细菌耐药性检测方法

㈠ 细菌耐药怎么来监测由哪个部门来做。

院感科，药剂科，微生物室共同来做，院感科耐药监测的侧重点应该与药剂科、微生物室有所不同。院感科主要负责公布耐药趋势、多重耐药菌的检出率等来做。微生物室个人觉得应该增加送检的情况等内容，药剂科当然是根据数据指导临床用药了。

㈡ 细菌耐药性检测，统计菌株总数需要剔除定植吗

抗感染疗效不佳不一定是耐药 细菌耐药性又称抗药性,是指细菌对于抗菌药物作用的耐受性.耐药性一旦产生,药物的疗效就会明显下降.耐药性根据其发生原因可分为获得耐药性和天然耐药性.自然界中的病原体,如细菌的某一株也可存在天然耐药性.当长期应用抗生素时,占多数的敏感菌株不断被杀灭,耐药菌株就会大量繁殖,代替敏感菌株,而使细菌对该种药物的耐药率不断升高.目前认为后一种方式是产生耐药菌的主要原因.然而,临床上运用抗生素后治疗效果不佳,并不一定完全是由细菌耐药引起的,其原因主要有以下几点： 一、抗生素本身有效,但由于抗生素本身的药代、药效动力学机制,疗效需要一定的时间.药代动力学（PK）和药效动力学（PD）是临床药理学的两个重要组成部分,通常以传统上的体外药效学参数最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度为指导.在抗菌药物PK/PD 研究中,依据抗菌药物的抗菌作用与血药浓度或作用时间的相关性,大致可将其分为三类：浓度依赖性抗菌药物、时间依赖性抗菌药物及时间依赖性且抗菌作用时间较长的抗菌药物. 二、由于患者的症状是由很多因素引起的,有时虽然已经杀灭了致病细菌,但是其他因素仍然存在,症状不能完全好转.例如咳嗽,即使是细菌感染引起的,在使用抗生素杀灭了致病细菌后,仍然不能马上停止咳嗽.这是因为长期咳嗽会导致呼吸道上皮细胞损伤、气道反应性增高等,同样需要一定的修复时间.频繁更换抗生素更易导致耐药的发生. 三、患者自身免疫力低下,如营养缺乏、患自身免疫性疾病、肿瘤、艾滋病等.此类患者容易感染,并且感染后使用抗生素通常效果不佳. 四、可能是真菌感染,尤其是在滥用抗生素及机体自身免疫力低下的情况下更容易发生.及时行痰液检查,早期发现真菌,早期治疗,加强营养是治疗和预防真菌感染的主要措施. 五、某些超级细菌感染,如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐多药肺炎链球菌,这些细菌对绝大多数抗生素均不敏感,需要使用万古霉素等特殊抗生素才能杀灭. 抗生素不当联合适得其反 联合应用抗生素的目的是为了提高疗效、降低毒性、减少副作用、延缓或避免抗药性的产生.抗生素的选择,应根据细菌培养和药敏试验的结果而定.联合用药的指征包括：病因未明的严重感染,单一抗菌药不能有效控制的严重感染,单一抗菌药不能控制的混合感染,以减少毒性大的药物的剂量,长期用药致病菌有产生耐药性可能者. 不同种类抗生素联合应用可表现为协同、累加、无关、拮抗四种效果.按其作用性质可分为四类：A.