黄酮的薄层检测方法中国药典

❶ 总黄酮与单体黄酮的测定方法有什么不同 高手些，感激啊！

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❷ 黄酮类化合物的含量测定方法哪些

黄酮类化合物的含量测定方法哪些
黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
盐酸-镁粉还原反应

取药材粉末少许与试管中，用乙醇或甲醇数毫升温浸提取，取提取液加镁粉少许振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内即出现颜色。大多黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类显红-紫红色，黄酮类显橙色，异黄酮及查尔酮类无变化。如芦丁的盐酸镁粉反应中溶液由黄色变红色。

其他还原反应还有：盐酸-锌粉反应，黄酮、黄酮醇类常不显色，只有二氢黄酮醇类可被锌粉还原呈深红色；钠-汞齐反应，黄酮类成分可产生黄、橙、红等色；四氢硼钠（钾）反应，仅二氢黄酮醇类可被四氢硼钠还原呈红色，其他黄酮类不反应。

金属盐类试剂络合反应

黄酮类成分和铝盐、镁盐、铅盐、锆盐等试剂反应，生成有色的络合物，可供某些类型黄酮的鉴别。产生络合作用的条件是黄酮类成分必须具备下列条件之一，如5-羟基、3-羟基或邻二羟基。根据有色络合物的最大吸收波长，可进行定量测定。常用的试剂有三氯化铝、醋酸铅、醋酸镁与二氯氧化锆等试剂。

❸ 异黄酮是雌激素,那么黄酮就是雄激素吗

一）结构类型
黄酮类化合物 (flavonoids) 是一类存在于自然界的、具有 2- 苯基色原酮 (flavone) 结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸形成 钅羊 盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。由黄酮类化合物与糖结合的苷叫做黄酮苷 (flavonoid glycosides) 。目前黄酮类化合物已远远超出这个范围，即凡具有 C 6 -C 3 -C 6 基本骨架的一类化合物被广义的称为黄酮类化合物。分子结构中常有 -OH 与 -OCH 3 等取代基。

根据基本结构，黄酮类化合物主要分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、查耳酮、橙酮、花色素、黄烷及双黄酮类化合物

黄酮类化合物除少数游离外，大多与糖结合成苷。糖基多连在 C 8 或 C 6 位置上，连接的糖有单糖（葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等），双糖（槐糖、龙胆二糖、芸香糖等），叁糖（龙胆三糖、槐三糖等）与酰化糖（ 2- 乙酰葡萄糖、咖啡酰葡萄糖等）。

天然黄酮类化合物除大多数为 O- 苷外，还发现 C- 苷，如葛根素 (puerarin) 。

（二）理化性质

1. 通性

黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定形粉末。它的颜色与分子中存在的交叉共轭体系及助色团 (-OH ， -CH 3 等 ) 的类型、数目及取代位置有关。一般来说，黄酮、黄酮醇及其苷类多呈灰黄 - 黄色，查耳酮为黄 - 橙黄色，而二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮类等因不存在共轭体系或共轭很少，故不显色。花色苷及其苷元的颜色，因 pH 的不同而变，一般呈红 (pH<7) 、紫 (pH8.5) 、蓝 (pH>8.5) 等颜色。

黄酮苷元一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性相应加大，而在有机溶剂中的溶解度相应减少。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、醋酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性，故可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。有些黄酮类化合物在紫外光 (254nm 或 365nm) 下呈不同颜色的荧光，以氨蒸气或碳酸钠溶液处理后荧光更为明显。多数黄酮类化合物可与铝盐、镁盐、铅盐或锆盐生成有色的络合物。

2. 鉴别反应

（ 1 ）盐酸 - 镁粉还原反应 取生药粉末少许于试管中，用乙醇或甲醇数毫升温浸提取，取提取液加镁粉少许振摇，滴加几滴浓盐酸， 1~2min 内即出现颜色。多数黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类显红 - 紫红色，黄酮类呈橙色，异黄酮及查耳酮类无变化。

其它还原反应还有：盐酸 - 锌粉反应。黄酮、黄酮醇常不显色，只有二氢黄酮醇类可被锌粉还原呈深红色；钠汞齐反应，黄酮类成分可产生黄、橙、红等色；四氢硼钠 ( 钾 ) 反应，仅双氢黄酮醇可以被四氢硼钠还原呈红色，其它黄酮类不反应。

（ 2 ）金属盐类试剂的络合反应 黄酮类成分和铝盐、镁盐、铅盐、锆盐等试剂反应，生成有色的络合物，可供某些类型黄酮的鉴识。产生络合作用的条件是黄酮类成分必须具备下述条件之一，如 5- 羟基、 3- 羟基或邻二羟基。

