阶段。

c．灭菌：开始灭菌计时，在此期间内室进汽阀受到内室温度和压力的共同控制以确保内室保持在一定的温度范围内对器械进行灭菌。当内室温度高于灭菌器设定的数值上限时，进汽阀关闭，低于数值下限时，进汽阀打开；同时，当内室压力高于数值上限时，进汽阀也会关闭，低于内室压力下限值时，进汽阀打开以确保灭菌阶段温度的上下波动不超过3°。灭菌计时结束后，程序转入排汽阶段。

d．排汽：排汽阀打开，内室的蒸汽在内外压差的作用下排出，经过换热器的作用，大部分蒸汽冷凝成水，少部分蒸汽经过滤后排至大气。内室压力下降到设定值后，程序转入干燥阶段。

e．干燥：真空泵打开对内室进行抽真空，同时夹层保持一定的压力和温度，起到烘干器械的作用。

f．结束：蜂鸣器呼叫，此时可以打开门将灭菌车推出进行器械的晾放。

③ 压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测

B-D试验是用于检测预真空（脉动真空）压力蒸汽灭菌器冷空气排出情况的试验，该试验是根据指示图颜色的改变是否均匀来判断灭菌器在灭菌过程中是否有冷空气团残留。
1 材料与方法
1.1 材料 采用江苏连云港医疗器械厂生产的DMQ－0.3型脉动真空压力灭菌器，3M公司生产的B-D测试纸，自制纯棉布标准包。
1.2 方法 B-D试验包由纯棉布巾50cm×90cm大小的50条组成，布巾先横折为3层，再纵折形成6层。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度，摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替摆放，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，将化学指示图水平的夹放于中央层布巾之间，然后用布将所有布巾包成一试验包，外面用3M化学指示剂胶带固定，整个布巾包的大小，高约25cm，宽23cm，长27cm，重4kg。将试验包水平放于空锅内，靠近柜门与排气口处，在蒸汽源压力0.30～0.50MPa，水源压力0.15～0.30MPa条件下，抽真空3次，以真空度为0.086MPa，达到工作压力0.21MPa，温度134℃，灭菌3.5～4min，取出后观察判断结果。
2 判断标准B-D测试纸显示黑白线条分明，颜色均匀，清晰，说明蒸汽快速渗透，冷空气排除，无明显空气泄漏，无冷空气团存在，表示测试合格。B-D测试纸出现变色不均匀或测试纸中间部位比外部颜色淡，表示监测不合格。

3讨论分析脉动真空压力蒸汽灭菌器B-D试验失败的原因主要有：（1）新棉布巾未洗净，有浆存在，蒸汽难以穿透;（2）旧棉布巾测试后未洗涤，布与布之间受高热蒸汽的影响，互相压紧，使蒸汽不容易穿透，影响潜伏热的释放，试纸图案中间色泽浅［1］；（3）测试包包扎过紧，影响蒸汽穿透，图案黑白线不清；（4）蒸汽压力不足，蒸汽压力不到0.3MPa；（5）灭菌器使用前预热时间不够，特别是冬季，如预热时间少于10min，也会出现图案中间部位颜色比外部淡；（6）布巾过分干燥，造成布巾湿度过低，蒸汽进入灭菌柜后不能凝结成水和释放潜能，产生过度饱和状态，图案呈不均匀灰色［2］；（7）布巾过于潮湿，高温蒸汽进入柜室内遇到冷的潮湿的布巾，迅速凝结成水，多余的水份向测试纸渗透形成水渍，影响热穿透，图案白色线条边缘黄褐色［2］；（8）灭菌器出现故障，真空泵效果下降，致使柜室未达到应有的真空程度；自控系统失灵，抽气时间缩短，密封圈老化，不能维持规定的负压，造成排除冷空气的同时仍有冷空气的渗入，影响测试结果［1］。通过对B-D试验包的规范制作，并做到每次测试后的布巾都必须洗涤后方才使用；避免布巾过干或过湿；布巾包松紧适宜；灭菌器出现故障时，及时请专业维修人员进行检修，灭菌器维修后，进行复测B-D试验。经查找原因并改进后2005年进行的145次B-D试验全部合格。供应室灭菌质量的保证是防止医院感染的重要措施之一。而脉动真空压力蒸汽灭菌器内冷空气团的残留，将影响灭菌器的灭菌效果。B-D试验是检测脉动真空压力灭菌器是否达到灭菌要求的重要指标之一。因此，高压灭菌前，必须对脉动真空压力（预真空）灭菌器进行B-D试验。分析B-D试验失败的原因，避免因技术因素所致的B-D试验失败而造成的人力、物力、时间等资源的浪费，保证压力蒸汽灭菌器灭菌效果的可靠性。

