A. 还原糖测定方法
糖果—还原糖的测定—直接滴定法
2 原理
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，以次甲基蓝作指示剂，根据样品液消耗体积，计算还原糖量。
3 试剂
3.1 碱性酒石酸铜甲液
称取15g硫酸铜（CuSO4•5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。
3.2 碱性酒石酸铜乙液
称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3.3 乙酸锌溶液
称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
3.4 亚铁氰化钾溶液（10.6+89.4）
称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL。
3.5 葡萄糖标准溶液（1mg/mL）
精密称取1.000g经过98～100℃干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1000mL。此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。
3.6 盐酸
4 仪器
4.1 实验室常规仪器和设备
4.2 古氏坩埚或G4垂融坩埚
5 操作步骤
5.1 样品处理
将样品捣碎混匀待用，样品应避免暴露在空气和阳光下，并尽可能迅速地进行分析。
称取约2.5～5g样品，置于250mL容量瓶中，加50 mL水，摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液5mL及亚铁氰化钾溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混匀。静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
5.2 标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每10mL（甲、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
5.3 样品溶液预测
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。
5.4 样品溶液测定 1
吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加比预测体积少1mL的样品溶液，使在2min内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
6 结果计算
按下式计算糖果中还原糖的含量： 100100025021×××=VmmX
式中：X—样品中还原糖的含量（以葡萄糖计），%；
m1—10mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5mL）相当于还原糖（以葡萄糖计）的质量，mg；
m2—样品质量，g；
V—测定时平均消耗样品溶液体积，mL。
7 精密度
同一样品两次平行测定值相对差不得超过15%。
B. 鉴定糖原的方法有几种
鉴定糖原的方法：水溶液呈乳样光泽
遇碘呈红棕色
加酸水解后，与班氏试剂在碱性条件下加热转变为砖红色沉淀
葡萄糖、果糖、麦芽糖是还原性糖 可以用斐林试剂检验 现象是有砖红色沉淀生成
淀粉用碘酒检验 现象是变蓝色
剩下的糖原、蔗糖 其中分别加入催化酶 再用第一种方法 有砖红色沉淀的是蔗糖（水解有果糖和葡萄糖）
没现象的就是 糖原
1）纸色谱糖类的纸色谱常用水饱和的有机溶剂展开，其中以正丁醇-乙醇-水和水饱和的苯酚两种溶剂系统应用最为普遍医,学教育网。 糖类的纸色谱常用显色剂有：硝酸银试剂；三苯四氮唑盐试剂；苯胺-邻苯二甲酸盐试剂；3，5-二羟基甲苯—盐酸试剂；过碘酸加联苯胺试剂等。
（2）薄层色谱糖的极性大，在硅胶薄层上进行层析时，点样不宜过多（一般少于5μg）。若点样太多，斑点就会明显拖尾，Rf值也下降，使一些Rf值相近的糖难以获得满意的分离。若硅胶用0.03mol/L硼酸溶液或一些无机盐（主要是强碱与弱或中等强度的酸所成的盐）的水溶液代替水调制吸附剂涂铺薄层，则样品承载量可明显增加，分离效果也有改善。
C. 可溶性糖含量的测定方法有哪些
测定方法有以下几种：
1.蒽酮法测定可溶性糖
2.苯酚法测定可溶性糖
3.3 ,5 –二硝基水杨酸比色法测定还原糖
4.斐林试剂比色法测定还原糖
斐林试剂比色法测定还原糖步骤
一、原理