繁殖期杀菌剂,如β-内酰胺类、先锋霉素族.B.静止期杀菌剂,如氨基糖甙类、多黏菌素类.C.速效抑菌剂,如四环素类、氯霉素类、大环内酯类等.D.慢效抑菌剂,如磺胺类.不同种类的抗生素可产生迥然不同的效果. A+B=协同,即作用加强；A+C=拮抗,即效果降低；B+D=协同或无关；C+D=累加,即作用互补；A+D=累加或无关；C+B=累加或协同.特别提示,A类繁殖期杀菌药作用原理为抑制细胞壁黏肽的合成,使细菌不能合成细胞壁缺损,菌体膨胀裂解而死亡,故而联用C类速效抑菌药时将会不起作用.因为C类药物作用机制为可与细菌核蛋白体50S亚基结合,抑制肽酰基转移酶,使蛋白质肽链延伸受阻而抑制细菌生长.而细菌不生长则不会合成细胞壁,使A类药物失去作用.曾有统计,联合使用抗生素时,60％~70％的情况下都表现为无关作用或相加作用,20％~25％的情况下表现为增强作用,10％~15％的情况下表现为相互拮抗作用.由此可见,联合使用抗生素有利有弊,甚至弊大于利. 在临床使用抗生素治疗感染性疾病时,凡使用一种抗生素能达到治疗目的的,避免使用第二种和第三种.只有这样才符合有效、简便、经济和降低不良反应发生率的原则.只有对那些感染特别严重、估计有两种以上细菌合并感染或估计使用一种抗生素难以控制的感染时,才考虑联合使用相应的抗生素.应严格遵循联合用药指征,并考虑不同种类抗生素联合应用的相互作用效果,选择合适的抗生素联合运用,否则会适得其反. 确定耐药后怎样应对 临床上对于运用抗生素后治疗效果不佳的情况应仔细鉴别.如果确定出现抗生素耐药,其补救思路包括： 首先,最重要的是进行药敏试验,即采集患者感染处的标本进行培养及药敏试验.根据药敏试验的结果,选择对此类细菌敏感的抗生素进行治疗.这样可更清楚明确地知道哪种药物最敏感,从而获得更好的抗菌效果.尤其需要注意的是,在使用抗生素时,应严格掌握抗生素的适应证.给药途径和给药方法应遵循有效少量的原则,避免重复用药. 其次,考虑联合用药.单一抗生素不易或难以控制的感染,以及混合感染、慢性感染、细菌产生耐药性者、深部感染药物难以渗透时,一般应联合用药.用药时应采取及时、足量、广谱的原则. 再次,换用其他抗生素持续治疗. 最后,停用所有抗生素.如果上述方法都试过了,但还是没有效果,可以谨慎考虑停用所有抗生素,临床观察一段时间后再决定下一步治疗方案. 链接 白细胞升高不是用抗生素指征 世界卫生组织推荐的抗生素医院内使用率是30%,欧美发达国家的抗生素院内使用率为22%~25%,但我国住院患者的抗生素使用率高达80%.中国真正需要使用抗生素的病人不到20%,80%以上属于滥用抗生素. 常见的抗菌药滥用现象包括上呼吸道病毒感染（感冒）时用抗菌药,儿童病毒性肺炎时用抗菌药；病毒性腹泻时用抗菌药,不恰当的抗菌药预防用药.在使用抗生素方面,目前存在一种误区,即一有发烧或一见白细胞增加就用抗生素.其实引起发烧的原因,并不一定都是细菌感染,即使是感染性疾病,也可以是病毒或其他病原体感染造成,绝不仅是细菌.白细胞增高的情况也是这样.

