简述格兰仕染色的原理和方法步骤

① 什么是革兰氏染色法染色过程应注意什么

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏（HansChristianJoachimGram，1853-1938）创立。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。

注意事项:

1.选用活跃生长期菌种染色,老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成贺雹假阴性。

2.涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性。

3.脱色是革兰氏染色是否成功的关键,脱色不够造芹拍答成假阳性,脱色过度造成假阴性。

方法原理：

用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。

酸性染料嫌慧的离子带负电荷，能与带正电荷的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色。中性染料是前两者的结合物又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等。