植物组织中的可溶性糖可分为还原糖（主要是葡萄糖和果糖）和非还原糖（主要是蔗糖）两类。还原糖具有醛基和酮基，在碱性溶液中煮沸，能把斐林试剂中的 Cu 2+ 还原成 Cu + ，使蓝色的斐林试剂脱色，脱色的程度与溶液中含糖量成正比，在 590 nm 波长下比色测定吸光度，查标准曲线，即可计算出所测样品中还原糖的含量。本方法也可用于测定蔗糖及总糖含量。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
新鲜植物样品或烘干粉碎过的植物样品。
（二）试剂
1. 斐林试剂 A 液： 40 g CuSO 4 · 5H 2 O 溶解于蒸馏水定容至 1000 mL 。
2. 斐林试剂 B 液： 200g 酒石酸钾钠（ KNaC 4 H 4 O 6 · 5H 2 O ）与 150g NaOH 溶于蒸馏水中，并定容至 1000 mL 。
A 、 B 两液分别贮存，使用前等体积混合。
3. 0.1 ％葡萄糖标准液：取 80 ℃下烘至恒重的葡萄糖 0.1000 g ，加蒸馏水溶解，定容至 100 mL 。
4. 0.1mol/LNaOH 。
5. 甲基红指示剂： 0.1 g 甲基红溶于 250 mL 60 ％乙醇中。 6. 10 ％ Pb(Ac) 2 。 7. 饱和 Na 2 SO 4 。
（三）仪器设备
分光光度计，分析天平，离心机，水浴锅，具塞刻度试管，刻度吸管，容量瓶，研钵。
三、实验步骤
1 . 标准曲线的制作 取 7 支试管，按表 24 – 4 分别加入各溶液。 将以上各管混合后加塞，于沸水浴中加热 15 min 。取出后自来水冷却， 1500 r/min 离心 15 min 。取上清液，用分光光度计在 590 nm 波长下比色，以蒸馏水作对照，读取吸光度。用空白管的吸光度与不同浓度糖的各管的吸光度之差为横坐标，对应的糖含量为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品中还原糖的提取 取新鲜的植物样品洗净、擦干、剪碎，称取 3.00 g ，放入研钵中研磨至糊状，用水洗入大试管中。体积为 10 ～ 15 mL 时，加 2 ～ 3 滴甲基红指示剂，如呈红色，可用 0.1 mol/L 的 NaOH 中和至微黄色。若用风干样品，可称取干粉 3.00 g ，先在烧杯中用少量水湿润，然后用水洗入 250 mL 容量瓶中，如显酸性，可用上法中和。 将大试管置于 80 ℃的恒温水浴中保温 30 min ，其间摇动数次，以便将还原糖充分提取出来。对含蛋白质较多的样品，此间可加 10 ％ Pb(Ac) 2 ，除去蛋白质，至不再产生白色絮状沉淀时，加饱和 Na 2 SO 4 除去多余的铅离子。 30 min 后取出冷却，将提取液全部转入 100 mL 容量瓶中。定容至刻度，摇匀后过滤待测。
3. 样品测定 吸取 6 mL 待测液，加 4 mL 斐林试剂，其他操作与标准曲线相同，在 590 nm 波长下读取吸光度。以不含样品的空白管的吸光度减去样品管的吸光度，在标准曲线上查出糖含量。
D. 测定糖的含量的方法有哪些
糖的测定方法
一般有四种方法：
1、 直接滴定法。
原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。
2、 高锰酸钾滴定法。
所用原理同直接滴定法。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响，过程较为复杂，误差大。
3、硫酸苯酚法。
糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
缺点：如果水样呈橙红色（大部分水样为黄色），会对比色法造成较大的干扰。
4、蒽酮法
糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。
缺点：，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。
综合比较；采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。
（一） 直接滴定法
Ⅰ、原理
v 一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用标液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝做指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。
Ⅱ、仪器和试剂
1．仪器
酸式滴定管，可调电炉（带石棉板），250ml容量瓶。
2．试剂
1. 盐酸。
2. 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。