根据有色络合物的最大吸收波长，可进行定量测定。常用的试剂有三氯化铝、醋酸铅、醋酸镁与二氯氧化锆等试剂。 ① 与铝盐络合：生药乙醇或甲醇提取液，加 1% 三氯化铝甲醇液，黄酮醇、 5- 羟基黄酮与 Al 3+ 络合显鲜黄色； ② 与铅盐络合：生药水提取液，加中性醋酸铅或碱式醋酸铅试剂，可产生黄色、红色或橙红色沉淀； ③ 与镁盐络合：生药乙醇或甲醇提取液，滴于滤纸上，吹干后喷雾醋酸镁甲醇试剂，置紫外光下观察，二氢黄酮及二氢黄酮醇类等显天蓝色荧光，黄酮类、黄酮醇类和异黄酮类等显黄色、橙色或棕色； ④ 与锆盐络合：生药乙醇或甲醇提取液，加 2% 二氯氧化锆 (ZrOCl 2 ) 甲醇液， 5- 羟基黄酮和黄酮醇类显鲜黄色。显色后，再加 2% 枸椽酸甲醇液，则 5- 羟基黄酮类可褪色。

此外， 口山 酮 (xanthone) 是结构与性质同黄酮相似的一类化合物。以苷或苷元的形式存在于植物中，它是金丝桃科和龙胆科植物的特征性成分，石韦、知母、芒果叶中也有存在。

天然的 口山 酮有 C- 苷和 O- 苷。常见的 C- 苷如芒果苷 (mangiferin) 与异芒果苷。 O- 苷仅存在于龙胆科植物中，约有 20 余种，如异龙胆苷 (gentioside) 与獐牙菜苷 (swertionolin) 等。

报春花糖（樱草花糖）

口山 酮类成分与盐酸 - 镁粉反应显橙黄色，与盐酸 - 锌粉反应显桃红色。

（三）黄酮类主要定量方法及举例

黄酮类化合物常可与某些试剂（如硝酸铝和亚硝酸钠等）形成稳定的有色络合物，利用这一性质可以采用可见 - 紫外分光光度法定量分析生药中总黄酮的含量。常用甲醇提取生药中的总黄酮，有时也要对样品进行适当的预处理（如用三氯甲烷脱脂），再用甲醇提取，如《中国药典》（ 2005 年版）山楂叶中总黄酮的紫外 - 可见分光光度法测定；生药中单体黄酮可采用薄层扫描法和高效液相色谱法测定，以高效液相色谱法多用。

❹ 总黄酮含量的测定方法，如紫外可见分光光度法 高效液相色谱法，方法的类容详细点

流动性影响出峰时间、分离度、理论塔板数等，不影响峰面积。 流动相影响总黄酮的保留时间，根据不同的大小，可能提前也可能推后；也影响分离度。 ..

❺ 测定总黄酮含量方法

一 样品溶液的制备
70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下回流2h。 取10g样品放入圆底烧
瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先
离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。
二 芦丁标准品的配置
精密称取芦丁2mg，加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦
丁标准品溶液。
三 显色方法的确定
1 扫描原液 分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml，加无水乙醇定容至 25ml，空白对照，全波扫描。
2 硝酸铝显色法 分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加5%亚硝酸钠 溶液（1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml， 摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加无水乙醇定容至25ml，摇匀，放置15min， 空白对照，全波扫描 bb 。
3 氯化铝显色法 分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化铝溶液（1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，摇匀放置10min，空白对照，全波扫描。
4 氢氧化钾显色法 分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加3ml10%氢氧化钾溶液（2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中），充分摇匀显色5min后，用无水乙醇定容至25ml, 摇匀，空白对照，全波扫描。
四 显色条件的确定
五 标准曲线的绘制
分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液，按所选的显色方法测定
吸光度，绘制标准曲线。

❻ 总黄酮与单体黄酮的测定方法有什么不同

总黄酮采用芦丁为标准品即可测定，单体黄酮需要对应的标准品。
黄酮含量的测定方法：
1、 对照法
1）
① 对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。
② 样品溶液制备
精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。
③ 标准曲线的制备
精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。
2）
①样品溶液的制备：
分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。
③标准曲线的制定：
精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。
④含量测定结果：
分别吸取2.2.1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。
计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。
注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。

❼ 薄层色谱法用于杂质检查常用的方法有哪些

薄层色谱法用于杂质检查常用的方法有杂质对照法，供试品对照法，对照药物法，显色剂。

薄层色谱，或称薄层层析(thin—layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。

这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。

(7)黄酮的薄层检测方法中国药典扩展阅读：

一、基本原理

薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。

薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。

而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响，就会被吸引而停留下来。

吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。

二、相关应用

1、药物和药物代谢

薄层色谱法在合成药物和天然药物中的应用很广。有些文献和内容偏重于合成药物、化合物及其代谢产物，有文献为在中草药分析中的应用。

每一类药物，例如磺胺、巴比妥、苯骈噻嗪、甾体激素、抗菌素、生物碱、强心甙、黄酮、挥发油和萜等，都包括几种或十几种化学结构和性质非常相似的化合物，可以在上述文献中找出一、二种全盘的展开剂，一次即能把每一类的多种化合物很好地分开。