④ 立式压力蒸汽灭菌器如何做热分布测试

灭菌器验证：1. 灭菌器设备专用验证系统，16路温度巡检。2. 自动修正测温传感器误差，精度可达0.15℃。3. 验证程序科学，验证数据和结论不可更改，确保验证结果真实、科学。温度验证流程：1. 测温传感器零点，高校正。2. 温度空载热分布，必须具有三次的温度重现性，找出最冷点。3. 温度装载热分布，具有最少三次的温度重现性，确定最冷点。4. 温度装载热穿透，同样必须具有三次温度重现性，在设定灭菌程序下，确保最冷点FO值满足工艺要求。单独的微生物指示剂测试报告。同时可做多台，但检测仪多套。你这种灭菌器要用无线验证仪去做验证

⑤ 检验科血液标本 高压蒸汽灭菌方法 怎么防止喷溅出来

高压蒸汽灭菌后自然冷却即可。不能直接排气减压，那样标本会喷溅出来。

⑥ 压力蒸汽灭菌化学测试包是BD包吗

高压真空消毒锅BD包规格是20/box 4 boxes/case。
空高压蒸汽消毒锅是利用机械抽真空的方法，使消毒锅室内形成负压，抽出冷空气，使蒸汽得以迅速穿透物品内部进行灭菌。但在使用过程中，由于其工作程序较复杂，常受到温度、高压等受多种因素的影响，必须严格质量管理，才能确保灭菌效果。
B-D测试(Bowie—Dick test) 专门用于预真空(包括脉动式喷射式等)高压蒸汽消毒锅空气排除效果的监测。预真空不可能达到绝对真空(约有 2%空气)。因此，空气的存在影响蒸汽对物品的穿透和杀菌效果，可导致灭菌失败。所以，高压蒸汽灭菌时以物品包中是否有空气团的存在作为灭菌能否成功的一个重要指标。卫生部《消毒技术规范》要求：每日进行一次B-D测试。如B—D测试失败，须仔细查找原因，直至B-D测试通过后，该消毒锅方能使用。B-D测试设计原理是使试验包成为消毒锅内残留空气的聚焦点，因为热蒸汽进入柜内时，它相对较大的体积和可透气性布料极易吸附、“捕捉”残留空气。真空测试图上的化学指示剂对残留空气具有敏感性，能检测出残留空气在试验包中是否存在。

⑦ 小型压力蒸汽灭菌器的监测怎么做测试包是多大尺寸

小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌制作生物测试包或生物PCD(灭菌过程验证装置Process Challenge Device,PCD)，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放。

压力蒸汽灭菌B-D测试方法： 具体作法是:B-D测试包由100%脱脂纯棉布折叠成长30cm±2cm、宽25cm±2cm、高25cm～28cm大小的布包裹；将专门的B-D测试纸，放入布测试包的中间；测试包的重量为4kg±5%或用一次性B-D测试包。B-D测试包水平放于灭菌柜内灭菌车的前底层，靠近柜门与排气口底前方；柜内 除测试包外无任何物品; 134℃，3.5min～4min后，取出B-D测试纸观察颜色变化，均匀一致变色，说明冷空气排除效果良好，灭菌锅可以使用；反之，则灭菌锅有冷空气残留，需检查B-D测试失败原因，直至B-D测试通过后该锅方能使用。