3. 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
4. 乙酸锌溶液：称取21.9 g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。
5. 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。
6. 葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000L。此溶液相当于1mg/ml葡萄糖（注：加盐酸的目的是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制）。
7. 果糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的果糖。
8. 乳糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的乳糖。
9. 转化糖标准溶液：准确称取1.0526g纯蔗糖，用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中加5ml盐酸（1+1），在68℃~70℃水浴中加热15min，放置至室温定容至1000ml，每ml标准溶液相当于1.0mg转化糖。
Ⅲ、实验步骤
1．样品处理
⑴ 乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约2.50～5.00g固体样品（吸取25～50ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。边摇边慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。）
⑵ 酒精性饮料：吸取100ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后，移入250ml容量瓶中，加水至刻度。
⑶ 含多量淀粉的食品：称取10.00～20.00g样品，置于250ml容量瓶中，加200ml水，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。）。冷后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。吸取200ml上清液于另一250ml容量瓶中，慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。
⑷ 汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后备用。（注意：样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。）
2. 标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶中（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10 ml（甲、乙液各5 ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg）。（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。）
3. 样品溶液预测：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，出现亮黄色为终点。如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。） 当试样溶液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗试样溶液的体积控制在与标定碱性酒石酸酮溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10ml左右。当浓度过低时则采取直接加入10ml样品溶液，免去加水10ml，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10ml试样溶液中所含还原糖的量。
4. 样品溶液测定：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2 min内加热至沸，快速从滴定管中滴加比预测体积少1 ml的样品溶液，然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至终点。记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。