㈢ 我对有些抗生素比较耐药，但却不明白对那些，哪里有这方面的检测做

有个乐观肠道菌群基因检测，报告中有抗生素耐药可能的说明，详细罗列了常用抗生素耐药性风险预警，保证用药的安全性和有效性。

㈣ 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的MRSA的检测

由于MRSA的不均一耐药性，给其检测带来一定的困难。MRSA的检出率受孵育温度、时间、培养基的pH和NaCl的浓度、菌液的数量等多种因素的影响。因此，目前还没有一种最佳的检测方法。 本世纪80年代末期，国外就有人用聚合酶链反应(PCR)来检测PBP2a的mec A基因。它是根据金黄色葡萄球菌TK 784的mec A基因DNA序列[14]设计一引物，再裂解提取被测菌的DNA，在一定条件下进行扩增，经琼脂糖电泳后在紫外灯下观察有无与阳性对照菌株(金黄色葡萄球菌ATCC29213)相同的区带。PCR具有较高的灵敏度，只要被测菌有微量的的基因，即出现阳性结果，因此常作为检测MRSA的参考方法。陈秀枢实验表明[14]，金黄色葡萄球菌耐苯唑西林的耐药水平与mec A基因有较好的相关性。MIC>4 μg/ml的22株菌均检出mec A基因。由于PCR很灵敏，有时会因实验室的污染而出现假阳性，为使PCR具有更高的可靠性，必须对其扩增产物进行探针杂交或测序以提高特异性[15]。而有一些耐药基因是沉默基因，不表达mec A基因产物，有时会得出假耐药结论，所以分子生物学方法并非100%的敏感和特异，加上该法前期处理操作繁琐，且需要一定的设备，仅在可疑或特殊情况下做此试验。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的流行概况
自从1961年英国发现MRSA后，在欧美及亚洲一些国家相继报道了MRSA所致的院内感染。从60年代后期到80年代，MRSA感染率大大增加。美国NNIS报道1975年182所医院MRSA占金黄色葡萄球菌感染总数的2.4%，1991年上升至24.8%，其中尤以500张床以上的教学医院和中心医院为多，因为这些医院里MRSA感染的机会较多，耐药菌株既可由感染病人带入医院，也可因滥用抗生素在医院内产生[16]。欧洲1993年1417家医院ICU分离的MRSA达60%[17]。而日本Kansai医科大学附属医院MRSA的分离率1993年达到41%。国内在70年代发现有MRSA，近几年MRSA的检出率正在逐年上升，上海1978年在200株金黄色葡萄球菌中MRSA只占5%，1988年上升至24%，1996年激增至72%[18]。天津1988年调查MRSA分离率为47%[19]，北京医科大学附属医院1996年分离MRSA达58.3%[20]，山东淮坊市1996年在三家医院的婴儿室分离出金黄色葡萄球菌198株，其中MRSA为112株(56.5%)[21]。武汉同济医科大学附院1992年分离MRSA就达79.6%[22]。MRSA感染多发生于免疫缺陷者，大面积烧伤，大手术后患者，长期住院及老年患者，MRSA极易导致感染的流行和暴发。MRSA传播主要通过医护人员的手，在患者、医护人员、患者间播散，另外，衣物、敷料等物品可携带MRSA，促进MRSA在院内的流行，病人一旦感染或携带MRSA，该菌可存在于患者身上达数月之久。

㈤ 怎么知道一种细菌是否有抗药性呢

如不能移入培养基培养测试,目前没有什么好办法.应该说要测该菌对哪种抗菌素较敏感,只有在培养基上作多种药敏试验才行.

㈥ 细菌耐药性的机制及其预防原则

细菌耐药性的机制：

1、产生灭活酶：细菌产生灭活的抗菌药物酶使抗菌药物失活，是耐药性产生的最重要机制之一，使抗菌药物作用于细菌之前——即被酶破坏而失去抗菌作用。

2、抗菌药物作用靶位改变：由于改变了细胞内膜上与抗生素结合部位的靶蛋白，降低与抗生素的亲和力，使抗生素不能与其结合，导致抗菌的失败。

预防原则：

1、完善相关规章制度：

卫生主管部门通过建立检测、制定规章制度、完善抗菌药物的技术规范、开展专项整治活动、建立部际合作机制等举措，使得医务人员整体合理使用抗菌药物的能力有所提高，细菌耐药情况有所缓解，抗菌药物临床应用管理的长效机制初步建立。

2、实地措施预防：

对于携带多重耐药菌的患者，住院期间首选单间隔离，对于没有条件单间隔离的，要实行区域性隔离，并在患者床头卡和腕带上，贴上蓝色的接触隔离标识。

(6)细菌耐药性检测方法扩展阅读：

在卫生主管部门和医务工作者的共同努力下，我国在合理使用抗菌药物及遏制细菌耐药方面取得了一些进展。

从使用量看，与2010年相比，2015年住院病人的抗菌药物使用率降低了28个百分点，门诊处方抗菌药物使用降低了10个百分点，住院平均抗菌药物使用强度降低了44%。

从生产和使用看，抗感染类原料药产量占治疗类原料药的比重，从2011年的25%下降到2015年的15%。目前，在中国检出率比较高的主要是13种耐药菌，其中，有7种检出率下降，4种相对稳定，只有两种略有上升。

㈦ 关于多重耐药菌监测，包括哪些内容

具体如下：

加强对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耐万古霉素肠球菌（VRE）、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的细菌和多重耐药的鲍曼不动杆菌等实施目标性监测。

