① 检验氨基酸用什么方法谢谢了,大神帮忙啊
你若是问蛋白质,我可以直接告诉你又双缩脲试剂(中学阶段),但氨基酸的检验比蛋白质麻烦多了。 一、氨基酸的分离和检测 氨基酸的分离和检测手段,以往用化学分析法、层析法、比色法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪。随着高效液相色谱及填料的发展,HPLC在氨基酸检测方面显示了其特有的优越性。但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射特性,为提高分析检测灵敏度和分离选择特性,通常将氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法与柱后衍生法。HPLC与各种衍生相结合的氨基酸分析技术,构成了具有广泛适用性的现代氨基酸分析技术。 二、鉴定是哪种氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。 1、茚三酮反应 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸环境加热) 紫色(脯氨酸、羟脯氨酸为黄色) (检验α-氨基) 2、坂口反应 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸 α-萘酚+碱性次溴酸钠 红色 (检验胍基 精氨酸有此反应) 3、米隆反应(又称米伦氏反应) HgNO3+HNO3+热 红色 (检验酚基 酪氨酸有此反应,未加热则为白色) 4、Folin-Ciocalteau反应(酚试剂反应) 磷钨酸-磷钳酸 蓝色 (检验酚基 酪氨酸有此反应) 5、黄蛋白反应 浓硝酸煮沸 黄色 (检验苯环 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反应) 6、Hopkin-Cole反应(乙醛酸反应) 加入乙醛酸混合后徐徐加入浓硫酸 乙醛与浓硫酸接触面处产生紫红色环 (检验吲哚基 色氨酸有此反应) 7、Ehrlich反应 P-二甲氨基苯甲醛+浓盐酸 蓝色 (检验吲哚基 色氨酸有此反应) 8、硝普盐试验 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应) 9、Sulliwan反应 1,2萘醌、4磺酸钠+Na2SO3 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应) 10、Folin反应 1,2萘醌、4磺酸钠在碱性溶液 深红色 (检验α-氨基酸) 三、关于氨基酸态氮的测定:(定量分析) 1.双指示剂甲醛滴定法 2.电位滴定法 另请参阅: http://www.docin.com/p-69133358.html
② 怎么辨别氨基酸的真假
辨别氨基酸的真假,方法比较多:
1、等电点法。
2、紫外分光分析。
3、还有色谱分析。
等电点法和色谱分析都是提供一个分离的环境,需要已知氨基酸作对照。
关于紫外吸收,使用得并不广泛,特地查书,看到以下描述:
有机化合物在紫外区中有些没有吸收谱带,有的仅有较简单而宽阔的吸收光带;
另一方面,如果物质组成的变化不影响生色团及助色团,就不会显着得影响其吸收光谱,例如甲苯和乙苯的紫外吸收光谱实际上是相同的。
因此物质的紫外吸收光谱基本上是其分子中生色团及助色团的特性而不是它的整个分子的特性。所以物质的紫外光谱不能完全决定物质的结构,还必须与红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及其它化学的和物理化学的方法共同配合起来,才能得出可靠的结论。
③ 怎样辨别氨基酸的酸碱性
辨别氨基酸的酸碱性的方法是用ph试纸。
在碱性溶液中,氨基酸的羧基离解出氢离子而带负电荷呈酸性,ph试纸呈蓝色。
在酸性溶液中,氨基酸的氨基结合氢离子而带正电荷呈碱性。-NH₂+是氨基结合氢离子的形式。写全是R-NH₂+。ph试纸呈黄色。
由于氨基酸分子中有羧基和氨基,因此,氨基酸既可以提供质子呈酸性,又可以接受质子呈碱性。氨基酸为HA,得到一个质子H₂A+失去一个质子A₂-,H₂A-(Ka₁)->HA-(Ka₂)->A-。
Ka₁、Ka₂分别是两步反应的平衡常数,根据溶液酸碱度,氨基酸浓度可以求出当前状态的浓度积,与Ka₁、Ka₂比较可以判断氨基酸在当前状态呈酸性还是碱性。
(3)氨基酸用什么化学方法鉴别扩展阅读:
酸碱性判断的常用方法:
测酸碱性可以用石蕊试液和酚酞,石蕊试液遇中性不变色,遇酸性变红,遇碱性变蓝;酚酞遇中性、酸性均不变色,遇碱性变成红色。
测量酸碱性的较精确方法是pH试纸,酸度计与中和滴定。其中pH试纸的精确度较差,一般只有一位,或没有有效数字,酸度计的精确度可达2~3位有效数字,滴定则可以达到小数点后两位。