5. 计算
样品中还原糖的含量（以某种还原糖计）按下式计算。
X=〔A/(m×V/250×1000)〕×100
式中：X--样品中还原糖的含量(以某种还原糖计)，单位 g/100g；
A—碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于某种还原糖的质量，单位 mg；
m--样品质量，单位 g；
V--测定时平均消耗样品溶液的体积，单位 ml；
计算结果保留小数点后一位。
注意：
滴定结束，锥形瓶离开热源后，由于空气中氧的氧化，使溶液又重新变蓝，此时不应再滴定。
（二）高锰酸钾滴定法
v 原理 将样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐，用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原糖量，即可计算出样品中还原糖含量。
（三）硫酸苯酚法
Ⅰ、原理
糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。
Ⅱ、试剂
1． 浓硫酸：分析纯，95.5%
2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）
4． 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸
Ⅲ、操作。
1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：
①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。注意：总的溶液不要超出10毫升。（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。）
③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。
④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。
Ⅳ、注意
（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。
（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。
（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。
（4）测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1——0.3之间。比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。
（四）蒽酮法
Ⅰ、实验原理
糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖和己糖，而且可以测所有的寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应。所以，用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量。此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。
Ⅱ、试剂：
蒽酮试剂，0.20 g蒽酮溶入100 mL 95%浓硫酸中，冰箱保存；
Ⅲ、方法：
样品2.0 mL加5.0 mL蒽酮试剂，混匀，然后水浴煮沸10 min，取出冷却至室温，在620 nm处测定其吸光度，根据标准曲线计算水样中糖的浓度。（标线以葡萄糖为标样）
E. 怎样测葡萄酒中的糖度，用什么仪器最简单有效，仪器怎样用，要注意什么
您好，
手持式折射仪最为简单，只需滴上一滴在载物片上，就可以读出数值，但是这种方法只能测出葡萄酒大概的范围，和实际相差还是比较大的。
还可以用，高效液相色谱法，原理是利用样品中各种组分在液固两项分配系数的不同，令其通过液相色谱柱，而将葡萄酒中的果糖，葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。然后利用示差折光检测器进行鉴定，用外标法定量。用高效液相色谱法，其中也有2中检测方案，有细微差别。这种检测方法需要的仪器有高效液相色谱仪，示差折光检测器。
一般各大葡萄酒生产厂家，质量检测部门化验室的化验人员是用直接滴定法和间接碘量法来检测葡萄酒中糖分的含量。
具体步骤：