药物代谢产物的样品一般先经预处理后用薄层分析，应用也很广，但有时因含量甚微，不用采用气相和高效液相色谱法灵敏。

2、化学和化工

化工和化学方面的有机原料和产品都可用薄层色谱法分析。例如含各种功能基的有机物，石油产品，塑料单体，橡胶裂解产物，油漆原料，合成洗涤剂等，内容非常广泛。

3、医学和临床

薄层色谱法的应用还渗透到医学和临床中去，例如它是一种快速的诊断方法可用于妊娠的早期诊断。

方法是基于在孕妇的尿中能检出比未媳妇妇女的尿中含更多的孕二醇，把两者的尿提取后点在薄层上比较，即可作出判断。这一方法可不用动物而在2~3小时内化验出结果。

❽ 药典 总黄酮测定方法样品空白和标准曲线空白的问题

用移液管量取5 mL芦丁标准应用液置于25 mL容量瓶中，加入10％的NaNO2溶液1mL，摇匀后放置6 min，加入10％的Al(NO3)3溶液1mL，摇匀后放置6 min，再加入1 mol／L的NaOH溶液10mL，加30％的乙醇至刻度，混匀。静置15min。以不加芦丁标准应用液的试管作为空白试剂，在360—600nm波长的范围内测定吸光度，选择吸光度值最大时的波长为芦丁标样的最大特征吸收波长。结果表明，在510nm处标样吸光度最大，故510nm为最大特征吸收波长。
亚硝酸钠-硝酸铝比色法[11]绘制标准曲线，做标准方程。
分别移取芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0mL于25 mL容量瓶中，补加浓度30％乙醇至12.5mL，加入1 mL浓度5％NaNO2，6 min后加入1 mL浓度为10％Al(NO3)3，6 min后加10mL浓度1 mol／L NaOH，用浓度30％乙醇定容，摇匀，15 min后于510 nm处以试剂空白为参比，测定吸光度。以浓度—吸光度进行回归，绘制标准曲线，求得回归方程。
(这个是我本科学位论文的一部分，空白就是上文那个移取芦丁标准溶液0.0的。也不一定非要按照这个一样，各种药品浓度和取量可以根据实际情况调节)

❾ 如何用薄层色谱鉴别黄酮拜托了各位 谢谢

摘 要 目的 探讨鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分的方法。方法 应用薄层色谱法鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分，黄酮采用ρ=3%AlCl3（乙醇）溶液显色，生物碱采用稀碘化铋钾试液显色。结果与结论 以薄层色谱鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分，不同于一般化学鉴别（试管法），其分离效果较好，专属性强，具有实际参考价值。 关键词 广金钱草；薄层色谱鉴别；黄酮；生物碱 广金钱草是豆科植物广金钱草Desmodium styracifolium (Osb.)Merr. 的干燥地上部分，为较常用中药［1，2］。中国药典2000年版收载有“清热除湿，利尿通淋”的作用［1］。对广金钱草的鉴别，文献主要介绍性状鉴别、显微鉴别及一般的化学鉴别（试管法） ［1，3］。本文以薄层色谱法鉴别广金钱草中的黄酮和生物碱成分，报道如下。 1 仪器及试剂 1.1 仪器 20 cm×10 cm双槽展开缸。 1.2 试剂 薄层层析硅胶G(化学纯)，GF254(化学纯)，青岛海洋化工厂产品。 层析氧化铝（碱性），100～200目，上海社园精细有限公司产品。羧甲基纤维素钠，上海化学试剂分装，黏度2%水溶液为300～800 mPa/s。其余试剂均为分析纯。 2 供试品及对照药材 2.1 广金钱草药材购自采芝林药店北京路分店，经广东药学院药用植物与生药学教研室鉴定为豆科广金钱草Desmodium styracifolium (Osb.)Merr.（中国药典2000年版一部）的全草。 2.2 广金钱草对照药材由广东省药品检验所中药室提供。 3 广金钱草黄酮薄层色谱鉴别［2］ 取广金钱草粉末1 g，置圆底瓶中，加甲醇20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，滤过，滤液用醋酸乙酯提取2次，每次10 mL，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取广金钱草对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2000版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一以ρ=0.3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以ψ(醋酸乙酯∶甲酸∶水)=（8∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以ρ=3%AlCl3（乙醇）溶液［4,5］， 105 ℃加热约5 min，置紫外光灯（365 nm）下检视［6］，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图1。 4 广金钱草生物碱薄层色谱鉴别 取广金钱草粉末1 g，置圆底瓶中，加浓氨溶液5 mL［6］，密塞，摇匀，放置30 min，加氯仿50 mL，加热回流2 h，取出放冷，分取氯仿液，药渣再用氯仿适量洗涤，合并氯仿液，用无水硫酸钠脱水，置水浴上蒸至约1 mL，加于碱性氧化铝柱（5 g，直径15 mm）上，用ψ(氯仿∶无水乙醇)=（1∶1）混合溶液50 mL洗脱［6］，收集洗脱液，置水浴上蒸至约1 mL，作为供试品溶液。另取广金钱草对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2000版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各4 μL，分别点于同一以ρ=3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以ψ(苯∶丙酮∶甲醇)=（8∶3∶0.5）为展开剂，另槽用等量的浓氨溶液预平衡15 min，展开，取出，晾干。置254 nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的暗斑点；喷以稀碘化铋钾试液［6,8］，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

希望采纳