随着科学的进步,还可以使用ph计来测量酸碱度,并且采用pH计能更好地控制化学反应,达到提高生产率和产品质量以及安全生产的目的。带有自动记录的pH测量系统还可对污染公害提供诉讼的证据。
其应用范围从工业用水和废物处理到采矿中的浮选过程,包括纸浆和造纸、金属加工、化工、石油、合成橡胶生产、发电厂、制药、食品加工等广泛领域。
1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。
⑤ 检验氨基酸用什么方法
你若是问蛋白质,我可以直接告诉你又双缩脲试剂(中学阶段),但氨基酸的检验比蛋白质麻烦多了。 一、氨基酸的分离和检测氨基酸的分离和检测手段,以往用化学分析法、层析法、比色法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪。随着高效液相色谱及填料的发展,HPLC在氨基酸检测方面显示了其特有的优越性。但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射特性,为提高分析检测灵敏度和分离选择特性,通常将氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法与柱后衍生法。HPLC与各种衍生相结合的氨基酸分析技术,构成了具有广泛适用性的现代氨基酸分析技术。
二、鉴定是哪种氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。1、茚三酮反应 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸环境加热) 紫色(脯氨酸、羟脯氨酸为黄色) (检验α-氨基)
2、坂口反应 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸
α-萘酚+碱性次溴酸钠 红色 (检验胍基 精氨酸有此反应)
3、米隆反应(又称米伦氏反应) HgNO3+HNO3+热 红色 (检验酚基 酪氨酸有此反应,未加热则为白色)
4、Folin-Ciocalteau反应(酚试剂反应) 磷钨酸-磷钳酸 蓝色 (检验酚基 酪氨酸有此反应)
5、黄蛋白反应 浓硝酸煮沸 黄色 (检验苯环 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反应)
6、Hopkin-Cole反应(乙醛酸反应) 加入乙醛酸混合后徐徐加入浓硫酸 乙醛与浓硫酸接触面处产生紫红色环 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)
7、Ehrlich反应 P-二甲氨基苯甲醛+浓盐酸 蓝色 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)
8、硝普盐试验 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)
9、Sulliwan反应 1,2萘醌、4磺酸钠+Na2SO3 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)
10、Folin反应 1,2萘醌、4磺酸钠在碱性溶液 深红色 (检验α-氨基酸)
三、关于氨基酸态氮的测定:(定量分析)1.双指示剂甲醛滴定法2.电位滴定法 另请参阅: http://www.docin.com/p-69133358.html
⑥ 氨基酸的定性鉴定原理
纸层析法(paper chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。
纸层析法又称纸色谱法,是用滤纸为支持物,所用展层溶剂大多由水和有机溶剂组成,滤纸纤维与水的亲和力强,与有机溶剂的亲和力弱,因此在展层时,纸纤维上吸附的水分是固定相,有机溶剂是流动相。溶剂由下向上移动的,称上行法;由上向下移动的,称下行法。将样品点在滤纸上(此点称为原点),进行展层,样品中的各种氨基酸在两相溶剂中不断进行分配。
由于它们的分配系数不同,不同氨基酸随流动相移动的速率就不同,于是就将这些氨基酸分离开来,形成距原点距离不等的层析点。
引申:
精密称取酪氨酸、色氨酸、苯内氨酸各适量,分别用水制成1ml含20μg(色氨酸)、40μg(酪氨酸)、200μg(苯丙氨酸),在波长230~300nm测定各氨基酸的吸收光谱。 在20种天然氨基酸中,只有酪氨酸、色氨酸和苯内氨酸,在紫外区最大吸收,酪氨酸的最大吸收峰的波长275nm处,色氨酸的最大吸收峰在波长280nm处,同时在波长288nm处有一个肩峰,苯丙氨酸最大的吸收峰在波长258nm处,同时在257nm和264nm处有两个较小的吸收峰。由此可见,这三种氨基酸可以通过紫外吸收光谱加以鉴别。
⑦ 怎样用化学方法鉴别氨基酸详细点,谢谢
氨基酸,主要含有两个官能团,羧基和氨基,而一般的氨基酸的,羧基个数和氨基的个数不同,位置不同,造成酸碱性也不同,,因此鉴别可以使用测量酸碱性的方法。。。。。