预备试验：250ml容量瓶，加入菲林试剂A,B各5.00ml,加蒸馏水50ml，摇匀，电炉上加热至沸，在沸腾的状态下用试样滴定，当溶液的蓝色消失呈红色时，加2滴次甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记下消耗的试样体积V0
正式试验：250ml容量瓶，加入菲林试剂A,B各5.00ml,加蒸馏水50ml，再加入比预备试样少1ml的试样V3=V0-1，摇匀，电炉上加热至沸，并保持2min，滴定，加2滴次甲基蓝指示液，滴至蓝色消失。测干葡萄酒样品时，需要用葡萄糖标准溶液滴定至终点V2。
计算：总糖或还原糖含量X=（F-G×V2）÷（（V1-V2)/V3)×1000
F----菲林A、B液各5ml相当于葡萄糖的克数，g
V1---吸取样品体积
V2---消耗试样的体积
V3--消耗试样总体积
G---葡萄糖标准溶液的准确浓度
好长时间不做化验了，都快记不清了，这种方法最为精准，酒厂化验员都是采用这种方法进行化验。
F. 怎样测定果实中的可溶性糖、还原糖和蔗糖
答：果实中含有葡萄糖、果糖和蔗糖，这三者糖总称为可溶性（水溶性）糖。葡萄糖、果糖为六碳糖，称单糖，它们含有醛基和酮基，容易被氧化，又称为还原糖。蔗糖是十二碳糖，叫做双糖，不易被氧化，又称为非还原糖。测定前要先加酸使之水解，生成一个葡萄糖和一个果糖，再测定溶液中可溶性糖的含量。由于在未水解的溶液中还有还原糖，故应以二者之差来计算蔗糖含量。
所有的水果果实都含有葡萄糖和果糖，大部分也含有蔗糖，少数果实，如葡萄不含蔗糖。3种糖以果糖最甜，蔗糖次之，葡萄糖较差，甜度之比为100∶66∶45。
苹果的分析结果通常为：可溶性糖为9%～14%（一般为11%～12%），还原糖7%～10%（一般为9%～10%），蔗糖为0.7%～5%（一般为2%～3%）。梨的可溶性糖为7%～14%，（一般为8%～10%），还原糖6%～9%，蔗糖为0.6%～5%。仁果类（苹果、梨）的果糖含量较高，而核果类（桃、李、杏）中葡萄糖稍高于果糖。
（1）方法原理
铁氰化钾在碱性溶液中可氧化还原糖，用糖的浸出液滴定已知浓度一定量的铁氰化钾溶液时，铁氰化钾即被还原成亚铁氰化钾，还原糖被氧化成糖酸。溶液中有铁氰化钾存在时，溶液呈现指示剂的颜色。当铁氰化钾全部还原为亚铁氰化钾时，再多滴一滴糖液，指示剂就被还原成土黄色的三酚甲烷化合物，根据所消耗的糖液体积，计算糖的含量。
（2）试剂配制
①1%铁氰化钾溶液：准确称取105℃烘干100克分析纯的K3Fe（CN）6于300毫升烧杯中，加去离子水溶解，转移于1升容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，过滤后贮于棕色瓶中备用。
②2.50摩尔/升氢氧化钠（NaOH）溶液：在小烧杯中，称取NaOH（分析纯）105克，溶于水中，冷却后用水稀释至1升（A液）。摇匀后从A液中吸取5毫升，加水至100毫升（B液）。吸取B液10～15毫升，用0.1摩尔/升标准酸标定其浓度。B液浓度乘以20即为A液浓度。要求A液恰为20.50摩尔/升。
③中性醋酸铅溶液：称取300克醋酸铅［Pb（CH3COO）2·3H2O］和50克氧化铅（PbO）加水50毫升，在沸水浴上加热至白色或紫红色（约需2～3小时），然后边搅拌边加水950毫升，将此混合液倒入瓶中，盖好，放温暖处，直至溶液澄清。过滤后保存在密封的棕色瓶中备用。
④饱和硫酸钠（Na2SO4·10H2O）溶液：称取165克 Na2SO4·10H2O溶解于1升水中。
⑤次甲基蓝指示剂：1.0克次甲基蓝溶于100毫升水中。
⑥甲基红指示剂：0.2克甲基红溶于100毫升60%乙醇中。
⑦8%氢氧化钠溶液：8克氢氧化钠溶于水稀释至100毫升。
⑧稀氢氧化钠溶液：8%氢氧化钠溶液10毫升稀释至100毫升。
⑨浓盐酸（HCl）：比重1.19，分析纯。
（3）仪器设备
万分之一的天平。百分之一的天平、恒温水浴锅、高速组织捣碎机等。
样品的采集：在果园里按照不同处理取树冠外围中部有代表性的无病虫果实若干（不得少于10个），带回实验室，把取来的果实样品洗净擦干或用湿毛巾擦净果皮。分析苹果、梨、葡萄时，需带果皮。剥皮容易的桃样品则应去皮，柑橘要去掉外果皮和里面的白色网纹。西瓜、甜瓜则只取可食部分。葡萄、苹果、桃、李、杏、柑橘和西瓜的种子均弃去，苹果和梨还应去掉鳞片。
取样时，对苹果、梨、桃、西瓜、甜瓜等新鲜水果，取每个果实中部纵横各一片，用不锈钢刀切碎。柑橘取每个果实对角线的两瓣；浆果（葡萄）取每个果穗的上下左右各方面果实数粒。有时葡萄用汁液进行分析。
（4）测定方法