及时发现、早期诊断多重耐药菌感染患者和定植患者，加强微生物实验室对多重耐药菌的检测及其对抗菌药物敏感性、耐药模式的监测，根据监测结果指导临床对多重耐药菌医院感染的控制工作。

多重耐药菌（MDRO）主要时指对临床使用的三类或三类以上抗菌药物同时呈现耐药的细菌，常见的有耐甲氧金黄葡萄球菌（MRSA），耐万古霉素肠球菌（VRE），产超光谱β-内酰胺酶（ESBLS）细菌，耐碳青霉稀类抗菌药物肠杆菌（CRE），耐碳青霉稀类抗菌药物鲍曼不动杆菌（CR-AS），多重耐药/泛耐药性铜绿假单胞菌（MDR/PDR-PA）和多重耐药结核分枝杆菌等。

抗菌药物在人类战胜各种感染性疾病的过程中发挥了关键作用，但由于抗菌药物不合理使用﹑免疫抑制剂应用以及侵入性操作的开展，导致多重耐药菌（MORO）的感染形势日益严峻，由于多重耐药菌存在对多种抗菌药物无效的特征，且常定植于患者体内形成潜在感染源，故一旦在医院内出现感染或传播，将十分难以控制，给治疗和防控带来很大压力。

(7)细菌耐药性检测方法扩展阅读：

医疗机构应当采取措施，有效预防和控制多重耐药菌的传播。主要包括：

（一）加强医务人员的手卫生。

医务人员对患者实施诊疗护理活动过程中，应当严格遵循手卫生规范。医务人员在直接接触患者前后、对患者实施诊疗护理操作前后、接触患者体液或者分泌物后、摘掉手套后、接触患者使用过的物品后以及从患者的污染部位转到清洁部位实施操作时，都应当实施手卫生。手上有明显污染时，应当洗手；无明显污染时，可以使用速干手消毒剂进行手部消毒。

（二）严格实施隔离措施。

医疗机构应当对多重耐药菌感染患者和定植患者实施隔离措施，首选单间隔离，也可以将同类多重耐药菌感染患者或者定植患者安置在同一房间。不能将多重耐药菌感染患者或者定植患者与气管插管、深静脉留置导管、有开放伤口或者免疫功能抑制患者安置在同一房间。

医务人员实施诊疗护理操作中，有可能接触多重耐药菌感染患者或者定植患者的伤口、溃烂面、粘膜、血液和体液、引流液、分泌物、痰液、粪便时，应当使用手套，必要时使用隔离衣。完成对多重耐药菌感染患者或者定植患者的诊疗护理操作后，必须及时脱去手套和隔离衣。

（三）切实遵守无菌技术操作规程。

医务人员应当严格遵守无菌技术操作规程，特别是实施中心静脉置管、气管切开、气管插管、留置尿管、放置引流管等操作时，应当避免污染，减少感染的危险因素。

（四）加强医院环境卫生管理。

医疗机构应当加强诊疗环境的卫生管理，对收治多重耐药菌感染患者和定植患者的病房，应当使用专用的物品进行清洁和消毒，对患者经常接触的物体表面、设备设施表面，应当每天进行清洁和擦拭消毒。出现或者疑似有多重耐药菌感染暴发时，应当增加清洁和消毒频次。

四、加强抗菌药物的合理应用

医疗机构应当认真落实《抗菌药物临床应用指导原则》和《卫生部办公厅关于进一步加强抗菌药物临床应用管理的通知》（卫办医发〔2008〕48号）要求，严格执行抗菌药物临床应用的基本原则，正确、合理地实施抗菌药物给药方案，加强抗菌药物临床合理应用的管理，减少或者延缓多重耐药菌的产生。

五、加强对医务人员的教育和培训

医疗机构应当对全体医务人员开展有关多重耐药菌感染及预防、控制措施等方面知识的培训，强化医务人员对多重耐药菌医院感染控制工作的重视，掌握并实施预防和控制多重耐药菌传播的策略和措施，保障患者的医疗安全。

六、加强对医疗机构的监管

地方各级卫生行政部门应当高度重视多重耐药菌的医院感染预防与控制工作，加强对医疗机构的监督、管理和指导，促进医疗机构切实实施预防、控制多重耐药菌感染的各项工作措施，保障医疗安全。