需要纠正一个概念，用于化学监测即B-D试验的是B-D测试包，需每日进行一次。而标准包一般是指用于生物监测。

用于预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器的标准包制作方法则是：16条全棉手术巾每条41cm×66cm，将每条手术巾的长边折成3层，短边折成2层，然后叠放，包裹成大小为23cm×23cm×15cm即可。将两个生物指示剂置于标准包中心部位，后将包至于灭菌柜内排气口上方。经过一个灭菌周期后，将生物指示剂取出培养，并设阴性和阳性对照，观察其颜色变化以判断灭菌效果。

⑧ 高压蒸汽灭菌法灭菌效果的检测方法包括那三种

1. 灭菌包内放化学指示卡
2. 生物检测方法
3. 进行B-D实验

⑨ 压力蒸汽灭菌的化学监测包括哪些

化学检测有四种方法：
1. 设备监测，也就是B-D测试包，探测是否存在漏气
2. 装载监测，通过检查每锅次过程挑战装置（PCD）中生物指示物或者化学指示物的结果
3. 灭菌包裹监测,指通过对灭菌包内的化学指示物结果的判读，来确定特定的灭菌条件已经达到
4. 暴露监测,指使灭菌员可以一眼得出结论灭菌包裹是否经过了灭菌处理的方法,比如在灭菌物品表面贴灭菌指示胶带

⑩ 高压消毒锅的灭菌监测包括3点。

1， 生物学监测：使用活的细菌芽孢制成生物指示剂，其抗力均大于或等于各种致病微生物。在第 1个灭菌周期(灭菌时间3 min)对嗜热脂肪杆菌(ATCC7953)芽孢未全部杀灭。经过第 1个周期后(灭菌时间5、7、9min)对嗜热脂肪杆菌(ATCC7953)芽孢全部杀灭。

用生物指标剂来证明灭菌物品内微生物是否全部死亡，是判断灭菌是否合格的直接指标，也是最可靠的监测方法。高压蒸汽灭菌所用生物指示剂是用嗜热脂肪杆菌芽孢制备，干热灭菌和环氧乙烷灭菌所用生物指示剂则是以枯草杆菌黑色变种芽孢制备的。

但由于使用生物指示剂操作复杂，几天后才能出结果，不适于日常监测。卫生部《消毒技术规范》要求，使用生物法监测高压蒸汽消毒锅每月1次。监测使用的生物指示管必须放于标准包内，标准包放在消毒锅的最低层，主要考虑蒸汽穿透物品的时间和高压蒸汽消毒锅温度最低处，具有代表性。

2，化学监测：用某些热敏化学物质配成印墨印制而成。在一定温度的饱和蒸汽条件下作用一定时间，使其颜色改变，再根据标准色来判断是否达到灭菌条件，因此是间接指标，种类有B—D试验指标图、化学指示胶带和化学指示卡。

B-D测试(Bowie—Dick test) 专门用于预真空(包括脉动式喷射式等)高压蒸汽消毒锅空气排除效果的监测。预真空不可能达到绝对真空(约有 2%空气)。因此，空气的存在影响蒸汽对物品的穿透和杀菌效果，可导致灭菌失败。所以，高压蒸汽灭菌时以物品包中是否有空气团的存在作为灭菌能否成功的一个重要指标。卫生部《消毒技术规范》要求：每日进行一次B-D测试。如B—D测试失败，须仔细查找原因，直至B-D测试通过后，该消毒锅方能使用。B-D测试设计原理是使试验包成为消毒锅内残留空气的聚焦点，因为热蒸汽进入柜内时，它相对较大的体积和可透气性布料极易吸附、“捕捉”残留空气。真空测试图上的化学指示剂对残留空气具有敏感性，能检测出残留空气在试验包中是否存在。

化学指示胶带 (包外指示胶带) 用于每个包裹的包外，指示已暴露于某种灭菌过程，以区分灭菌和未灭菌的物品，而不能作为灭菌可靠与否的指示剂。

化学指示卡(包内指示卡) 是对消毒锅灭菌温度、时间、饱和蒸汽的综合反映，用于考核每个包裹内部灭菌情况，如果灭菌过程中出现消毒锅，蒸汽质量和人为因素都会使监测结果不准。