①糖液的提取：用400毫升烧杯，在受皿天平上称取切碎的样品150克，加150毫升去离子水，在高速组织捣碎机上搅拌3分钟。用小烧杯在工业天平上称取浆状物50克（相当于样品25克）用水洗至250毫升容量瓶中，使瓶内液体约为150毫升，用8%氢氧化钠溶液中和溶液中的有机酸，每加1～2滴，摇匀溶液，并用红石蕊试纸少许投入瓶中，当红石蕊试纸在溶液中明显变蓝为止。
将瓶放入80℃的水浴中30分钟，每隔5分钟摇动一次，同时注意调节水浴温度。从水浴中取出瓶，趁热逐滴加入中性醋酸铅，以沉淀其中的蛋白质和色素等，每加数滴，充分摇动瓶子，然后静止片刻，观察上层溶液是否清亮，如已清亮就不加醋酸铅，以防过量，反而使溶液变得混浊无法滤出清夜（据经验，25克元帅系苹果约需中性醋酸铅1.6～1.8毫升，酸多的苹果，如国光，用量稍多些；25克梨则需1.5～3.5毫升）放置数分钟，再加入醋酸铅用量3～4倍的饱和硫酸钠溶液，使多余的铅生成硫酸铅沉淀，将容量瓶放冷，加水至250毫升，摇匀，用滤纸过虑到250毫升的三角瓶中，这一糖液即可用来还原糖的测定。
②还原糖的测定：进行正式测定前，应先预测一次。在100毫升三角瓶中，用三个滴定管分别加入1%铁氰化钾溶液20毫升，2.50摩尔/升氢氧化钠溶液5毫升及糖液3毫升，将三角瓶放在有石棉铁丝网的300瓦小电炉上电热煮沸1分钟，加一滴次甲基蓝指示剂，随即变加热边用上述糖液继续滴定，滴定速度要慢，使溶液保持微沸，在接近终点时，每加一滴糖液，都要充分摇动。溶液颜色的变化：绿—红—蓝紫—紫—土黄，从紫色突变土黄即达到终点。消耗的总糖量（包括先加入的3毫升）在4～6毫升之间时，结果最精确。如果消耗糖液超过8毫升，表示糖的浓度过淡，可取10毫升铁氰化钾溶液及2.50摩尔/升氢氧化钠溶液2.5毫升与糖液重新滴定。如果煮沸1分钟，加次甲基蓝指示剂后溶液立即变蓝，说明糖液太浓，需要稀释一倍后再滴定。
正式滴定：从上述预测，即可大致得到与20毫升铁氰化钾溶液作用时糖的消耗量，正式滴定时，在20毫升铁氰化钾和5毫升氢氧化钠溶液中，先加入比上述糖用量少0.5毫升的糖液（例如，预测时消耗为5.00毫升，则先加入4.5毫升）煮沸1分钟，加指示剂1滴，边加热边逐滴滴入糖液，每加一滴都要充分摇动，直到终点为止。
③可溶性糖的测定：在还原糖的滴定中，溶液里虽然有蔗糖，但是它不能被铁氰化钾所氧化，所以只能滴定出还原糖的含量。如欲滴定蔗糖，则另取糖液加酸水解，转化成等量的葡萄糖和果糖后，再照上法滴定。
测定步骤：吸取糖的滤液50毫升，放入1容量瓶中，另取100毫升容量瓶，加50毫升水，插入温度计，以观察温度变化，将它们一并放入预先加热到70℃的水浴中，当瓶内温度升至60℃时，取出容量瓶，用滴定管准确加入3毫升盐酸（比重1.19），将容量瓶再放入水浴中（注意经常摇动），待瓶内温度升至70℃时，在68～70℃下保持准确8分钟，取出容量瓶迅速冷却，加甲基红指示剂2滴，用8%氢氧化钠溶液中和快到中性时，可改用稀氢氧化钠溶液直到溶液由红变为橙色。如果发现溶液变为黄色，并变混浊，说明加碱过多，要用稀盐酸调回至橙红色。水解好的糖液加水至100毫升，照还原糖的测定与20毫升铁氰化钾溶液进行标定。
铁氰化钾液浓度的确定：准确称取在110℃烘过2小时的分析纯葡萄糖0.2000克溶于水，稀释至100毫升。用此溶液与100毫升铁氰化钾液滴定，方法同上，记下糖液用量。
（5）结果计算
10毫升铁氰化钾溶液相当于葡萄糖的克数（G）为：
G＝M×V/100
还原糖（%）＝2G×V1×100/W×V2
可溶性糖（%）＝2G×V1×2×100/W×V3
蔗糖（%）＝［可溶性糖（%）-还原糖（%）］×95%
式中：M——葡萄糖的重量（克）：
V——滴定10毫升铁氰化钾溶液所用的标准葡萄糖溶液的体积（毫升）；
V1——糖浸出液定容体积（毫升）；
V2——还原糖测定中20毫升铁氰化钾溶液消耗的待测糖溶液的体积（毫升）；
V3——可溶性糖测定中20毫升铁氰化钾溶液消耗的水解后待测糖溶液的体积（毫升）；
W——样品的鲜重（克）；
2——在可溶性糖的测定中吸出50毫升滤液，水解后定容至100毫升即将原来糖液稀释了一倍。
G. 测定糖类的主要方法有哪些
4种糖的测定方法
总结：
1、 直接滴定法。
原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。
2、 高锰酸钾滴定法。
所用原理同直接滴定法。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响，过程较为复杂，误差大。
3、硫酸苯酚法。
糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
缺点：如果水样呈橙红色（大部分水样为黄色），会对比色法造成较大的干扰。
4、蒽酮法
糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。
缺点：，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。
综合比较；采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。
H. 甜度检测方法
市场上有卖糖度计，用于快速测定含糖溶液以及其它非糖溶液的浓度或折射率。主要应用于制糖、食品、饮料等工业部门及农业生产和科研中，可适用于测定准确的收采时期，作甜度分级分类。
具体的检测方法可以参照：
试剂和容器：
蔗糖
甜味剂样品
蒸馏水
100ml容量瓶
10ml刻度移液管
操作步骤：
① 对照样，10%蔗糖溶液
配制方法：称取10g蔗糖溶液，加蒸馏水稀释至100ml。
② 系列浓度实验样品的配制
配制方法：先称取样品1.0g加蒸馏水稀释至100ml即成1.0％的样品溶液。分别量取1.0％样品溶液20ml、12.5ml、10.0ml、5ml、4ml、3.3ml、2.5ml到100ml容量瓶中，稀释至100 ml，其溶液浓度分别是0.2％、0.125％、0.1％、0.05％、0.04％、0.033％、0.025％。
4. 样品品尝比较：由至少5个人组成评定小组对样品进行品尝，判断系列浓度样品中哪一个与10％蔗糖溶液的甜度相同或相近，从而计算出样品的甜度。公式如下：
甜度＝10％/样品浓度
附：样品的甜度与浓度的关系：
吸取1％样品溶液量 稀释后溶液浓度 相当于蔗糖的甜度
20ml 0.2% 50
12.5 0.125% 80
10 0.1% 100
5 0.05% 200
4 0.04% 250
3.3 0.033% 300
2.5 0.025% 400
I. 糖液浓度用什么可以直接测定啊
测定方法可以多种多样,都是利用其物理性质或化学性质来进行测定,如：
1、溶液的凝固点降低幅度与浓度有关,浓度越高,凝固点降低幅度越大；
2、利用旋光性进行测量（如果糖具有旋光性的话）,偏振光的旋转角度与浓度成正比；
3、利用糖的还原性进行测量,与确定浓度的氧化剂进行反应,测试氧化剂的用量；
等等
J. 糖锤度和浓度怎么测量，有什么较好的方法
糖厂的甘蔗原料先被破碎成片状或条状制成蔗糖料，然后送入压榨机压榨。压榨出的蔗汁经过亚硫酸清净、预灰和加热、硫熏中和、沉降和过滤等工序后得到清汁，此时清汁的浓度约为12~14%Brix，清汁必须经过多效蒸发浓缩为60%Brix的糖浆，并经过硫熏、过滤制成清净糖浆，清净糖浆经煮糖、结晶、离心、干燥制成原糖。甘蔗成熟的判断标准为brix值超过13%时，ATAGO手持产品PAL系列蔗糖锤度计和MASTER系列蔗糖锤度计(田间检测或者压榨的过程测量)可以很直观的测量brix值从而判断甘蔗收割标准。
在制糖工业生产中，糖液的锤度和纯度的测量，既是对制糖生产过程各工序结果的检验，又是控制生产操作的主要依据。其中，锤度表示糖液含糖的浓度，纯度是表示糖液中的蔗糖含量；糖液锤度和纯度以及其制成品的纯度测量在制糖工业中有着非常重要的意义。
过去传统的测量方法，主要依赖手工检测手段：糖液锤度、纯度以及其制成品的纯度，人工测量流程为检验员从各检测点采样回到化验室后，将高浓度糖液及糖制品首先按要求用天平称取一定重量的糖液或糖制品和相应重量的蒸馏水，算出糖水比例或倍数，然后糖水混合搅拌均匀，形成低浓度糖液，倒入量筒或其它容器，用蔗糖锤度计或折光仪测量锤度和温度，然后取少些低浓度糖液，用旋光仪测量旋光度，后通过人工计算得出原糖液锤度和纯度值，再将测量值记录在案及交给有关操作人员。整过操作过程非常耗时繁琐，对生产过程实时性没有多大指导作用。
随着制糖工业的发展，现在非常迫切需要能在线或快速糖液及糖制品多项指标的测量装置，可以在短时间内了解糖的多项指标，以便及时调整操作。在线糖锤度计，也称为在线糖度计、在线糖度仪，是一种国际上最新的专门用于实时在线连续测量糖的垂度和浓度的仪器。德国默斯 MS-570在线微波糖锤度计，采用进口先进的微波测量技术，可以实时在线测量糖的锤度和浓度，广泛应用于制糖业、食品业、饮料业、烟业、化工业、建材业、纺织业、塑料业等。
据德国默斯高级技术员介绍，MS-570在线微波糖锤度计采用一体式设计，大大简化安装方式，节约安装成本。此外它的结构牢固，无运动部件，机盒达到IP67的防护等级，适用于测量条件恶劣的环境，而且还提供多样化的后台操控软件，以便工作人员轻松采集测量数据，对于糖厂等生产环境恶劣的行业，工作人员无需再现场操作测量仪。
目前，德国默斯积极与广西、云南、广东、福建等全国各地糖厂开展合作，推进在线微波糖锤度计在制糖生产线上的落地应用。与传统的手工检测手段相比，使用在线微波糖锤度计不仅可以有助于提高整个测量工作效率，还可以提高液锤度和浓度以及其制成品的浓度测量精度，对白糖生产过程实时性具有重要的指导作用。